散点图临床应用.ppt

专家审核系统 瑞印课堂 走进成都市第一人民医院 临床应用专员 王菁菁 CAL8000 BC6600 BC6900 序言 患者的困惑 序言 一份代价几十万的报告单 序言 小测试 这份报告正常吗 序言 一个报警信息改变了整份报告结果的性质 序言 高端血球产品容易被忽略的 序言 目前高端血球仪应用的困境 分类准确 精准报警 异常形态 精准提示 假性结果 识别修正 血液检测报告参数 研究参数 10 白细胞篇 01 光学算法 DIFF通道 Diff通道 检测流程 血样20ul M 68LD溶血剂1 0ml M 68FD染色液20ul DIFF反应池 1 51 散射 荧光 DIFF结果 12 细胞处理技术 DIFF通道 S Scatter散射光 前向 侧向散射光检测细胞大小 复杂程度 F Fluorescence荧光 侧向荧光检测细胞内核酸物质含量 Cube立方体 由散射和荧光信号组成的多维分析技术 FL SS FS DIFF通道 激光散射结合荧光染色多维分析技术 SFCube DIFF通道检测原理 SFCube SFCube激光散射结合荧光染色多维分析技术S Scatter散射 前向和侧向散射光检测细胞大小和复杂程度 F Fluorescence荧光 侧向荧光检测细胞内被染色的核酸物质含量 Cube立方体 由散射和荧光信号组成的多维分析技术 15 淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 嗜碱性粒细胞 红细胞 嗜酸性粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 红细胞 中性粒细胞 嗜碱性粒细胞 嗜酸性粒细胞 细胞皱缩 特殊的嗜碱性粒细胞溶血剂 表面活性剂 甘氨酸缓冲液 将血液中的红细胞溶解 溶血剂将嗜碱性粒细胞以外的白细胞形成裸核白细胞 细胞处理技术 BASO通道 LB溶血剂 通过光散射技术 收集前向 侧向散射信号 实现嗜碱性粒细胞的区分 细胞流式技术 WBC低值样本的多倍计数法 NRBC BASO DIFF RET SS FL 高值WBC PLT RBC标本稀释 单位时间内推慢了粒子进样速度 降低50 浓度 人工指定阈值或下达命令 目前限于血球流水线产品 细胞流式技术 WBC高值样本的流量控制法 Step3 异常细胞的报警 1 分叶中性粒细胞 2 淋巴细胞 3 单核细胞 4 嗜酸性粒细胞 5 杆状核细胞 6 幼稚粒细胞 7 异淋 原始细胞 8 感染红细胞 9 血影细胞 10 嗜碱性粒细胞 11 有核红细胞 12 血小板聚集 可疑类报警 SFCube 22 一般是指原始粒和原始单核 原始细胞的大小不规则 荧光强弱差异较大 在散点图中一般分界不清 幼稚粒细胞在中性粒细胞的上方 患者 女 23岁 妇科门诊 近两次月经量过多 幼稚细胞检测及报警 患者 女 23岁 于半月前发现双下肢散在瘀斑 伴牙龈出血 有头晕 乏力 近两次月经量偏多 后诊断为急性早幼粒细胞白血病 提示 仪器DIFF散点图的未成熟粒细胞敏感区域大量散点 BASO散点图出现异常 说明可能存在大量幼稚粒细胞 幼稚细胞检测及报警 一般指幼稚和原始淋巴细胞 形态大小不规则 荧光强度差异较大 一般在散点图中与其它细胞分界不清 异型淋巴细胞和浆细胞一般形态大小比较规则 荧光强度相差不大 在散点图中 与其他细胞分界比较清楚 异型淋巴细胞报警提示 异型淋巴细胞增多 BC 6800检测结果 结果说明 仪器结果显示WBC值正常 仪器给出了 异型淋巴细胞 异常淋巴细胞 原始细胞 等Message报警仪器给出 碎片 小细胞性红细胞 血小板直方图异常 等Message报警 表示PLT I可能有干扰 结出 符号 PLT最后报告为PLT O的结果 27 异型淋巴细胞报警提示 异型淋巴细胞增多 BC 6800检测图形 图形分析 仪器DIFF散点图上高荧光细胞区散点明显稠密 箭头所指 与异型淋巴细胞偏高的现象一致 28 异型淋巴细胞报警提示 异型淋巴细胞增多 BC 6800研究参数及三维图 图形分析 在研究参数界面可见高荧光细胞数量和百分比较高 提示可能异型淋巴细胞含量偏高 DIFF三维散点图上高荧光细胞区散点明显稠密 箭头所指 与异型淋巴细胞偏高的现象一致 29 患者 男 35岁 呼吸内科门诊患者 2017年3月21号抽取抗凝静脉血进行血常规测试 临床信息 人工镜检信息 镜下观察白细胞 红细胞 