浓缩血小板的研究进展.ppt

解放军总医院第一附属医院烧伤整形三科暨创面修复中心 浓缩血小板的研究进展 赵帆郝岱峰 内容 血小板简介及其功能浓缩血小板及其应用人群的选择浓缩血小板的制备方法及分类浓缩血小板的激活及使用方法浓缩血小板在创面修复中的作用目前研究中存在的问题 血小板简介及功能 血小板是血细胞中的一种 它是从骨髓巨核细胞的细胞质脱落的的具有生物活性的小块胞质 体积小 无细胞核 呈双面微凸的圆盘状 生理特性 粘附 聚集 释放 收缩基本功能 止血凝血 维持血管内皮的完整性 Plateletultrastructure 1 4 浓缩血小板 浓缩血小板 PlateletsConcentrate 根据其临床用途可分为两类 第一类 体内 是外科常用的成分输血制品 浓缩血小板一般用于血小板减少 失血症状明显而又需手术者 第二类 体外 常用于局部软组织和骨组织的修复 主要是应用血小板内还有丰富的细胞因子 它们在参与创面的修复过程中发挥重要的作用 目前文献中常见的有四种浓缩血小板类型 也可称为Platelet RichPreparation 应用人群的选择 明确有传染病的患者 如乙肝 梅毒 艾滋等 肿瘤患者 服用血小板抑制剂的或血小板功能存在障碍的患者 如口服阿司匹林 氯吡格雷等 血小板减少的患者 制备 临床上常用的浓缩血小板主要通过两种方法制备商业的血小板分离系统手工分离制备过程中的影响因素众多 主要包括以下几方面 患者之间的个体差异血液的采集 无菌原则 抗凝剂的选择 ACD A CPD 抗凝剂和血液的比例 1 10 离心次数 单次离心和二次离心转速 离心力 HardandSoftcentrifugation离心时间离心温度 商业分离系统 手工分离 FlowchartdescribingpreparationofPRP 2 浓缩血小板分类 L PRPPRPP PRP浓缩血小板类型PRGFL PRFPRFR PRF 10 PRP Classicalmanualplatelet richplasma PRP protocolusingatwo stepcentrifugationprocedure 3 11 PRGF CommonlydescribedprotocolforAnitua sPRGF 3 PPGF plasmapooringrowthfactorsPRGF plasmarichingrowthfactors 12 PRF Choukroun splatelet richfibrin PRF method 3 13 StructuralDifferences Schematicillustrationofthematrixandcellarchitectureofthefourcategoriesofplateletconcentrates 3 ActivatedversusNonactivated 浓缩血小板的激活 15 Activated 浓缩血小板的激活方式应该考虑以下三个方面 血小板激活剂的种类牛凝血酶 人凝血酶 钙剂 凝血酶受体激活肽 TRAP 胶原 类凝血酶 巴曲酶 反复冻融 壳聚糖 纳秒脉冲电场 nsPEF 激活剂的浓度的选择激活剂和浓缩血小板的比例影响细胞因子的释放时间影响细胞因子的释放量 16 纳秒脉冲电场 NanosecondPulseElectricField nsPEF Activator RepresentativevoltageandcurrenttracingforpulseelectricfieldconditionusedtoactivatePRP Electricalsignalsweremeasuredona2mmcuvettecontainingPRPandstimulatedwithpulseelectricfieldforPRPactivation Eachsamplewasexposedtofivepulses ofapproximately500nanosecondspulsewidth 4kVpeakvoltageandmorethan300Apeakcurrentperpulse 4 17 Non activated Diabeticmousefull thicknesswoundhealing 5 18 Non activated Effectsofplatelettreatmentonfibroblastcultures 5 Non activated Invitrothree dimensionaltissuedefectassay 5 20 ActivatedversusNonactivated Schematicdepictionoftheeffectofphysiologicandunspecificactivationofplateletsonwoundhealing 4 21 在创面修复中的作用 Cytokines ChemokineIL 6IL 8PF 4MIP 1 RANTESFractalkineNAP2GRO ENA 78sCD40LSDF 1 GrowthFactorPlateletDerivedGrowthFactor PDGF AB BBTransformingGrowthFactor beta TGF 1 2VascularEndothelialGrowthFactor VEGFEpidermalGrowthFactor EGFBasicFibroblastGrowthFactor bFGFInsulinlikeGrowthFactor IGF1and2 ConnectiveTissueGrowthFactor CTGF KeratinocyteGrowthFactor KGF HepatocyteGrowthFactor HGF PlateletDerivedEndothelialGrowthFactor PDEGF PlateletDerivedAngiogenicFactor PDAF 生长因子在创面修复中的作用 SchematicillustrationoftheroleofGFsduringthedifferentstagesofthewoundhealingprocess 6 23 细胞因子在创面修复中的作用 ThisistrueforbacterialikeMSSA GroupAStreptococcus andNeisseriagonorrhoeaeaswell 7 目前存在的问题 缺乏统一的浓缩血小板的制备标准临床应用时能否激活仍存在争议 若激活 激活剂种类 浓度及其与浓缩血小板的比例如何确定无法确定有临床疗效的浓缩血小板中最适的血小板的浓度 参考文献 1 YeamanMR Theroleofplateletsinantimicrobialhostdefense ClinInfectDis199725 5 951 968 quiz969 970 2 DhuratRSukeshM PrinciplesandMethodsofPreparationofPlatelet RichPlasma AReviewandAuthor sPerspective JCutanAesthetSurg20147 4 189 197 3 DohanEhrenfestDM RasmussonLAlbrektssonT Classificationofplateletconcentrates frompureplatelet richplasma P PRP toleucocyte andplatelet richfibrin L PRF TrendsBiotechnol200927 3 158 167 4 SchererSS TobalemM VigatoEetal Nonactivatedversusthrombin activatedplateletsonwoundhealingandfibroblast to myofibroblastdifferentiationinvivoandinvitro PlastReconstrSurg2012129 1 46e 54e 5 FrelingerIiiAL TorresAS CaiafaAetal Platelet richplasmastimulatedbypulseelectricfields Plateletactivation procoagulantmarkers growthfactorreleaseandcellproliferation Platelets20151 8 6 EvertsPA KnapeJT WeibrichGetal Platelet richp