动态下环境监测--+Dr.+Bernd+Kalkert.ppt

动态下环境监测 Dr BerndKalkertSep 2004 2 1 引言 本文的目的是阐述有关无菌产品生产的微生物和微粒控制的概念和原则 这些概念对于无菌产品生产非常重要 但也可用于非无菌产品的生产 环境监测的重点在于其有关的设施控制和符合标准 环境监测的目的在于可帮助建立一个有针对性的 易于管理和有预防功能的程序 3 为确保稳定的生产环境 全面的环境控制程序应包括以下方面 a 合理的厂房设计和维护b 文件系统c 已验证 确认的卫生清洁 消毒程序d 可靠的过程控制e 良好的设备管理和保养f 进入洁净区的有效控制g 有效的培训 证书 资格以及评估程序h 物料及设备的质量保证环境监测是一种评估对生产环境控制的有效性的工具 进入制药厂的洁净室和其它受控环境的程序是无菌保证程序的辅助 4 2 环境级别 应基于科学合理的原则设计和执行环境监测程序 并与生产所在地的政府法规要求相一致 如果是为了供应国际市场 应以最严格的要求作为环境监测的基本原则 5 6 7 8 3 监督保证 从事环境监测程序的人员应具有科学方面的知识 并经过相应的培训和授权 应校准所使用的设备 验证系统 正确制备培养基 所有操作程序应书面成文并遵照执行 9 3 1清洁及卫生 消毒 执行清洁和卫生程序是厂房控制的关键部分 环境监测的数据用于确定这些程序的有效性 消毒剂的选择包括 a 必需的接触时间的评估b 消除的微生物的种类c 有效性的确定d 待处理表面的类型e 毒性f 残留g 使用方法对已建立的清洁和卫生程序进行的验证应证明微生物的减少 其目的是为了证明经培训的清洁人员执行的日常卫生程序能够保证所使用区域的微生物控制是符合使用要求的 采用环境监测过程中获得的分离菌 对所选择的清洁剂和消毒剂进行挑战试验是可靠的方法 10 3 2取样点的选择 取样的主要目的是为了提供有意义的数据 这些数据可以帮助确定目前的或潜在的污染 有关a 特殊操作 b 设备 c 物料 d 加工过程的污染问题 应从最有可能导致产品污染的位置取样 然而 应谨慎确定取样点的位置是接近 但不是接触产品 11 日常监测选择取样点应考虑的因素 a 在这些取样点 是否微生物污染最可能对产品质量有不利影响 b 实际生产过程中 哪些位置是最利于微生物增殖的 c 一些日常监测点是否应轮换 d 哪些位置能代表最难以接近或清洁 消毒的区域 f 区域中的哪些操作导致污染的扩散 g 在指定位置的取样是否严重干扰环境 导致收集了错误的数据或污染产品 取样是否仅在一班的最后进行 12 13 3 3取样频率 单一取样方案不适合于所有环境 选择监测频率的关键是能够确定潜在的系统缺陷 每个点的检验频率可以少于系统或区域的检验频率 在多种情况下 批生产时进行监测可以满足常规区域监测的要求 14 3 4警报和行动水平 一般的 行动水平必须符合官方或行业指南 警报水平可依据环境监测数据的历史分析制定 一旦建立了警报和 或行动水平 应作为日常趋势分析的一部分定期进行回顾 警报和行动水平不是产品规格的扩充 但可作为确定变化的标志 因此可以在产品质量受到不良影响前采取纠正措施 并非所有情况都需要使用警报和行动水平 一般的 严格控制环境中的污染不是在正态分布范围内 15 3 5数据管理 数据收集 日常数据以统一的记录格式汇集到指定的数据库中 数据分析 16 数据整理 应对监测数据进行总结和评估 以确定生产环境是否处于受控状态 统计学方法是进行评估的一种方法 对于数据的显著波动或菌群的改变所产生影响的分析 应基于有资质的人所作出的判断 评估过程应考虑的情况 a 出现高于一般值的数值时 可能预示工艺规格不再合适 可能需回顾工艺参数 b 几个连续点或偏离可看作是一组 如果高于警报水平 表示需进行调查 c 数值的显著波动或跳跃也是很重要的 重复出现可能显示出周期性的变化 d 一个或一个以上的数据显著高于或低于大多数数据时 可以计算在内或不计算在内 17 3 6分离菌的检定 检定环境和人员监测中获得的微生物是监测程序的重要部分 最初 检定的许多分离菌可建立一个区域中所发现的微生物的数据库 一旦数据库建立 日常的检定应继续进行以确定分离菌是正常菌群的一部分或是其它不同的微生物 分离菌的检定也可用于环境的调查 例如阳性无菌检查结果 阳性培养基灌封结果 警报和行动水平偏移 或引入一种可给出耐清洁剂信号的普通生物体 菌群的变化或系统中出现一种以前未检测到的菌时 应进行调查 检定可为分离菌的来源提供有用的线索 例如 金黄色葡萄球菌通常在皮肤上发现 铜绿假单胞菌常常与水有关 18 3 7调查 纠正措施 当偏移发生时 可能会与基准线有偏差 应进行调查以确定发生何种偏差以及采取何种措施来防止此类偏差再次发生 记录应显示偏差已确认并且采取了适当的措施 当超过警报或行动水平时 可采取下列措施 a 通知有关的管理者 开始调查 以确定偏离指定操作参数的原因和结果 b 执行纠正措施 着手解决问题 c 回顾后续行动以评估纠正措施的有效性 19 20 3 8文件 文件记录中应考虑的项目 a 检验的日期和时间b 检验方法 参考程序c 检验的行动水平d 鉴别仪器e 位置f 区域分类g 平面图显示取样点h 取样点 关键点或非关键点 I 检验结果j 结果的评估k 显示数据结果l 警报和或行动水平m 温度和培养时间n 核对检验结果o 