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文档简介
实验三 肠杆菌科细菌检验,目的要求,掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术,实验材料,一、菌种:大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌(BAP、MAC、SS)二、生化管: KIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管(1套/2人)三、诊断血清:沙门菌多价四、其他: 玻片、盐水、接种环(针)、革兰染液、3%H2O2、氧化酶试剂、液体石蜡,实验内容,一、菌落观察:大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌(BAP、MAC、SS) 菌落形态、颜色、溶血现象、迁徙生长现象观察与描述二、形态观察: 所有细菌革兰染色 显微镜下细菌形态、染色性观察与描述,三、生化实验: 1. 触酶试验:,2. 氧化酶试验: 3. KIA试验(1支): 4.半固体试验(1支): 5. 肠杆菌科微量生化编码管(1支) 6.沙门菌血清学玻片凝集试验,实验内容(2人/组),检验程序,1. 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别,肠道杆菌的生化反应鉴定,2. 初步分三组,3. 肠道杆菌属间鉴定,麦康凯琼脂(MACC)蛋白胨 20g 氯化钠 5g琼脂 20-25g蒸馏水 1000ml 乳糖 10g 1%中性红水溶液 5ml 胆盐 5g,SS琼脂 (四种配方 ),MACC,SS,蛋白胨 10g 葡 萄 糖 1g 氯化钠 5 g 乳 糖 10g 牛肉膏 3 g 硫代硫酸钠 0.2g 琼 脂 16g 硫酸亚铁 0.2g 水 1000ml 0.4%酚红 6ml,双糖铁培养基(KIA),细菌在KIA中的生长现象,观察高层与斜面颜色变化情况以及培养基是否变黑,上层固体斜面:乳糖+指示剂,下层固体:葡萄糖+指示剂+FeSO4,观察指标:葡萄糖、乳糖发酵、H2S,细菌在半固体培养基中的生长现象,观察穿刺线边缘是否清晰及培养基混浊度 有鞭毛细菌:在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长,穿刺线边缘模糊。培养基混浊。 无鞭毛
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