大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻 医学PPT.ppt

大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻 1 2020 3 10 内容提要 2 2020 3 10 仔猪腹泻发生的原因 传染性病因1 1病毒性腹泻传染性胃肠炎 轮状病毒感染1 2细菌性腹泻仔猪黄痢 仔猪白痢 仔猪副伤寒 仔猪红痢 3 2020 3 10 2 免疫系统因素 1 2 3 4 周龄 6 7 5 6 8 4 2 免疫力 主动免疫 被动免疫 母乳 4 2020 3 10 3 应激因素3 1温度骤变皮下脂肪薄 被毛稀少 保温能力差 糖原水平低 产热能力不足 因此仔猪对冷相当敏感 5 2020 3 10 1 2 3 4 周龄 6 7 5 6 8 4 2 免疫力 主动免疫 被动免疫 母乳 断奶 3 2断奶应激 6 2020 3 10 胃酸分泌不足 消化酶活性不高母乳 饲料 饲料 营养 因素4 1营养消化不良 7 2020 3 10 日粮抗原蛋白过敏 导致仔猪腹泻的一个重要因素 饲料 营养 因素4 2日粮抗原过敏 8 2020 3 10 仔猪日粮抗原蛋白的来源 植物性饲料 大豆大豆制品 9 2020 3 10 大豆中含多种抗营养因子 10 2020 3 10 大豆抗原蛋白是由Duke等 1934 首次发现 婴儿过敏 Castimapoolas和Ekenstam 1969 从大豆中分离出4种抗原蛋白 大豆球蛋白 glycinin 伴大豆球蛋白 conglycinin 伴大豆球蛋白 conglycinin 伴大豆球蛋白 conglycinin 大豆抗原蛋白 11 2020 3 10 Glycinin由6个酸性多肽和6个碱性多肽组成的大分子蛋白 360kDa Glycinin晶体结构 占大豆总球蛋白的40 李德发 2003 12 2020 3 10 Conglycinin是大豆中的一种主要贮藏蛋白 13 2020 3 10 孙鹏等 2008 仔猪对glycinin的过敏反应 14 2020 3 10 Glycinin对仔猪小肠内肥大细胞数量及组胺含量的影响 日粮中添加2 或4 的glycinin可显著增加仔猪空肠 回肠内组胺的释放量 孙鹏等 2008 15 2020 3 10 大豆抗原蛋白与仔猪断奶腹泻 饲喂含与不含大豆抗原蛋白的仔猪腹泻情况 Miller 1994 16 2020 3 10 大豆抗原蛋白与仔猪生长性能 大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后第一周生长速度明显下降 P 0 05 Li等 1990 1991 17 2020 3 10 Glycinin对仔猪 24 28日龄 生长性能影响 孙鹏等 2008 纯样品 18 2020 3 10 conglycinin对断奶仔猪 38日龄 生长性能的影响 pigs 19 2020 3 10 大豆抗原蛋白通过诱发幼龄动物的过敏反应 影响机体消化系统和免疫功能 导致腹泻 最后抑制动物生长减少豆粕用量是减轻断奶仔猪过敏反应的有效措施正确的饲喂制度 免疫耐受的产生需要一定时间 断奶后7 10d 教槽料应持续用到断奶后10天 20 2020 3 10 在使用前 对大豆抗原蛋白进行消除是提升大豆及其制品质量 避免仔猪腹泻的关键 21 2020 3 10 大豆抗原蛋白的消除 微生物发酵 外源酶水解 基因工程技术 有机溶剂萃取 多种措施结合 22 2020 3 10 微生物发酵 23 2020 3 10 大豆抗原蛋白 寡肽生物活性肽 抗原活性降低 微生物发酵 24 2020 3 10 微生物发酵工艺 生产工艺 稳定的好 才是真正的好 25 2020 3 10 发酵过程控制 PH值 温度 水分 酸性蛋白酶 半乳糖苷酶 大豆抗原 不良寡糖 降解 降解 枯草芽孢 酵母菌 乳酸菌 26 大豆蛋白在进入动物体内之前降解为小分子蛋白 提高蛋白质的利用率 降低大豆抗原蛋白的抗原活性 降解不良寡糖 棉籽糖 水苏糖 产生有益代谢产物 乳酸 3 具有发酵香味 提高适口性和采食量 豆粕生物发酵的优势 27 2020 3 10 大豆基因工程改良 28 2020 3 10 据报道 三亚基的抗原活性 29 2020 3 10 conglycinin 亚基对大鼠肠道超微结构的影响 正常组 上皮细胞微绒毛结构清晰 试验组 上皮细胞微绒毛结构模糊 郭鹏飞 2007 30 2020 3 10 结果表明 conglycinin的 亚基同样有较强的致过敏活性 31 2020 3 10 RNAGelBlotShowsConglycininCosuppression TransgenicSoybeanSeeds Kinney等 2001 基因敲除 沉默 32 2020 3 10 但研究表明 大豆 conglycinin含量的减少 将伴随着glycinin含量的增加 而glycinin同样是一种抗原蛋白 33 2020 3 10 不同加工工艺大豆蛋白比较 34 2020 3 10 因此生物发酵技术是目前降低大豆抗原蛋白的最佳方法 35 2020 3 10 发酵豆粕的质量差异及大豆抗原蛋白的含量检测 36 2020 3 10 SDS PAGE 定性 抗血清测定 特异性问题 高效液相色谱分析 设备 前处理问题 以抗大豆 conglycinin单克隆抗体为介质的免疫学检测方法 37 2020 3 10 Marker 豆粕对照 发酵豆粕1 发酵豆粕2 发酵豆粕3 发酵豆粕4 发酵豆粕5 发酵豆粕6 电泳图谱 38 2020 3 10 以单抗为介质的ELISA 定量 39 2020 3 10 热处理是应用较为广泛的日粮抗原消除方法 但对于热稳定性高 热加