报告日期 批准日期 以及所使用培养基的失效期 p 污染的检定q 回顾者姓名r 报告日期s 历史数据的回顾t 变更控制系统u 所使用仪器的校准日期v 确定行动或警报水平的分析方法w 记录调查 纠正措施的文件系统 1 缺陷的描述2 可能的原因3 纠正措施相关责任人的确定4 行动步骤的描述以及执行进度表5 行动有效性的评估 21 4 监测系统 4 1 1最终灭菌最终灭菌环境控制程序与影响灭菌前产品的生物负载和内毒素含量的微生物菌群有关 包括蒸馏水 灭菌冷却水 精制水 自来水 空气 表面 容器和盖子的微生物限度 此程序的最关键部分是已灌装的待灭菌产品的生物负载 这部分保证灭菌过程中出现的芽孢 耐热 生物负载限度不超过经验证的灭菌能力 并且达到期望的灭菌水平 4 1 2无菌灌装监测的取样点数量和频率通常大于已建立的最终灭菌过程监测点的数量和频率 灌装间内的空气 水 人员 压缩空气 地面 墙壁 设备 表面 有效的环境控制是无菌制剂生产过程的一部分 是保证无菌的关键因素 无菌灌装产品的生产文件中应包括日常环境监测数据的回顾 22 洁净蒸汽检测频率 每月一次检测项目限度内毒素警报水平 0 12EU ml 行动水平 0 25EU ml微粒数光阻法 HIAC 10微米max 500个 100ml 25微米max 20个 100ml微滤法 MF 25微米max 100个 100ml 50微米max 10个 100ml金属微粒 100微米max 1 100ml化学性质必须符合药典中注射用水的要求 23 氮气检测频率 每月一次检测项目限度微生物数量警报水平 10cfu m3 行动水平 100cfu m3压缩空气检验频率 每月一次检测项目限度微生物数量警报水平 10cfu m3 行动水平 100cfu m3 24 高压灭菌锅中的水检验频率 微生物计数 每周一次 内毒素 每两周一次 电导率 连续检测检测项目限度微生物数量警报水平 5cfu 100ml 行动水平 10cfu 100ml不得检出大肠杆菌 大肠菌群和铜绿假单胞菌内毒素警报水平 0 12EU ml 行动水平 0 25EU ml电导率max 15microS cm 25 4 2水的监测 水中微生物数量的控制对于药品生产厂非常重要 因为水可用于制剂产品以及各种清洗和冲洗程序 水的来源或供给应满足饮用水的标准要求 这些要求保证水中无大肠菌群 如果使用点的水使用前是循环的 收集同一循环中的样品是适当的 如果生产过程需要使用水管 那么取通过水管 而不是直接来源于水龙头的样品 取样后立即进行微生物检验 如果不能立即进行检验 实验室收到样品后应在2 8 C条件下冷藏样品 取样和检验之间的时间间隔通常不超过24小时 26 纯化水检测项目限度微生物数量警报水平 50cfu ml 行动水平 100cfu ml不得检出大肠杆菌 大肠菌群和铜绿假单胞菌内毒素警报水平 0 12EU ml 行动水平 0 25EU ml电导率警报水平 1 0microS cm 行动水平 1 5microS cm 连续 TOC警报水平 250ppb 行动水平 500ppb 连续 27 注射用水检测频率 每天 微粒 每月检测项目限度微生物数量警报水平 5cfu 100ml 行动水平 10cfu 100ml不得检出大肠杆菌 大肠菌群和铜绿假单胞菌内毒素警报水平 0 12EU ml 行动水平 0 25EU ml电导率警报水平 1 0microS cm 行动水平 1 5microS cm 连续 TOC警报水平 250ppb 行动水平 500ppb微粒光阻法 HIAC 10微米max 500个 100ml 25微米max 20个 100ml微滤法 MF 25微米max 100个 100ml 50微米max 10个 100ml金属微粒 100微米max 1 100ml 28 4 3压缩空气的监测 应考虑以下几点 a 用于密封或保护无菌贮罐中产品的压缩空气应经过疏水的通风过滤器 并按一定的频率进行监测 以保证过滤器能有效过滤细菌 b 用于无菌环境的压缩气体 空气应采用无菌级的过滤器过滤 并按一定的频率进行检验 以保证气体 空气对环境无不良影响 c 所有不影响操作间中空气的压缩气体可按较少的频率进行监测 29 4 4空气监测 环境监测程序应包括有活性和无活性的空气中悬浮微粒的日常监测 来源于人体的活菌与皮肤的脱落物有关 因此无活性微粒的数量高可能指示活性数量的增加 人是环境中活性和无活性微粒的主要来源 除满足法规中要求的动态监测之外 静态监测也可能是必需的 30 4 4 1无活性微粒的监测 生产过程中有暴露过程的产品 应证明环境中的潜在污染是受控的 0 5um或更大的微粒通常作为环境污染的指标 对5 0um微粒的监测也可包括在内 通常使用的监测方法是目视微粒计数 此方法的原理是使带有悬浮粒子的气体通过一个聚焦光源 使得光线在单个微粒表面发生散射 微粒的尺寸和数量可同时测量 除便携式微粒计数器外 已研制出的监测系统可永久安装在生产区域 连续监测生产过程 并有集中数据存储和报警功能 31 4 4 2活性微粒的监测 空气中的微生物通常与固体或液体微粒有关 生物体可能粘附尘粒或其它小载体 如果没有附着 也存在自由流动的微粒悬浮在空气中 4 4 2 1监测点监测位置 在灌装 密封过程中 距离操作点不超过1英尺 并且在气流的上游 除最初验证 确认时环境 