血小板形态均正常图中 1 2 3异型淋巴细胞4中性分叶核粒细胞5红细胞6血小板 异型淋巴细胞报警提示 异型淋巴细胞增多 1 3 2 4 5 6 30 BC 6800检测结果 异型淋巴细胞报警提示 浆细胞增多 结果说明 仪器结果显示WBC值正常 仪器给出了 异型淋巴细胞 异常淋巴细胞 原始细胞 等Message报警 31 异型淋巴细胞报警提示 浆细胞增多 BC 6800检测图形 图形分析 仪器DIFF散点图上高荧光细胞区散点明显稠密 箭头所指 与浆细胞偏高的现象一致 32 异型淋巴细胞报警提示 浆细胞增多 BC 6800研究参数 结果分析 研究参数界面可见高荧光细胞数量和百分比较高 提示可能异常细胞含量偏高 33 患者 女 43岁 血液内科门诊患者 2017年5月8日号抽取抗凝静脉血进行血常规测试 临床信息 人工镜检信息 镜下观察白细胞 红细胞 血小板形态均正常图中 1 2浆细胞3红细胞4血小板 异型淋巴细胞报警提示 浆细胞增多 1 2 4 3 34 时间 2011 07 25 2011 08 20地点 印度孟买DR BhideLab共收集 合格样本497例 其中含疟原虫的样本约248例 BC 6800对裂殖体的检测具有较高的特异性 99 6 及敏感性 88 2 对滋养体检测略差 BC 6800对间日虐检测结果优于对恶性疟检测结果 临床检验杂志2012年3月第1卷第1期钱程 一个离群点引发的思考 迈瑞血细胞分析仪疟原虫感染检测研究进展 DIFF通道 SF Cube异常细胞识别 疟疾 疟原虫感染检测与报警 患者 男 37岁 血液内科门诊患者 2011年8月4日抽取抗凝静脉血进行血常规测试 后确认为疟原虫感染 疟原虫感染检测与报警 提示 仪器DIFF散点图出现明显异常 Neu和Eos之间散点明显增多 含大量脂质颗粒的部分样本 在BASO图和DIFF三维散点图中会出现特殊的S曲线 DIFF通道细胞亚群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发规则 BASO通道细胞亚群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发 边界异常 对应的粒子团相关参数打 R 标记 边界严重重叠 对应的粒子团相关参数屏蔽结果 DIFF通道 粒子群分离度数字增强技术识别 脂质 嗜碱性粒细胞增多 嗜酸性粒细胞增多 未成熟粒细胞增多 异常淋巴 原始 感染红细胞 血小板聚集 有核红细胞 网织红细胞增多 异型淋巴 单核细胞增多 中性粒细胞增多 脂质干扰 红细胞篇 02 RBC PLT通道 双鞘流阻抗技术 前鞘 后鞘 PLT RBC 红细胞直方图 正常RBC直方图 RBC直方图异常 双峰红细胞 RBC聚集 减少 缺铁性贫血治疗过程RBC直方图变化 红细胞凝集 2018 1 16检验科老师遇到这样一例标本 患者女 3岁 咳嗽伴咳痰 流清涕 体温37 4 急性呼吸道感染 急查血常规 血常规检测结果如下 结果分析 结果可见RBC和HCT显著降低 MCH和MCHC异常增高 MCHC高达629g L RBC与HGB比例明显异常 RDW CV和RDW SD结果为 RBC报警 红细胞凝集 红细胞凝集 根据国际血液学复检专家组确定的复检规则 1 第13条 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC 380g L 红细胞凝集 冷凝集素又称冷型自身抗体 多为IgM抗体 大部分正常人群中都存在冷凝集素 但其效价多小于 16 高效价的冷凝集素能凝集自身或 型人的红细胞 是红细胞自身免疫性抗体 RBC意外凝集的发生与凝集程度同冷凝集素的水平及环境温度呈正比 多数冷凝集素在 活性最强 出现颗粒样凝集 因此又称抗 冷型血凝集素 冷凝集素效价轻度增高目前已发现许多疾病会引起冷凝集素升高 如支原体肺炎 2 急性感染性疾病 扁桃体炎 猩红热 寄生虫病 疟疾 丝虫病 肝硬化 妊娠 病毒感染 HIV 水痘 输血时均会引起冷凝集素升高 3 高效价冷凝集素主要见于原发性冷凝集素综合征 在临床检验中冷凝集素不仅会引起血细胞分析仪结果异常 4 也可引起血型正反定型鉴定结果不一致 5 其中血细胞分析仪的异常结果多出现RBC明显降低 红细胞中各计算项目如平均红细胞血红蛋白含量 平均血红蛋白浓度等结果异常 但是WBC PLT及HGB结果变化不大 常见针对冷凝集素引起的血细胞分析仪检测结果异常 