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文档简介
方法名称水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定(纸片快速法)申请人项目负责人员制定原因验证检测方法符合实验室要求、确保数据准确性与有效性方法适用范围适用于地表水、地下水及废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。方法来源HJ 755-2015水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法仪器、试剂和环境的要求1.仪器和设备1.1高压蒸汽灭菌器1.2培养箱1.3冰箱1.4 采样瓶1.5 试管1.6 水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片2.试剂:2.1硫代硫酸钠 2.2乙二胺四乙酸二钠采样和测试过程中,所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。方法描述按MPN法,将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂(溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮唑即TTC)以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上,在特定的温度(37或44.5)培养24h,当细菌生长繁殖时,产酸使pH值降低,溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色,同时,产气过程相当的脱氢酶在适宜的pH范围内,催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲(TTF)。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点(或红晕)。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断,从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在,再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。检测结果的判断1.结果判读:(1) 制片上出现红斑或红晕且周围变黄,为阳性。(2) 纸片全片变黄,无红斑或红晕,为阳性。(3) 纸片部分变黄,无红斑或红晕,为阴性。(4) 纸片的紫色背景上出现红斑或红晕,而周围不变黄,为阴性。(5) 纸片无变化,为阴性。2.结果计算:根据不同接种量的阳性纸片数量,查MPN表得到MPN值,按公式换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数:C=100*M/Q式中:C水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度(MPN/L)M查MPN表得到的MPN值(MPN/100ml)Q实际水样最大接种量(ml)100为10*10ml,其中,10将MPN值的单位MPN/100ml转换为MPN/L,10ml为MPN表中最大接种量。3.结果表示:测定结果保留二位有效数字,大于等于100时以科学计数法表示,结果的单位为MPN/L。平均值以几何平均计算。附件说明表1运行说明经验证该方法符合我实验室使用。审批意见技术经理:日 期:总经理:日 期:表1【下载本文档,可
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