人流和生产过程的取样点之外 应选择其它的监测位置 4 4 2 2方法环境中主动气体取样是为了证明可能存在的活性悬浮微粒是受控的 个别国家要求使用平皿暴露法和主动空气取样法 空气中悬浮微粒的监测程序可能要求使用主动和被动空气取样两种方法 32 4 4 2 3设备 表面空气取样器 SurfaceAirSampler SAS取样器的工作原理 空气通过涡轮被吸入装置中 被吸在一个培养基平板的表面 优点 轻便灵活独立的电源带孔的盖板可蒸汽灭菌可测量大量空气使用标准培养基板可测量气流 Slit to Agar STA 空气取样器在距裂缝口的精确位置处 使用一可旋转的琼脂平板 气体样品直接撞击固体营养培养基的表面 优点 可测量大量气体可利用时间 浓度关系可使用微量取样探针可用于压缩气体的取样缺点 设备大而不便有些设备不能蒸汽灭菌 33 离心取样器工作原理 空气通过涡轮被吸入装置中 微粒由于地心引力而沉积在固体营养采集培养基 带状 的表面 优点 轻便灵活独立的电源收集顶部可蒸汽灭菌可测量大量空气可测量气流缺点 培养带来源单一 表面真空取样器取样器使用不锈钢容器 填充有营养培养基的培养皿置于容器中 利用真空系统将空气样品 和微粒 吸在培养平板的表面 优点 整个取样部分可蒸汽灭菌可用于压缩气体的取样可遥控放置可测量气流可取样大量气体缺点 设备有些笨重 带有真空系统 34 液体气雾捕集法此种方法是使空气通过一个管子 管子的出口在液体收集培养基的液面下 优点 可选择培养基 例如磷酸盐缓冲液 PBS 或培养基 培养基中可能需加防沫剂 有生长力的细胞在液体培养基中更易存活价格便宜缺点 样品处理可能会引起污染 过滤法此方法使用空气取样器 取样器采用真空系统将空气吸过一个过滤器 使得颗粒聚集在过滤器上 无菌转移此过滤器 并在合适的营养培养基上进行培养 优点 可测量大量气体过滤器培养基和可用的孔径选择广泛可测量气流缺点 收集样品的膜必须放置在营养培养基上 35 平皿放置法此方法使用有固体营养培养基的细菌培养皿 细菌培养皿直接暴露在环境中 空气中的微粒沉积在琼脂的表面 培养后可直接计数 优点 使用简便经济实际上任何培养基都可使用可沿着灌装线放置可连续监测 通过更换培养皿延长监测时间不需要提供能量缺点 微生物数量与空气体积无关 沉积的微粒受微粒大小 温度和通过其表面的气流 空气量的影响 如果暴露时间太长 平皿会变干 36 空气中微生物的监测平皿放置法 频率和限度cfu 25cm2 微生物数量级别需氧菌霉菌和酵母菌厌氧菌警报水平行动水平 A 无菌灌装 最少每季度4h最少每年4h00 每一灌装前的准备工作最少30 每一无菌连接操作最少30 整个灌装期间 max 4h 平皿 灌装后最终灭菌产品 灌装过程中最少每天4小时 B 无菌灌装最少每季度4h最少每年4h15 整个灌装期间 max 4h 平皿 灌装后最终灭菌产品 灌装过程中最少每天4小时C 最少每周4h最少每季度4h最少每年4h950 D最少每月4h最少每季度4h最少每年4h10100E 最少每月1h最少每季度1h最少每年1h13100 37 4 4 3表面监测 所使用培养基的类型可能影响取样点代表菌群的检测 培养基中可加入中和剂 使得经过化学消毒剂处理的表面钝化 1 接触平板法通常使用接触平板是因为其使用方便 并可提供定量结果 一般平板的直径是50mm 并且是经填充的 因此培养基形成半球型 培养基的表面可被压成一个平坦的表面 因而采样面积大约25cm 然后培养皿按照要求的培养时间放置在培养箱中 缺点 不适用于不规则表面如果培养基是湿的 可能发生微生物聚集培养基的残留物必须从取样点移走 38 2 擦拭法此方法适用于无法使用接触平板的设备和不规则表面 擦拭物的类型包括棉花 达克龙 聚酯纤维 和藻酸钙 藻酸钙的纤维可以溶化 因此可将所有收集的微生物释放到溶液中 缺点 方法和取样可能影响结果需经处理才能培养样品3 表面冲洗法此方法最适用于需确定内表面生物负载的大表面积区域 无菌水是常用的用于冲洗内表面的液体 然后可通过膜过滤法收集和检验 缺点 多数设备不适用需大量操作方法和取样过程可能影响结果 39 表面微生物监测频率和限度cfu 25cm2 微生物数量级别需氧菌霉菌和酵母菌厌氧菌警报水平行动水平A 无菌灌装最少每季度一次最少每年一次00 每一灌装前的准备工作 每一无菌连接操作 最少每班一次 灌装后最终灭菌产品 最少每周一次闲置的A级洁净区域 最少每周一次B 无菌灌装最少每季度一次最少每年一次15 最少每班一次 灌装后最终灭菌产品 最少每周一次闲置的B级无菌室 最少每周一次C 最少每周一次最少每季度一次最少每年一次525D 最少每月一次最少每季度一次最少每年一次550 40 主动取样的频率和限度 RCS 微生物数量级别需氧菌霉菌和酵母菌厌氧菌警报水平行动水平A 无菌灌装最少每季度一次最少每年一次00 最少每班一次最终灭菌产品 最少每周一次闲置的无菌室 最少每周一次B 无菌灌装最少每季度一次最少每年一次 510最少每班一次最终灭菌产品 最少每周一次闲置的无菌室 最少每周一次C 最少每周一次最少每季度一次最少每年一次30100D 最少每月一次最少每季度一次最少每年一次20200E 最少每月一次最少每季度一次最少每年一次220500 41 4 5人员监测 人是无菌环境中污染的主要来源 培训 任职资格培训 任职资格包括以下几方面a 人员的卫生 