大多采用37 水浴10min后重测可以获得修正结果 但高效价的冷凝集素标本 可采用血浆置换法或生理盐水置换血浆法 据此得出的结果与真实值吻合 可用于临床实际工作 6 1 BarnesPW McfaddenSL MachinSJ etal Theinternationalconsensusgroupforhematologyreview suggestedcriteriaforactionfollowingautomatedCBCandWBCdifferentialanalysis J LabHematol 2005 11 2 83 2 金晓东 孙龙 陈然峰 肺炎支原体肺炎导致红细胞严重冷凝集的临床诊治探讨 J 中国卫生检验杂志 2015 20 3591 3592 3 曾德鸿 冷凝集素临床研究进展 J 广西医学 1998 6 1077 1080 4 乐家新 马骏龙 徐菡 等 红细胞冷凝集对不同类型血细胞分析仪检测结果的影响探讨 J 医疗卫生装备 2009 30 2 69 71 5 张晨光 庞桂芝 赵庆伟 等 高效价冷凝集素致交叉配血困难分析 J 现代预防医学 2007 34 5 958 960 6 唐友云 桂满元 冷凝集素对血常规的影响及不同处理方法的分析 J 国际检验医学杂志 2014 17 2401 2403 红细胞凝集 水浴前检测结果 水浴后检测结果 MR冷凝集报警逻辑 高白细胞 说明 1 WBC值超高 未给分类结果 多项参数报警异常 2 RBC值为2 99 HGB值为94 仪器能对RBC和MCV进行修正 RET通道 激光散射结合荧光染色多维分析技术 SFCube DR 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 在血细胞检测过程中对红细胞进行球形化处理 FR 荧光染料 甘醇 对网织红细胞核酸物质进行快速染色 荧光强度 DR稀释液 FR稀释液 RBC O LFR MFR HFR WBC R MFR HFR IRF 未成熟网织红细胞比例 PLT O 依据RET散射光信息计算得到 RHE MRV 全自动网织红细胞检测 51 LFR MFR HFR IRF 网织红细胞增多 BC 6800检测结果 结果说明 仪器检测RBC HGB HCT结果偏低 RET 检测结果明显偏高 同时仪器给出了 网织红细胞增加 网织红散点图异常 碎片 等Message提示 53 网织红细胞增多 BC 6800检测图形 图形分析 仪器RET散点图上 RET敏感区散点明显稠密 同时RBC直方图及PLT直方图均出现异常 怀疑为红细胞碎片干扰 54 NRBC通道 激光散射结合荧光染色多维分析技术 SFCube LN 柠檬酸缓冲液 在血细胞检测过程中溶解红细胞 FN 荧光染料 甘醇 对有核红细胞核酸物质进行染色 白细胞 红细胞 有核红细胞 红细胞 有核红细胞 白细胞 白细胞 有核红细胞 红细胞 荧光强度 LN溶血剂 FN染色液 有核红细胞的检测可用于自动纠正白细胞的计数和分类结果 NRBC WBC N 血小板篇 03 血小板检测 病理性 血小板是由骨髓造血组织中巨核细胞产生 具有维持血管内皮完整性以及粘附 聚集 释放 促凝和血块收缩等功能 血小板计数 血小板计数为 20 50 109 L 可有轻度出血或手术后出血 低于20 109 L 可有较严重的出血 低于5 109 L时 可导致严重出血 血小板超过400 109 L为血小板增多 病理血小板减少和增多的原因及临床意义见下表 血小板检测 假性 血小板直方图 PLT I 仪器报警 血小板聚集 血小板直方图异常 血小板散点图异常 血小板增多 血小板减少 等 PLT聚集 大血小板 RBC碎片 PLT聚集 光学血小板 PLT O BC 6800研究界面 BC 6800结果界面 PLT O检测能力提升的原因 在网织通道内 血液分析仪的预热池根据环境温度对试剂进行不同程度的加热 使占反应体积较大的荧光试剂快速达到反应温度 发生血小板聚集的血样被吸入分血阀后 和预热的荧光试剂一起 高速注入42 恒温钛合金反应池 形成旋流 使荧光试剂与样本充分作用 反应池内的搅拌杆以1400转 分的速度对反应液进行高速搅拌 在剧烈震荡中 对血小板聚集的物理结构进行机械破坏 试剂中的 解聚成分 也作用于聚集血小板 对血小板聚集的分子结构进行化学破坏 并与单个的血小板结合 使其不能再与其它血小板聚集在一起 最后 解聚后被 着色 的单