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什么是病毒载量?其意义是什么? 人类免疫缺陷病毒(HIV)感染机体后,主要侵害CD4 T淋巴细胞,并且以CD4 T淋巴细胞为宿主细胞,大量复制繁殖新的HIV,而后, 新的HIV又去感染未被感染的CD4 T细胞,进入病毒复制的又一循环。这样反复循环,体内就产生了大量的HIV,产生的病毒大部分都是以游离的形式存在于血液中,一部分则藏匿于静止细胞或淋巴结中,而停止复制增生,但它们也随时会再次“出击”,去感染新的细胞。我们在了解HIV/AIDS的相关知识中,经常会看到或听到“病毒载量”这个词,所谓病毒载量即是定量机体内游离病毒的含量。它是一个计数单位, 表示每毫升血浆中含多少拷贝数的HIV-RNA。可以通过此项检测了解机体内血浆中游离病毒的水平。 有三种方法检测病毒载量HIV RNA:1, 分支DNA检测(bDNA拜耳公司)2, 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR, 罗氏公司)3, 核酸序列扩增检测(NASBA, 阿克苏公司)。它们之间的基本原理是不同的,对于核酸水平的检测,PCR的技术是基于探针的放大而bDNA的方法是采用信号放大。由于它们的方法学不同,显示血浆病毒载量的计数单位,也就有所不同,因此在对同一患者进行疾病进展观察及疗效随访监测时,应该采用同样的检测方法,便于对患者检测结果的比较,和分析具有统一的标准。 自90年代初,直接检测血浆病毒RNA 以更敏感,更快速和更方便的途径在血浆中可以定量病毒浓度, 利用病毒载量检测: a. 急性HIV-1感染,病人急性HIV感染期间,处于空窗期时即可检测出高水平的病毒RNA含量。急性期病毒复制高峰期RNA量每毫升可达到910 7拷贝。随着抗体的产生,RNA逐步下降与p24抗原的降低相一致。但直到一年或一年之后,仍可发现每毫升血浆中可含有2-410 4拷贝的水平,而p24抗原则在1-3个月后即不能测得。提示bDNA方法远较p24抗原检测法敏感。b. 判定病人疾病的进程和进展,血浆中HIV RNA的定量分析,可表现出病毒复制动力学,也反应血浆中游离病毒的浓度,是病毒增殖和免疫清除机制共同作用的结果,CD4+T细胞越少的病人显示RNA含量越高。在同一病人的系列标本检测中可以看到bDNA值与CD4+T细胞数呈明显的负相关。因而在判定疾病进程和判定临床治疗效果上具有极大的价值。有些HIV-1感染者用常规方法检测除了抗HIV-1抗体阳性已有12-16年之久,但一直没有临床症状,CD4+T细胞数亦属正常,称之为长期生存病例。人们欲求发现有什麽因素使这些HIV-1感染者免于致病,bDNA检测发现这些病人体内的病毒含量非常低(1500CP/ml), 研究为何这些人群的病毒复制如此低下,对于进一步阐明AIDS的发病机理将会提供新的因素。c.可在接受抗病毒治疗过程中起监测与指导作用,是药物疗效随访和判断的良好指标。在抗病毒治疗早期,可以观察到HIV患者的HIV RNA水平快速下降;随着抗病毒治疗的延续,HIV RNA水平缓慢下降并在相当长的一段时间内维持在一个比较平缓的水平,大部分HIV患者可以下降到检测不出的水平,这说明药物对病毒起到了有效的抑制作用。 d. 病毒载量检测还是观察耐药性问题的重要手段,在治疗过程中,通过病毒载量的监测数据提示并分析是否出现耐药性,再根据耐药性检测确定结果。此外bDNA方法还可以检测淋巴细胞或其他组织和肝脏,淋巴结中的HIV-1 RNA定量。综上所述,检测血浆RNA的水平是判断HI
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