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文档简介
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),PRRSV属于尼多病毒目、动脉炎病毒科,该科还包括马动脉炎病毒(EAV)、鼠乳酸脱氢酶增高症病毒(LDV)、猴出血热病毒(SHFV),一、猪繁殖与呼吸综合征病毒的分类地位,猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),又称蓝耳病1987年首次暴发于美国北卡罗纳州“神秘病”,导致至少100万头猪死亡1991年,PRRS席卷欧洲大陆1996年,PRRS在我国首次爆发;同年,丹麦再次暴发PRRS,全国40-50%的母猪出现流产、死胎和断奶前仔猪的大量死亡2000年,美国再次大爆发PRRS,并将其列为当前最严重的猪病毒性传染病目前,PRRS遍及世界养猪国,并呈流行态势,二、PRRSV的发现与流行,三、猪繁殖与呼吸综合征的危害,母猪早产、流产、死胎、弱仔公猪精液品质下降初生仔猪高死亡率其它年龄猪呼吸系统疾病,根据美国农业部2005年统计的资料表明,2004年,蓝耳病导致的直接经济损失为5.6032亿美元。(Neumann et al. J Am Vet Med Assoc. 2005 Aug 1;227(3):385-92)。,猪繁殖与呼吸综合征的危害,2006年,高致病性PRRS在我国10多个省市大规模爆发,至少200万头猪发病,不仅对我国养猪业造成巨大的经济损失,而且导致了严重的环境问题。,自2009年6月份以来,安徽、湖北等地出现PRRS疫情,分析了6-11月份从安徽、湖北、湖南等省份采集的394头发病猪的感染情况,发现高致病性PRRSV变异株阳性率为75.6%。,四、PRRSV病毒粒子与基因组,PRRSV为有囊膜的单股正链RNA病毒病毒粒子呈球形,直径为48-83nm,平均大小为50-65nm核衣壳直径25-30nm,核衣壳呈二十面体对称外绕一脂质双层膜,囊膜表面有明显的纤突,PRRSV病毒粒子,蓝耳病病毒基因组组成与复制,主要结构蛋白GP5,GP5蛋白:由ORF5编码,是PRRSV最主要的保护性抗原。抗GP5的单抗能中和病毒,而且目前唯一确定的中和表位位于GP5的胞外区,是研究PRRS新型疫苗的良好目标基因。,主要结构蛋白M,M蛋白:由ORF6编码,是PRRSV中最保守的蛋白,是一种非糖基化蛋白。与GP5通过二硫键连接形成异源二聚体,主要结构蛋白N,N蛋白:即核衣壳蛋白,由ORF7编码,免疫原性极强,但针对此蛋白的抗体均是非中和性的抗体。甚至有研究表明杆状病毒表达的N蛋白不仅不能提供保护,反而对保护有干扰作用。可能的原因?,非结构蛋白,解析非结构蛋白的结构与功能是目前研究的重点,EAV非结构蛋白研究,五、PRRSV的生物学特性,一种血清型,两种基因型(欧洲型、美洲型),两种基因型间的全基因组序列同源性仅为50-60%,但临床表现、病理变化非常相似(是如何进化的?)具有比较严格的宿主细胞特异性,在体内,肺泡巨噬细胞是其主要靶细胞通过受体介导的内吞侵入细胞。目前已经确定的受体主要有:硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、CD163,六、PRRSV的4大特征,1、高度变异2、免疫抑制3、持续感染4、抗体依赖性增强,(1)高度变异,猪蓝耳病病毒基因组结构,1996-2009年国内PRRSV分离株基因组的遗传进化,揭示我国PRRSV存在4个亚型,代表毒株:疫苗株CH-1a株HB-1(2002)株JXA1株,1996-2009年中国分离株全基因组聚类分析(67株PRRSV),1996-2009年中国分离株ORF5基因进化树分析(496株PRRSV的ORF5序列),1996-2009年国内PRRSV分离株ORF5基因的遗传进化,发现GP5蛋白不仅存在抗原漂移,HP-PRRSV的溯源(1),HP-PRRSV的溯源(2),Based onGP5(2002),Based onGP5(2006),Based on Genome and GP5(2009),疫苗株,CH-1aHB-1,HB-1强毒株,疫苗株,CH-1a,HB-1,HP-PRRSV,Li et al., 2010,HP-PRRSV的溯源(3),蓝耳病病毒在我国高度变异病毒本身的特性(RNA病毒):突变、缺失、插入免疫压力疫苗/疫苗、强毒/强毒、强毒/疫苗株间的重组,(2)免疫抑制,Temporal sequence of events after infection of a pig with PRRSV (From Lopez et al, 2004),中和抗体?,细胞免疫?,PRRSV抑制干扰素等天然免疫反应PRRSV编码蛋白诱导的细胞免疫能力也不强,抑制细胞免疫,非中和表位的诱骗效应?过度糖基化的屏蔽效应?,抑制体液免疫,在GP5胞外区的诱骗表位与中和表位间插入辅助序列(PADRE),使中和表位充分展示,可显著增强中和抗体和细胞免疫产生。,(3)持续感染,病毒血症是检测PRRSV持续感染的一个重要指标,PRRSV具有持续感染特性人工感染猪体内后,可以从肺、血清、淋巴组织中分离到病毒,至少可以存在6-8周。但不同课题组的研究结果不是很一致,最长的报道可以持续500天以上,(4)抗体依赖性增强,病毒感染都是从黏附于细胞表面开始的, 黏附是通过病毒表面蛋白与靶细胞上特异性受体和配体分子的相互作用来完成的。病毒表面蛋白的特异性抗体常常可以阻抑这一步骤, 将病毒“ 中和”, 使其失去感染细胞的能力。在有些情况下, 抗体在病毒感染过程中却发挥相反的作用, 它们协助病毒进入靶细胞, 提高感染率, 这一现象就是抗体依赖性增强作用(Antibody-de
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