习惯1 头发 皮肤 手指甲和衣服的清洁2 无化妆品 指甲油 修剪的手指甲 指甲胶 口香糖 糖果3 不允许吃东西 喝水 咀嚼口香糖或吸烟b 疾病1 报告所有感冒 流感 传染病 伤口 晒伤2 报告所有疾病或慢性皮肤病c 着装1 工厂或洁净区专用的统一洁净服2 不佩带手表或珠宝3 保护性衣服d 微生物的介绍1 微生物种类的一般来源e 无菌技术的介绍 f 更衣程序1 人员更衣程序是经证明合适的 例如 未增加污染 2 除前额 面罩 颈部 头后部 衣服拉练 手臂 手指日常监测点外 更衣程序还可包括其它取样点 3 日常监测可包括洁净服两前臂和两手手指的取样 所有侧面可能也需要进行评估 42 再培训a 更衣证书如果来自洁净服或手指涂抹的样品超过警报 行动水平 应在进入经批准的无菌区域时 对员工进行有关程序的再培训并再次证实合格 b 日常监测如果来自洁净服或手指涂抹的样品超过行动水平 可能需要对员工进行有关程序的再培训或再次取样 如果出现超过警报 行动水平的趋势 应考虑将该员工指派在无菌区域外担任新的职责 所有在无菌环境中工作的员工都应接受再培训并再次证实合格 所有与无菌生产有关的员工应至少每年参加一次模拟生产测试 培养基灌装 43 无菌室的人员检验频率 无菌灌装每班和所有有关人员 包括维修人员最终灭菌产品最少每周每班1位员工监测点限度微生物数量ClassA 警报水平 0cfu 25cm2 行动水平 0cfu 25cm2ClassB 警报水平 1cfu 25cm2 行动水平 5cfu 25cm2不得检出杆菌 革兰氏阴性菌 霉菌和酵母菌 44 45 4 6产品或组分的生物负载 非无菌产品进行生物负载检验以确定其微生物总量 仅生物负载量不能提供足够的信息 可能需要评估生物负载的耐热性或D值 如果生物负载的耐热性超过了灭菌方法所能达到的限度 即使是在限度内的总生物负载量也可能引起重大问题 46 47 谢谢 EnvironmentalMonitoring apracticalapproach Dr BerndKalkertSep 2nd 2004 49 1 Introduction Thepurposeofthisdocumentistoidentifymicrobiologicalandparticulatecontrolconceptsandprinciplesastheyrelatetothemanufactureofsterilepharmaceuticalproducts Theconceptsforsterileproductmanufacturingarethemoststringentapplication buttheseconceptscanalsobeappliedtonon sterileproductmanufacture Thefocusisenvironmentmonitoringasitrelatestofacilitycontrolandcompliance Thiswascompiledtoaidinsettingupaprogramthatismeaningful manageable anddefendable 50 Inordertoensureaconsistentlyacceptableproductionenvironment acomprehensiveenvironmentalcontrolprogramshouldbesupportedby a soundfacilitydesignandmaintenanceb documentationsystemsc validated qualifiedsanitization disinfectionproceduresd reliableprocesscontrolse goodhousekeepingpracticesf effectiveareaaccesscontrolsg effectivetraining certification qualificationandevaluationprogramsh qualityassuranceofmaterialsandequipmentEnvironmentalsurveillanceisatoolutilizedtoevaluatetheeffectofcontrolsonthemanufacturingenvironment Aprocesstoassessthecleanroomandothercontrolledenvironmentsofapharmaceuticalfacilitycanserveasanadjuncttothesterilityassuranceprogram 51 2 Environmentalclassification Theenvironmentalmonitoringprogramshouldbedesignedandimplementedbasedonsoundscientificprinciplesandinconformancewiththeregulatoryrequirementsofthegovernmentagenciesregulatingthemanufacturingsite