HIV的检测和治疗.ppt

HIV的检测和治疗 HIV的检测 1 病毒分离培养2 HIV1 2抗体 抗原检测3 病毒核酸测定4 CD4 T淋巴细胞检测5 血清学检测 2 HIV1 2抗体 抗原检测 包括筛查试验 含初筛和复检 和确证试验 HIV1 2抗体筛查方法包括ELISA法 化学发光法或免疫荧光试验 快速检测 斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒快速试验 明胶颗粒凝集试验 免疫层析试验 等 确证试验常用的方法是免疫印迹法 WB 抗原检测 主要检测HIV1的P24抗原核心蛋白 这种抗原通常出现在急性感染期 处于窗口期的新近感染者筛查试验也可呈阴性反应 3 病毒核酸测定 有原位杂交 RT PCR 病毒载量等检测 病毒载量检测常用方法有反转录PCR RT PCR 核酸序列依赖性扩增 NASBANuclisens 分枝DNA信号放大系统 bDNA 和实时荧光定量PCR扩增 realtimePCR 先利用反转录酶将病毒RNA反转录成cDNA 再进行荧光实时定量PCR检测 HIV病毒载量检测结果高于检测下限 可作为诊断HIV感染的辅助指标 但不能单独用于HIV感染的诊断 4 CD4 T淋巴细胞检测 目前常用的CD4 T淋巴细胞亚群检测方法为流式细胞术 可以直接获得CD4 T淋巴细胞数绝对值 或通过WBC分类计数后换算为CD4 T淋巴细胞绝对数 HIV感染人体后 出现CD4 T淋巴细胞进行性减少 CD4 CD8 T细胞比值倒置 细胞免疫功能受损 如果进行HAART CD4 T淋巴细胞在病程的不同阶段可有不同程度的增加 意义 了解机体的免疫状态和病程进展 确定疾病分期和治疗时机 判断治疗效果和HIV感染者的临床合并症 特殊人群 HIV感染母亲的婴儿 HIV阳性母亲的孩子即使没有感染HIV 出生时也会查出HIV抗体 小于18月龄的婴幼儿HIV感染诊断可以采用核酸检测方法 以2次核酸检测阳性结果作为诊断的参考依据 18月龄以后再经抗体检测确认 HIV治疗药物 1 核苷类似物 NRTIs 2 非核苷类反转录酶抑制剂 NNRTIs 3 蛋白酶抑制剂 PIs 4 融合抑制剂 进入抑制剂 Fusion EntryInhibitors 5 整合酶抑制剂 NRTIs 1 作用靶点 HIV反转录酶 2 作用机制 在体内与核苷酸竞争结合到DNA分子上 磷酸二酯键不能形成 使DNA分子合成中断 需要细胞内活化 3 代表药物 鸟嘌呤核苷类似物 阿巴卡韦 ABC 胸腺嘧啶类似物 齐多夫定 AZT 司他夫定 d4T 去羟肌苷 ddI 胞嘧啶类似物 拉米夫定 3TC 恩曲他滨 FTC 核苷酸类反转录酶抑制剂 扎西他滨 ddC 替诺福韦 TDF NRTIs 4 HAART中药物骨干组合 TDF 3TC FTC ABC 3TC AZT 3TC等 d4T ddI因为线粒体毒性大而弃用 5 药物毒性 胃肠反应 骨髓毒性 乳酸性酸中毒 多神经病变 胰腺炎 线粒体毒性等 6 核苷类似物有很大程度的交叉耐药 NNRTIs 作用靶点 反转录酶 机制 与反转录酶的近底物结合点非竞争性结合 形成的复合物阻断反转录酶的催化活性位点与核苷的结合 使聚合降低 不需要细胞内活化代表药物 奈韦拉平 NVP 依非韦伦 EFV 地拉韦定 DLV PIs 作用机制 HIV蛋白酶将HIVgag pol蛋白切割成能发挥功能的小蛋白 如果蛋白酶被抑制 蛋白水解功能失去作用将不能再产生具有传染性的病毒颗粒 代表药物 安普那韦 APV 地瑞那韦 DRV 福沙那韦 fAPV 茚地那韦 IDV 奈非那韦 NFV 利托那韦 RTV 沙奎那韦 SQV 替拉那韦 TPV 融合抑制剂 HIV进入CD4 T淋巴细胞有三个关键步骤 结合到表面受体 结合到辅助受体 融合进入细胞 衍生于gp41的多肽的作用机制 这些N 多肽和C 多肽分别与GP41的CHR和NHR结合 使二者不能结合形成六股 螺旋束核心结构 干扰HIV与靶细胞融合 抑制HIV的感染率 融合抑制剂 直接衍生于gp41的多肽类HIV融合抑制剂 包括衍生于CHR NHR的多肽衍生于CHR的多肽 T 20 SJ 2176T 20 恩夫韦地 Enfurvitide 融合抑制剂的原型 是一个分子量系相对较大的多肽 含有36个氨基酸 可以在HIV与靶细胞融合时与gp41的中间结构相结合 衍生于NHR的多肽 DP 107 融合抑制剂 CCR5拮抗剂 它们与CCR5结合后 使CCR5构象发生变化不利于gp120的识别或者导致CCR5的内源化作用 internalization 阻断了HIV 1与细胞包膜蛋白结合 导致HIV 1与CCR5在细胞表面结合的数量减少 从而起到抗感染作用 缺点 可能加快R5嗜性病毒株向X4嗜性病毒株的转变 有明显耐药性 药物 Maraviroc 整合酶抑制剂 HIV 1整合酶是逆转录病毒复制的必需酶 它催化病毒DNA与宿主染色体DNA的整合 HIV整合酶抑制剂通过抑制HIY整合酶 有效抑制HIV在体内复制 不会伤害正常细胞 药物 拉替拉韦 raltegravir 埃替拉韦 elvitegravir dolutegravir stribild HAART 鸡尾酒疗法 原指 高效抗逆转录病毒治疗 HAART 由美籍华裔科学家何大一于1996年提出 是通过三种或三种以上的抗病毒药物联合使用