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实验计划书范文 果胶酶(木质素酶木聚糖酶脂酶,酯酶,蛋白酶,几丁质酶,纤维素酶)产生菌的筛选鉴定产酶条件及分离纯化研究广西壮族自治区拥有中国面积最大的红树林,而红树林是最具生命力的四大海洋生态系统(红树林珊瑚礁上升流和海岸湿地).红树林生活在热带亚热带海岸潮间带,其生境具有强还原性、强酸性、高含盐量、营养丰富等特征。 因此,这里的微生物资源既丰富又不失特色,主要类群为细菌、真菌、放线菌、微型藻类等。 其中已分离鉴定出的红树林真菌超过百种,成为海洋真菌第二大类。 在热带红树林中,微生物的组成大致为:细菌和真菌占微生物资源总量的91%,藻类和原生动物分别占7%和2%。 目前,已发现并且分离出许多新的菌种,例如我国新发现的两个海生疫霉种(泡囊海疫霉、刺囊海疫霉)、II型甲烷氧化菌等。 正在研究中的红树林微生物有高效固氮菌、溶磷细菌、硫化还原菌、光合厌氧菌、产甲烷菌及红树林真菌。 红树林生境非常特殊,因此微生物产酶情况也具有特殊性。 在红树林内,凋落物非常丰富,在凋落物分解过程中微生物产生的酶以纤维素分解酶、木质素分解酶为主。 实验表明,红树林区绝大多数真菌都能产生用于降解木质素、纤维素和其他植物成分的酶,某些地区的放线菌也能产生纤维素酶;另外,红树林内一些放线菌还产生如-淀粉酶抑制剂、胰蛋白酶抑制剂、胃蛋白酶抑制剂以及几丁质酶等生物活性物质。 除主要的纤维素酶和木质素酶外,红树林微生物还生产如果胶酶、木聚糖酶(属半纤维素酶)、蛋白酶、葡萄糖酶、脂肪酶、淀粉酶和琼脂糖酶等用途广泛的酶类。 例如,在台湾淡水河口的红树林真菌、放线菌大部分均能产生纤维素酶、果胶酶、蛋白酶、脂肪酶、琼脂糖酶。 还有人从台湾海峡红树林土壤中分离到一株产纤维素酶的短小芽孢杆菌S-27,该菌只产生葡聚糖内切酶。 在印度果阿的红树林中,异养细菌具有纤维素水解、果胶水解、淀粉水解和蛋白质水解活性,而红树植物的降解真菌具有果胶酶、蛋白酶、淀粉酶活性并具有降解木质纤维素化合物的能力。 红树林内微生物产酶多样化,这些酶类物质在医药卫生、工农业生产、生活资料加工上也都有着广泛的用途。 纤维素酶的用途就极为广泛,可在纺织工业中作为生物剂(如靛蓝牛仔服的酶洗和棉、Tencel、粘胶、黄麻、亚麻及其混纺织物的生物)、饲料生产中作为生物添加剂、果蔬加工中提高果汁或药物的萃取率,另外在石油开采、发酵工业、造纸、中成药加工、洗涤剂工业、垃圾治理等方面,纤维素酶和木质素酶都有着非常广泛的用途。 因此,大力开发红树林微生物酶资源对生产生活具有重要意义。 红树林土壤放线菌类群的优势菌群,一般表现为小单胞菌和链霉菌。 林鹏等从我国福建九龙江口红树林土壤中分离到小单胞菌(M icromonospora)、链霉菌(S treptomyces)、链轮丝菌(S treptoverticillium)、红球菌(Rhodocous)、小多胞菌(M icropolyspora)和游动放线菌(Antinoplanes)等6个属的放线菌,其中多数为小单胞菌和链霉菌,分别占56.0%90.9%和9.1%25.0%。 雷湘兰从红树林等环境中分离到114株稀有放线菌,分布在7个属,分别是链轮丝菌属、游动放线菌属、诺卡氏菌属、马杜拉放线菌属、链孢囊菌属、小四孢菌属、小单孢菌属。 洪亮从海南清澜港红树林、湛江红树林、深圳红树林、儋州红树林、三亚红树林、北海红树林和福建红树林分离到103株稀有放线菌,分布在5个属,分别是小单孢菌属、诺卡氏菌属、红球菌属、戈登氏菌属、马杜拉菌属。 肖静和喻子牛等从福建漳江口红树林自然保护区的土壤沉积物分离到小单孢菌、糖单孢菌、马杜拉放线菌和拟诺卡氏菌属.果胶酶生产菌种目前生产微生物果胶酶的菌种很多,极其广泛,包括细菌、霉菌、酵母菌和放线菌。 如芽孢杆菌属(Bacillus)、青霉属(P enicillum)、欧文氏菌(E rwinia)、根霉属(Rhizopus)、曲霉属(As2pergillus)、克鲁维酵母属(Kluyveromy2ces)、侧孢霉属(Sporotrichum)、多子菌属(P ol2yporus)、密螺旋体菌属(Treponema)、酵母属(Sac2charomyces)、刺盘孢属(Colletotrichum)、螺孢菌属(Spirillospora)、假单胞菌属(P seudomonas)、毛霉属(Mucor)、毕赤氏酵母属(P ichia)等。 实验主要进程一筛选先富集培养，然后取稀释液接种到分离培养基，培养基的果胶浓度依次为1%、2%、4%，完成驯化，然后以果胶酶活测定方法进行复筛，从而获得一株能较强分解果胶质能力的菌株二鉴定形态特征