黑木耳多糖提取开题报告.doc

理工类 毕业设计*学院 本科生毕业论文（设计） 题 目 微波辅助提取黑木耳多糖工艺研究 院 系 * 专 业 食品科学与工程 学 号 * 姓 名 * 届 次 * 指导教师 * 2015年5月20日1、本手册是对学生毕业论文（设计）工作进行质量监控的重要依据，有关人员必须按照要求认真填写，妥善保存。2、表三由指导教师根据指导情况认真填写。3、学生在毕业论文（设计）答辩前将手册送交指导教师，指导教师签署意见后由评阅教师评阅其论文，对其答辩申请签署意见，与毕业论文一并提交系论文答辩委员会审阅。4、凡外聘指导教师，各系应指派教师协助做好毕业论文手册的填写工作。5、手册中各项内容可以另加附页。6、学生毕业后，本手册应与毕业论文（设计）一同归档保存。开题报告题目微波辅助提取黑木耳多糖最佳工艺研究选题依据和意义一、选题依据 黑木耳又名黑菜，在真菌学分类中属担子菌纲，木耳目，木耳科、木耳属1，色泽黑褐，质地柔软，嫩脆可口，营养极其丰富，有“素中之荤”的美誉。黑木耳性平，味甘，富含多糖，具有一定的生物活性，亦可入药2。 多糖又称聚糖，是由多个单糖分子缩合、失水而成的一类结构复杂且庞大的糖类物质，分为同多糖和杂多糖两类，广泛存在于高等植物、动物细胞膜和微生物的细胞壁中，是维持生命所必须的结构材料和重要的组成部分。已有研究表明，黑木耳的生物活性就来自其多糖成分3。黑木耳多糖是一种天然药物活性成分，为细胞内容物，提取时需要进行细胞破碎，从而使细胞壁将多糖成分释放出来4-5。其组分主要有D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸，酸性杂多糖的分子量范围在30104 50104之间。黑木耳多糖具有抗凝血、抗肿瘤、抗炎症等细胞保护作用，还具有降低血脂、血糖、血液黏度、胆固醇以及抗糖尿病、抗衰老、抗辐射、抗疲劳等多种生理功能，同时还能促进核酸、蛋白质的生物合成并防治多种老年性疾病6-13,有重要的研究价值。 目前提取黑木耳多糖的方法大致有：热水浸提法、碱浸提法、超临界流体萃取法以及微波法。热水浸提法需要多次浸提，操作时间长，收率低；碱浸提法容易使部分多糖发生水解，破坏多糖的活性结构、减少多糖得率14；超临界流体萃取法设备复杂、成本高；而微波提取具有设备简单、适用范围广、提取率高、节省时间、节能、不产生噪音和污染等众多优点15。因此结合实验室条件和参考文献，本实验采用微波法来提取黑木耳多糖为最佳选择。二、意义 近年来,随着糖科学和糖技术的发展,黑木耳多糖已经日益被人们所重视。若能够确定黑木耳多糖的最佳提取工艺，便能提高黑木耳多糖的提取效率，降低黑木耳多糖的开发成本及损耗，由此获得杂质更少纯度更高的黑木耳多糖，为人类的健康和安全提供更为有利的帮助。研究的 基本内容及解 决的主要问题一、研究的基本内容 (1)黑木耳样品的处理 (2)黑木耳多糖含量的标准曲线的绘制 (3)单因素实验 料液比对黑木耳多糖提取率的影响 浸提温度对黑木耳多糖提取率的影响 微波时间对黑木耳多糖提取率的影响 粒度大小对黑木耳多糖提取率的影响 (4)正交法优化黑木耳提取工艺 (5)稳定性试验 二、解决的主要问题 1.提取工艺流程的确定； 2.提取定性变量（粒度大小、浸提温度、微波时间、料液比）的确定； 3.得到结果对其进行分析后可为测定黑木耳多糖含量提供依据，并对进一步的开发利用有一定参考价值。研究进度及步骤一、研究进度 1.2015年5月10日 6月1日 查阅文献资料、撰写开题报告，进行前期实验准备。 2.2015年6月2日 7月2日 进行预实验，确定黑木耳中多糖大致含量。 3.2015年7月3日 12 月30日 探索多糖在该范围内的最佳提取工艺，完善实验 4.2016年1月1日 4月 10日 分析处理数据，撰写毕业论文。二、步骤 黑木耳(清洗干净、烘干、粉碎、过筛) 取一定质量黑木耳粉末 按一定料液比溶解 微波处理一定时间 离心取上清液 减压浓缩 醇沉取沉淀 干燥 溶解定容测吸光度16-18研究方法及措施 采用单因素实验提取黑木耳多糖，再用分光光度比色法来检测含量，最后得出各种条件下的最佳提取条件，具体措施如下： (一)黑木耳样品处理 将黑木耳烘干 粉筛 装于样品袋中密封备用 (二)黑木耳多糖含量的标准曲线的绘制 方法：苯酚-硫酸法19 流程：准确称取标准葡萄糖20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6以及1.8mL，各以水补至2.0mL，然后加入6%苯酚1.0ml以及浓硫酸5.0ml，静止10min，摇匀，室温放置20min以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖质量数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。 (三)单因素实验 1.粒度大小对黑木耳多糖提取率的影响 取粒度为20目，40目，60目，80目，100目的黑木耳粉各2.00g，在料液比为1:25，微波处理时间为30s，浸提温度为60条件下提取，离心取上清液，旋转蒸发浓缩液体为5ml，加无水乙醇15ml醇沉，取沉淀测定多糖含量。 2.浸提温度对黑木耳多糖提取率的影响 取2.00g相同粒度的黑木耳粉5份，在料液比为1:25，微波处理时间30s，浸提温度为20，40，60，80，100条件下提取，离心取上清液，旋转蒸发浓缩液体为5ml，加无水乙醇15ml醇沉，取沉淀测定多糖含量。 3.微波时间对黑木耳多糖提取率的影响 取2.00g相同粒度的黑木耳粉6份，在浸提温度为60，料液比为1:25，微波处理时间为10s，20s ，30s ，40s ，50s，60s条件下提取，离心取上清液，旋转蒸发浓缩液体为5ml，加无水乙醇15ml醇沉，取沉淀测定多糖含量。 4.料液比对黑木耳多糖提取率的影响 取2.00g相同粒度的黑木耳粉5份，以1:15，1:20，1:25，1:30，1:35的比例加入蒸馏水，在浸提温度为60，浸提时间为30s条件下提取，离心取上清液，旋转蒸发浓缩液体为5ml，加无水乙醇15ml醇沉，取沉淀测定多糖含量。 (四)正交试验设计 在单因素实验的基础上，设计正交试验。正交试验的因素为：粒度大小、浸提温度、微波时间、料液比。采用L9(34)正交试验设计表，确定最佳的提取工艺条件。 (五)多糖得率计算 多糖得率 = (多糖质量/样品质量)10020 (六)结果与分析主要参考文献 1陆雯,蔡振优,鲜乔,张拥军.黑木耳多糖提取工艺条件的研究J.中国食品添加剂,2010,06(2):99-102. 2徐锦堂.中国药用真菌学M.北京:北京医科大学出版社,1997:402. 3张大为,赵亮,刘同军,吴天祥,杨海龙.黑木耳多糖及生物活性J.食品与药品2007,9(9):68-70. 4熊艳,车振明.黑木耳多糖的研究进展J.中国食品与营养,2006,10(25):25-27 5王金凤.木耳多糖提取工艺研究J.食品科学,2003,11(25):143-146. 6于颖,徐桂花.黑木耳多糖生物活性研究进展J.中国食物与营养J.2009(2):55-57. 7韩春然,徐丽萍.黑木耳多糖的提取、纯化及降血脂作用的研究J.中国食品学报,2007,7(1):54-58. 8宗灿华,于国萍.黑木耳多糖对糖尿病小鼠降血糖作用的研究J.食用菌,2007(4):60-61. 9周国华.黑木耳多糖抗衰老及降血脂生物功效的研究D.哈尔滨:东北农业大学,2005. 10张秀娟,于慧茹,耿丹,等.黑木耳多糖对荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响J.中成药,2005,27(6):691-693. 11张润光,刁小琴,关海宁.黑木耳营养保健功能及其产品开发J.保鲜与加工,2010,10(1):54-56. 12刘雅静,袁延强,刘秀河,等.黑木耳营养保健研究进进展J.中国食物与营养,2010,10(7):66-68. 13李志强,郑慧哲,刘鹤瑞,等.黑木耳多糖对兔动脉粥样硬化斑块中FAK表达的影响J.牡丹江医学院学报,2011,32(1):1-3. 14刘大纹,李铁柱,孙永海.黑木耳多糖提取工艺的优化J.农业机械学报,2007,38(5):100-102. 15汪园.微波萃取技术在食品工业中的应用J.中国食品添加剂,2008,18(6):136-139. 16樊黎生,张声华,吴小刚.微波辅助提取黑木耳多糖的研究J.食品与发酵工业,2005,31(10):142-144. 17赵希艳,贾凌杉,马华.微波辅助提取黑木耳多糖的工艺J.河北科技师范学院学,2012,26(1),66-67. 18李超,王磊