急性髓系白血病中骨髓微环境介导耐药的探索课件

急性髓系白血病中骨髓微环境介导耐药的探索 1 医药交流课件 2020 3 11Wednesday 相关背景 急性髓细胞白血病 Acutemyeloidleukemia AML 是髓系造血干 祖细胞恶性疾病 以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征 临床表现为贫血 出血 感染和发热 脏器浸润 代谢异常等 多数病例病情急重 预后凶险 如不及时治疗常可危及生命 化疗联合造血干细胞移植是AML的主要治疗手段 尽管患者预后已有极大改善 仍有部分患者复发或难药 降低了AML患者的OS及PFS 文献报道急性髓系白血病对化疗不敏感 部分原因是骨髓中的基质细胞对白血病细胞的保护作用 2 2020 3 21 相关报道 2013年cancerletter一篇文章报道了Wnt信号通路在MSC介导的ALL细胞耐药中的作用机制 阐明此通路可作为靶向治疗靶点 3 2020 3 21 该文首先报道MSC对ALL细胞增殖和凋亡中的影响 A 与MSC共培养的ALL细胞系其凋亡率下降 B 与MSC共培养的ALL原代细胞其凋亡率下降 4 2020 3 21 Westernblot结果发现与MSC共培养后细胞周期相关蛋白的表达改变 5 2020 3 21 与MSC共培养后ALL细胞的wnt通路相关基因及蛋白表达改变 6 2020 3 21 加入wnt抑制剂后 可促进ALL细胞的凋亡 7 2020 3 21 小动物活体成像实验发现加入wnt通路抑制剂及阿糖胞苷后 小鼠体内瘤体明显缩小 生存期延长 说明wnt通路抑制剂可拮抗MSC诱导的ALL细胞耐药 8 2020 3 21 白血病微环境中的多种细胞成分对白血病细胞有保护作用 其中包括基质细胞 间充质干细胞 为阐明机制 该文作者将急性淋巴细胞白血病细胞与骨髓基质细胞共培养 研究后者对白血病细胞基因和蛋白水平的影响 结果表明Wnt信号参与MSC介导白血病细胞耐药 阻断Wnt通路可增强白血病细胞对化疗的敏感率 改善白血病小鼠模型的存活率 YangYang SaradhiMallampati BaohuaSun etal Wntpathwaycontributestotheprotectionbybonemarrowstromalcellsofacutelymphoblasticleukemiacellsandisapotentialtherapeutictarget CancerLett 2013June1 333 1 doi 10 1016 j canlet 2012 11 056 总结 9 2020 3 21 2009年Blood一篇文章报道骨髓基质细胞可保护CLL细胞逃避药物诱导的凋亡 从而导致CLL细胞的耐药 10 2020 3 21 小鼠MSC与CLL细胞共培养后 可降低氟达拉滨诱导的CLL细胞凋亡 11 2020 3 21 同样 人MSC与CLL细胞共培养后 可降低氟达拉滨诱导的CLL细胞凋亡 12 2020 3 21 MSC与CLL细胞共培养后 可降低地塞米松诱导的CLL细胞凋亡 13 2020 3 21 当环磷酰胺与氟达拉滨联用时MSC对CLL细胞的保护作用消失 14 2020 3 21 Westernblot结果显示CLL细胞与MSC共培养后 促细胞凋亡相关蛋白如Mcl 1和PARP的剪切体表达下降 15 2020 3 21 总结 骨髓基质细胞慢性淋巴细胞白血病 CLL 细胞耐药中起重要作用 该文作者将人和小鼠骨髓基质细胞系和人CLL细胞共培养 检测药物诱导的细胞凋亡的改变 研究结果表明骨髓基质细胞可保护CLL细胞免受氟达拉滨诱导细胞凋亡 骨髓基质细胞也保护CLL细胞免受地塞米松和环磷酰胺诱导的细胞凋亡 骨髓基质细胞可保持Mcl 1 并保护CLL细胞免受氟达拉滨诱导的Mcl 1和PARP裂解AntoninaV Kurtova 1KumudhaBalakrishnan 2RongChen etal DiversemarrowstromalcellsprotectCLLcellsfromspontaneousanddrug inducedapoptosis developmentofareliableandreproduciblesystemtoassessstromalcelladhesion mediateddrugresistance Blood 2009 114 4441 4450 16 2020 3 21 2013年JCI一篇文章报道c Myc miR 548m HDAC6通路在非霍奇金B细胞淋巴瘤的细胞耐药中起重要作用 17 2020 3 21 将B细胞淋巴瘤细胞系与MSC细胞系HK共培养后 通过基因芯片发现miR 548m miR 548f和miR 548h的表达下调 A TaqmanrealtimePCR结果发现B细胞淋巴瘤细胞系Jeko 1 HBL 2 SUDHL 4与MSC细胞系HK共培养后 miR 548m的表达下调 B Westernblot结果同样显示在这三种细胞系与HK共培养后 HDAC6的蛋白表达上调 C 淋巴瘤细胞系HBL 2 SUDHL 4与另一种MSC细胞系HS 5共培养后 HDAC6的蛋白表达上调 左 miR 548m的表达下调 右 18 2020 3 21 套细胞淋巴瘤 MCL 滤泡淋巴瘤 FCL 弥漫大B细胞淋巴瘤 DLBCL 患者的原代淋巴瘤细胞与MSC细胞系HK共培养后 miR 548m的表达均下降 套细胞淋巴瘤 MCL 滤泡淋巴瘤 FCL 弥漫大B细胞淋巴瘤 DLBCL 患者的原代淋巴瘤细胞与MSC细胞系HK共培养后 HDAC6蛋白的表达均上调 19 2020 3 21 通过逆转录病毒载体感染Jeko 1使之高表达miR 548m 左上 通过realtimePCR 左下 和western 右 检测HDAC6的表达 结果发现HDAC6的表达下降 反之 干扰Jeko 1细胞miR 548m的表达 左上 后 HDAC6的表达增加 20 2020 3 21 荧光素酶报告载体实验证实miR 548m负向调控HDAC6 21 2020 3 21 HBL 2与HK共培养后 生成的集落数明显多于单独培养组 H