Iftheintentistoserveinternationalmarketsthemoststringentrequirementsshouldbeevaluatedasthebasisofanenvironmentalmonitoringprogram 52 53 54 55 3 Surveillancesupport Thepersonnelsupervisingtheenvironmentalmonitoringprogramshouldbecompetentinthescientificdisciplineandhaveappropriatetrainingandauthority Equipmentusedshouldbecalibrated systemsshouldbeappropriatelyvalidated mediashouldbeproperlyprepared andalloperationalproceduresshouldbewrittenandfollowed 56 3 1Cleaning sanitization disinfection Implementationofcleaningandsanitizationproceduresisacriticalcomponentofoverallfacilitycontrol Environmentalmonitoringdataareusedindeterminingtheeffectivenessoftheseprocedures Selectionofsanitizersmayinclude a evaluationofrequiredcontacttimeb typeofmicroorganismsthataretobeeliminatedc confirmationofefficacyd typeofsurfacetobetreatede toxicityf residueg meansofapplicationValidationofestablishedcleaningandsanitizationproceduresshoulddemonstratemicrobialreduction Thegoalistodemonstratethatroutinesanitizationprocedures performedbytrainedcleaningpersonnel consistentlyresultinalevelomicrobialcontrolsuitablefortheintendeduseofthearea Itisasoundpracticetoperformchallengetestingoftheselectedsanitizers disinfectantswithisolatedroutinelyrecoveredbytheenvironmentalmonitoringprogram 57 3 2Samplesiteselection Theprimarypurposeofsamplingshouldbetoprovidemeaningfuldatathatcanhelpidentifyactualorpotentialcontaminationproblemsassociatedwitha specificprocedures b equipment c materials d processes Oneshouldbeabletosamplethosesitesmostlikelytoresultinproductcontaminationiftheybecomecontaminated however itmaybeprudenttoidentifyindicatorsitesthatarenear butnotincontactwithproduct 58 Factorstoconsiderinselectingsitesforroutinesurveillanceare a Atwhichsiteswouldmicrobialcontaminationmostlikelyhaveanadverseeffectonproductquality b Whatsiteswouldmostlikelydemonstrateheaviestmicrobialproliferationduringactualproduction c shouldsomesitesforroutinemonitoringberotated d whatsiteswouldrepresentthemostinaccessibleordifficultareastoclean sanitize ordisinfect f Whatactivitiesintheareacontributetothespreadofcontamination g Wouldtheactofsamplingatagivensitedisturbtheenvironmentsufficientlytocauseerroneousdatatobecollectedorcontaminateproduct Shouldsamplingonlybeperformedattheendoftheshift 59 60 