凝血分析前变异

凝血分析前变异,SYSMEX市场部李强,凝血检查结果的影响因素,采血样本处理,溶解处理,状态机械维护保养,样本,试剂,分析仪,病人,状态,实验室误差分析,Plebani和 Carraro分析了40,490份为期3个月的帕多瓦大学医院的实验室的结果 - 189 个误差 (0.47%)13% - 分析中18% - 分析后68% - 分析前189个有误差的结果中有四分之一导致了不必要的检查和不恰当的治疗和护理。.Mario Plebania and Paolo Carraro. Mistakes in a stat laboratory: Types and frequency. Clinical Chemistry. 1997;43:1348-1351.,病人- 相关变异因素,饮食,肥胖,年龄,月经,药物,酒精,血型,吸烟,性别,“O 型血的 vWF 和 FVIII 比非“O”.型血活性低,阿司匹林，华发林，肝素等影响凝血和血小板功能,酒精能够抑制血小板的功能,富含维生素K对华发林有反作用 (INR 下降).,妊娠,绝经,女性出血时间更长,不同的状态凝血功能不一样,促凝因子增加 纤溶功能减弱 AT和 PC 活性升高,与心血管疾病有关. FVII抗原和活性升高,许多凝血因子随着年龄的增加而升高,Altered, Coagulation Lysis Or Thrombosis: The Clotting Times, volume 4, Issue 1, April 2004,样本的质量最为重要，因此控制好样本的采集程序非常必要,采血方法抗凝剂 (类型和用量)样本量,分析前变异,样本处理 准备 储存 复溶和稳定性,样本采集,分析前变异,静脉穿刺正确：CLSI 推荐采用含有抗凝剂的真空采血装置如果使用注射器，需要使用小容量的注射器 (20 mL)，材质使用塑料或硅化的玻璃错误止血带压迫时间延长导致组织液渗出和溶血，理想的情况应该是止血带使用时间不超过1分钟使用注射器/针头会增加溶血和凝血的风险 抽血不顺利会影响结果,分析前变异,静脉穿刺正确应该根据采血量、病人的年龄、静脉的大小决定合适规格的针头 如果使用静脉留置管采样，首先吸取5mL血液润洗管道，减少肝素的污染。错误避免创伤引起溶血。小的针头会引起血小板的破坏和溶血,分析前变异,推荐的采血顺序 凝血样本应该放在第二或第三管 血培养管 普通血清玻璃管 凝血样本枸橼酸钠抗凝管 凝胶血清分离管/普通血清塑料管 肝素管 EDTA血常规管 葡萄糖管, 样本管的混匀 正确血液进入试管后，轻轻的颠倒混匀3到4次 错误不要使用试管摇床 混匀次数用力过猛或次数过多，容易引起溶血和血小板激活,分析前变异,= 1 inversion,分析前变异, 抗凝剂类型正确推荐枸橼酸钠浓度 105 to 109 mmol/L, 3.13% to 3.2% 错误其他浓度(3.8%)和其他抗凝剂(例如：草酸钙，肝素，EDTA),分析前变异, 血液/抗凝剂比率正确9：1错误充盈不足，血液/抗凝剂比例下降，导致结果假性延长充盈过度，血液/抗凝剂比例升高，引起结果错误或标本凝固,分析前变异, 抗凝剂浓度调整当压积大于55%，需要调整抗凝剂比例对压积低于20%的血液，暂时没有推荐的调整比例.,计算公式：X = (100 - PCV)/(595 - PCV)X为每毫升抗凝标本所用抗凝剂的量PCV为红细胞压积，单位为%,Pre-Analytical Variables, 离心 正确为获得乏血小板血浆(PLT 10,000/mL)：常温状态下，离心力 1500 g 至少离心 15分钟。 新鲜样本，PLT大于200,000/mL，PT/INR, APTT 和 TT不受影响。 Carroll WE, Wollitzer AO, Harris L et al. The significance of platelet count in coagulation studies. J Med.2001;32;83-96水平式转子离心机，不能使用刹车,分析前变异, 离心错误血小板浓度高会引起LA假阴性血小板的存在是对肝素治疗的监测产生干扰 Platelet factor 4 (PF4) 中和肝素导致APTT不延长,分析前变异, 运输和储存错误试管不闭盖 = CO2丢失= pH升高 = PT 和 APTT延长,分析前变异, 运输和储存错误温度过高 = FV 和 FVIII 降解 = PT 和 APTT延长.温度过低 (2- 4oC) = 冷激活 FVII = PT 缩短，尤其是没有硅化处理的枸橼酸钠试管,分析前变异, 检测时间和保存温度.,TT、PC、因子V、因子VIII等自血液样本采集之时起，4小时内必须完成离心和检测,分析前变异, 运输和保存 如果不能在规定的时间内运输到达目的地，必须离心分离血浆并且冰冻保存-20oC 2 周以上-70oC 6 月以上 不要使用无霜冰箱冰冻血浆许 37oC 快速复溶，立即检测.样本检测前在 4oC 最多放 2 小时,其他分析误差来源,试剂相关的问题分析仪器,溶解处理,状态机械维护保养,试剂,分析仪器,严格按照说明书要求做,试剂相关问题,有效期? 储存条件稳定性,水的质量溶解程序有效期?,溶解,处理,试剂相关问题, 水质 I 级水：用于检测试剂，要求干扰最小 II 级水：用于常规检测方法 III级水：用于冲洗玻璃器皿,NS: 没有特别要求.,活性炭或蒸馏或反渗透,Type I,Type II,Type III,10,1000,NS,NS,NS,5.08.0,10 (inline),1.0,0.1,0.05,0.1,1.0,0.22-m filter,NS,NS,NS,NS,最大微生物量 (CFU/mL),pH,最小电阻 (MW/cm),最大硅酸盐浓度 (mg/L),颗粒物质,有机污染物,NCCLS Document C3-A3. 1997, 水质NCCLS 指南推荐I级水用于凝血试验.试剂要求使用双蒸水.使用商业化的水，无需检查电阻，微生物数量等.高pH会凝固试验时间延长.混浊的水表示有污染或存在钙离子.,试剂相关问题,试剂相关问题, 溶解程序 不正确的溶解比例或量污染常常是误差的来源 1) 移液管，加样枪头等 2) 被污染的水 水里含有防腐剂或微生物或抗生素等. 3) 使用不干净的容器或搅拌棒 4) 残留的清洁液,试剂相关问题, 溶解后的储存注意试剂和质控的有效期，在效期内使用. 参考说明书 溶解后的稳定性和保存温度不用的时候闭盖2-8C保存。,严格按照说明书操作仪器.,分析仪器误差,吸样和分配 混匀 温度光路,日常维护其他维护,机械方面,Maintenance,分析仪器误差, 吸样和分配样本和试剂量不准确不精密 1) 针或管路有气泡 2) 针外壁脏 3) 堵针 4) 样本或试剂的注射器单元故障 5) 针的未知错误,重复性差 凝固时间延长 不凝固,分析仪器误差, 仪器故障仪器故障或检测程序错误 1) 混匀功能减弱 2) 孵育时间激活时间不正确 3) 温度异常 4) 试剂飞溅污染 5) 电磁干扰,重复性差 结果不准确,分析仪器误差,找到问题修理故障，