毛细管气相色谱法测定托拉塞米有机溶剂残留量.doc

毛细管气相色谱法测定托拉塞米有机溶剂残留量摘要：目的 建立气相色谱(GC)测定托拉塞米中甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯5种有机残留量的测定方法。方法 采用直接进样毛细管气相色谱法，色谱柱为：DB-624色谱柱（30m530mm3.0mm），载气为氮气，FID检测器，DMSO为溶剂。结果 此色谱条件下被测物均能得到很好的分离，峰面积与质量浓度呈良好的线性关系，回收率良好。结论：方法简便、灵敏，结果准确、可靠，适用于托拉塞米中有机残留量的检测。关键词：托拉塞米；有机残留量；毛细管气相色谱法Detection of residual solvents in Torasemide by GCAbstract：Objective To develop a GC method for the residual solvents ( methanol，ethanol，dichlormethane，acetic ether，toluene， pyridine in TorasemideMethod The chromatographic systems included a DB-624 column, and a FID detector, nitrogen was used as carrier gas, and DMSO as solvent. Results The calibration curves of four solvents were linear and their recoveries were satisfactoryConclusion The method is accurate and reliable.It can be applied in detection of residual solvents in Torasemide.Key words: Torasemide；residual；GC托拉塞米是新一代高效髓袢利尿剂，于1993年在德国上市，次年在美国上市。20多年临床应用证实，托拉塞米适应证广，利尿作用迅速强大且持久，不良反应发生率低，更符合药物经济学要求，是临床上值得推广的一类高效利尿剂。托拉塞米有利尿、排Na+和排C1-作用，但不显著改变肾小球滤过率、肾血浆流量和酸碱平衡。作用于髓袢升支粗段，干扰管腔细胞膜的Na+、K+、2C1-同向转运体系，抑制C1-和Na+的重吸收，使管腔液NaCl的浓度增高，渗透压增大，肾髓质间液的NaCl减少，渗透压梯度降低，从而干扰尿的浓缩过程，使尿Na+，Cl-和水的排泄增加。人体研究也证实该品作用于该部位，对肾单元其他部位的影响尚不明确。该品的抗高血压机制与其他利尿剂一样尚未完全了解，可能是由于其降低了总外周阻力。由于在原药合成过程中使用了有机溶剂甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯，在成品中可能会有一定量的残留。按中国药典2010年版(附录)规定，该5种有机溶剂均有残留限量。笔者参考了有关文献采用直接进样毛细管气相色谱法，测定了托拉塞米原料药中甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯的残留量。方法简便、灵敏，结果准确可靠。 1.仪器与试药1.1 仪器 Agilent 7890A1.2 试药 托拉塞米原料药3批2 方法与结果2.1 色谱条件DB-624（30m530mm3.0m）毛细管柱; 程序升温，起始40，保持10min，以每分钟10升至100，保持2min,再以每分钟40升至220，保持3min; FID检测器, 检测器温度250;进样口温度：200; 分流比：5：1 ; 以DMSO为溶剂，直接进样1l。2.2 供试品溶液与对照品溶液的制备对照品溶液：精密称取甲醇0.3g，乙醇0.5g二氯甲烷0.06g，乙酸乙酯0.5g和甲苯0.089g，置50ml容量瓶中,加DMSO稀释并定容到刻度，摇匀;精密量取5ml，置100ml容量瓶中，加DMSO稀释并定容到刻度，摇匀。供试品溶液：取供试品0.1g，精密称定，加1mlDMSO溶解，摇匀。 2.3 系统适用性溶液 取DMSO空白溶剂1l进行测定，结果表明溶剂无干扰。取对照品 溶液1l进行测定，记录色谱图，甲醇tR5.9min，乙醇tR8.0min，二氯甲烷tR10.8min，乙酸乙酯tR14.4min，甲苯tR19.3min。结果表明，各被测溶剂之间分离良好。2.4 线性范围及标准曲线取甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯适量，精密称定，用DMSO稀释制成一系列溶液，照上述色谱条件分别进行测定，以被测物峰面积为纵坐标，以被测物的质量浓度为横坐标进行线性回归。上述5种被测物的线性范围（g/ml)依次是：30.0360， 50.0600，6.072.0，50.0600，8.9106.8。回归方程及相关系数依次是: Y1 = 1206.31 - 3.8843，r1=0.9998;Y2 =1502.92 - 13.1780，r2=0.9999;Y3= 1577.43 - 0.9426，r3=0.9999;Y4= 5350.24 - 12.9950，r4=0.9997;Y5 =7191.75 - 2.2386， r5=0.9999。2.5精密度实验在上述色谱条件下,取对照品溶液，连续进样6次，计算对照品溶液中被测溶剂的RSD依次为甲醇3.56% ，乙醇3.72%，二氯甲烷2.96%，乙酸乙酯2.82%，甲苯3.76%。2.6最低检测限取对照品溶液用DMSO逐步稀释,依据S/N3，确定甲醇，乙醇，二氯甲烷，乙酸乙酯，甲苯的最低检测限依次是1.2，9.6，3.8，1.2，0.5。2.7 回收率实验取甲醇0.30g，乙醇0.5g，二氯甲烷0.06g，乙酸乙酯0.5g，甲苯 0.89，精密称定，置已加少许DMSO的10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，摇匀。移取储备液 1.0ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，摇匀，即得每1ml中含甲醇3000g，乙醇5000g，二氯甲烷600g，乙酸乙酯5000g，甲苯890g的混合溶液。 溶液1: 精密移取混合溶液0.8ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，摇匀，即得对照品溶液的80%溶液。溶液2: 精密移取混合溶液1.0ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，摇匀，即得对照品溶液的100%溶液。溶液3: 精密移取混合溶液1.2ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，摇匀，即得对照品溶液的120%溶液。取相同批次的托拉塞米0.1g，精密称定,平行9份，分别移取溶液1、溶液2和溶液3各1.0ml溶解，每3份加一种溶液，分别摇匀，即得9份供试品溶液。按外标法以峰面积计算回收率。回收率依次分别为: 103.7%，105.1%，104.4%，102.2%，101.4%，RSD在2.42%4.19%之间。2.8供试品的测定照2.2 项下的方法制备供试