3 3Samplingfrequency Nosinglesamplingschemeisappropriateforallenvironments Thekeyistoselectmonitoringfrequenciesthatcanidentifypotentialsystemdeficiencies Thetestfrequencypersitemaybelessfrequentthanthesystemorareafrequency Inmanycases monitoringperformedinconjunctionwithbatchproductionmayfulfilltherequirementsforroutineareamonitoring 61 3 4Alertandactionlevels Typically theactionlevelswillbedrivenbytheregulatoryorindustryguidelineswhilethealertlevelsmaybedrivenbyhistoricalanalysisoftheenvironmentalmonitoringdata Oncealertand oractionlevelshavebeenestablished theyshouldbeperiodicallyreviewedaspartofroutinetrendanalysis Theyarenotextensionsofproductspecifications butareintendedtoflagchangessothatcorrectiveactionmaybetakenbeforeproductqualityisadverselyaffected Notallsituationsrequireuseofbothalertandactionlevels Typically contaminationinstrictlycontrolledenvironmentsdoesnotfallwithinanormaldistribution 62 3 5Datamanagement Datacollection routinedatamaybepooledintoadesignateddatabaseinaconsistentrecordformat Dataanalysis 63 Datainterpretation Datageneratedshouldbesummarizedandevaluatedtodeterminewhethertheproductionenvironmentisinastateofcontrol Statisticalprocesscontrolisonemethodofperformingthisevaluation Interpretationoftheimpactofasignificantfluctuationincountsorachangeinflorashouldbebasedontheexperiencedjudgementofaqualifiedperson Considerationsforassessingprocessstateofcontrol a Highervaluesthanthosecurrentlyimposedmaybeindicativeofaprocessspecificationthatisnolongerappropriate Areviewoftheprocessmaybeneeded b Severalconsecutivepointsordriftsmaybeconsideredtobeapatternorclusterformationthat ifabovethealertlevel signalsatrendthatrequiresaninvestigation c Significantfluctuationsorjumpsinthevaluesfortheprocessarealsosignificantwhererecurringcyclesmaypointtoseasonalvariations d Oneormorevaluesmarkedlyhigherorlowerthanthemajorityofthedatamayormaynotbeprocessoutliers 64 3 6Characterizationofisolates Characterizingmicroorganismsrecoveredfromenvironmentalandpersonnelmonitoringisanimportantpartofsurveillanceprograms Initially manyisolatesmaybecharacterizedtoestablishadatabaseofthemicroorganismsfoundintheareaOnceadatabaseisestablished routinecharacterizationshouldcontinuetodeterminewhetherisolatesarepartofthenormalmicrobialfloraorrepresentsomethingdifferent