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文档简介

倒平板 划平板 涂布操作步骤 1 无菌准备 无菌准备 1 提前 1 个小时打开无菌室紫外灯消毒灭菌 1 操作者的衣着和手 进行清洁和消毒 2 将用于微生物培养的器皿 接种的用具和培养基等进 行灭菌 3 所有无菌操作都需在酒精灯旁操作 二 培养基配置 二 培养基配置 1 LB 肉汤 肉汤粉 330g 5g 葡萄糖 1000ml 蒸馏水 2 营养琼脂培养基 琼脂培养基粉 300g 5g 葡萄糖 1000ml 蒸馏水 三 倒平板操作 三 倒平板操作 1 将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上 右手拿装有培 养基的锥形瓶 左手拔出棉塞 右手拿锥形瓶 使瓶口迅速通过火焰 2 用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙 右手将锥 形瓶中的培养基 约 10 20ml 倒入培养皿 左手立即盖 上培养皿的皿盖 轻轻摇匀 3 等待平板冷却凝固 大约需 5 10min 后 将平板倒过 来放置 使皿盖在下 皿底在上 四 平板划线操作 四 平板划线操作 1 将接种环放在火焰上灼烧 直到接种环烧红 2 在火焰旁冷却接种环 并打开盛有菌液的试管的棉塞 3 将试管口通过火焰 将已冷却的接种环伸入菌液中 沾 取一环菌液 将试管口通过火焰 并塞上棉塞 4 左手将皿盖打开一条缝隙 右手将沾有菌种的接种环迅 速伸入平板内 划三至五条平行线 盖上皿盖 注意不要 划破培养基 5 灼烧接种环 待其冷却后 从第一区域划线的末端开始 往第二区域内划线 重复以上操作 在三区域内划线 注 意不要将最后一区域的划线与第一区相连 6 将平板倒置 放入培养箱中培养 五 涂布平板操作 五 涂布平板操作 1 将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中 2 取少量菌液 不超过 0 1ml 滴加到培养基表面 3 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃 待酒精燃尽后 冷却 8 10s 4 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面 涂布时可转 动培养皿 使涂布均匀 注意 注意 1 将涂布器末端浸在盛有体积分数为 70 的酒精 的烧杯中 取出时 要让多余的酒精在烧杯中滴尽 然后 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引
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