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文档简介

Tetramer 四聚体 技术 原理应用产品 外源性抗原加工递程 抗原特异性CTL的分析方法 51Cr释放实验 PCR法 ELISPOT 扩增特异T淋巴细胞受体 Tetramer 间接法 需大量的特异性CTLs作为效应细胞需体外扩增 周期长 敏感性低 敏感性高但只能用于已知TCR基因型的特异性CTLs检测 迅速 灵敏 直接 特异性强 方法简单 无需刺激 目前已成为定量检测特异性CD8 T细胞的金标准 有限稀释法 LDA T细胞反应时敏感性 特异性和可重复性都很高 操作简单迅速 需要少量标本 Tetramer与ELISPOT区别 Tetramer 的T细胞并不能分泌细胞因子和 或无细胞毒活性 而某些CD8 T细胞能分泌细胞因子和 或细胞毒活性 却不能和tetramer结合 表明单独采用tetramer技术能精确反映机体具有高度抗原特异性的CD8 T细胞群 但并不能精确反映机体的保护性免疫状态 必须结合相应的功能实验进行综合评估 原理应用产品 1 感染性疾病 HIV AIDS EBV CMV HPV HBV HCV IV Measles Malaria TBandRSV 含有HIV I型病毒包膜肽等三种抗原肽 HIV特异性CTL数量与血浆中RNA病毒量有明显的负相关 而与产毒性感染细胞的清除率无关 慢性HCV感染患者的特异性CTLs数量明显少于急性HCV感染和已康复患者 2 肿瘤 Breast Prostate Melanoma Colon Lung Cervical OvarianandLeukemia 用黑色素瘤抗原诱导潜在的肿瘤特异性T细胞 用Tetramer分离 富集 3 移植 GVHD 移植物抗宿主反应 受体与供体的次要组织相容性抗原 mHags 的不同引起 在骨髓移植后早期出现 14天内 造成骨髓移植失败 HLA mHags肽四聚体监测mHags特异性CTL 以了解对GVHD的临床治疗效果 HLA A2 pp65Tetramer监测肾移植患者感染CMV后的免疫应答能力 EBVandCMV 4 自身免疫性疾病 Diabetes Lymedisease Multiplesclerosis Rheumatoidarthritis Autoimmunevitiligo 原理应用产品 Tetramer难点 合成及稳定MHC 类分子 抗原表位的选择 公司合成 荷兰 Sanquin 人 FLU HIV CMV EBV RSV HBV HPV tumour鼠 OVA 卵清蛋
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