Characterizationofisolatesalsomaybeusefulininvestigatingsituationssuchaspositivesterilitytestresults positivemediafillresults alertandactionlevelexcursions orintroductionofacommonorganismthatmaysignaladevelopingresistancetoasanitizingagent Achangeinthemicrobialfloraortheintroductionofapreviouslyundetectedspeciesmightsignifyachangeinasystemthatshouldbeinvestigated Characterizationcanbeusefulcluesastothepossiblesourceofisolates Forexample StaphylococcusspeciesarecommonlyfoundonskinandtheformerPseudomonasspeciesareusuallyassociatedwithwater 65 3 7Investigations correctiveactions Whenexcursionsoccur theremaybeadriftfromthebaseline Aninvestigationisneededtodeterminewhathappenedandwhatshouldbedonetopreventarecurrence Recordsshouldshowthattheexcursionswererecognizedandappropriatefollow upoccurred Whenanalert actionlevelisexceeded thefollowingactionsmaybeappropriate a Notifytheappropriatemanagement Initiateaninvestigationtodeterminethecausesandconsequencesoftheexcursionfromthespecifiedoperatingparameters b Performcorrectiveactionstoaddresstheproblemasneeded c Follow upreviewtoassesseffectivenessofcorrectiveaction 66 67 3 8Documentation Itemstobeconsideredfordocumentationrecords a Dateandtimeoftestb Testmethod procedurereferencec Activitylevelatsiteduringtestd Equipmentidentificatione Locationf Areaclassificationg Schematicsofareasshowingsamplesitelocationsh Samplesite criticalornon critical I Testresultsj Evaluatorofresultsk Dateresultsreadl Alertand oractionlevelm Temperatureanddurationofincubationn Controltestresultso Certificationdate validationdate andexpirationdateofmediausedp Characterizationofcontaminantsq Nameofreviewerr Reportingofdatas Reviewofhistoricaldatat Changecontrolsystemu Calibrationdateoninstrumentationv Methodology analysisusedtospecifyaction alertlevelsw Systemfordocumentinginvestigative correctiveaction 1 Descriptionofdeficiency2 Possiblecause s ofproblem3 Identificationofpersonsresponsibleforrelevantcorrectiveaction4 Descriptionofactionstepsandtheirscheduleforimplementation5 Evaluationofeffectivenessofactionsteps 68 4 SystemSurveillance 4 1 1TerminalSterilizationTheterminalsterilizationenvironmentalcontrolprogramisconcernedwithmicrobialflorathatcontributestothebioburdenandendotoxincontentoftheproductpriortosterilization Thisincludesdistilledwater sterilizercoolingwater treatedwater citywater air surfaces microbiallevelsofcontainersandclosures Themostcriticalaspectoftheprogramisthebioburdenofthefilledproducttobesterilized Thisaspectensuresthatthespore heatresistant bioburdenlevelspresentedtotheproductsterilizationcycledonotexceedthevalidatedcapabilitiesoftheprocessandthatthedesiredsterilityassurancelevelsareachieved 4 1 2AsepticfillingThenumberofsamplesitesandfrequencyofmonitoringaregenerallygreaterthanthatmonitoredforestablishedterminalsterilizationprocesses Air water personnel compressedgases floors walls machinery surfaceswithinthefillingroom Adequateenvironmentalcontrolisanintegralpartoftheasepticmanufacturingprocessandacriticalfactorincontributingtosterilityassurance Areviewoftheroutineenvironmentalcontroldatashouldbeincludedinthemanufacturingdocumentationforasepticallyfilledproducts 69 PureSteamFrequencyoftesting 1xpermonthTestingpointsLimitsEndotoxinsAlertlevel 0 12EU ml actionlevel 0 25EU mlParticlesHIAC 10micronmax 500particles 100ml 25micronmax 20particles 100mlMF 25micronmax 100particles 100ml 50micronmax 10particles 100mlMetalparticles 100micronmax 1 100mlChemicalsmustmeetrequirementsofPharmacopoeaforWFI 70 NitrogenFrequencyoftesting 1xpermonthTestingpointsLimitsMicrobiologicalAlertlevel 10cfu m3 actionlevel 100cfu m3CompressedairFrequencyoftesting 1xpermonthTestingpointsLimitsMicrobiologicalAlertlevel 10cfu m3 actionlevel 100cfu m3 71 WaterinautoclaveFrequencyoftesting Microbialcount1xperweek endotoxinsevery2weeks conductivitycontinuouslyTestingpointsLimitsMicrobialcountAlertlevel 5cfu 100ml actionlevel 10cfu 100mlAbsenceofE coli coliformsandP aeruginosaEndotoxinsAlertlevel 0 12EU ml actionlevel 0 25EU mlConductivitymax 15microS cm 72 4 2Watermonitoring Controlofthemicrobialqualityofwaterisofgreatimportanceinthepharmaceuticalmanufacturingfacilitysinceitmaybeusedforformulatingproduct aswellasforvariouswashingandrinsingprocesses Thesourceorfeedwatershouldmeettherequirementsofdrinkingwaterstandard Theserequirementsensuretheabsenceofcoliforms Ifusepointsareroutinelyflushedpriortouse itisappropriateforsamplestobecollectedwiththesameflushcycle Samplethroughhosesandno