检测生物组织中还原糖脂肪和蛋白质

检测生物组织中还原糖 脂肪和蛋白质检测生物组织中还原糖 脂肪和蛋白质 一 实验原理一 实验原理 1 鉴定实验设计的理念 某些化学试剂 生物组织中有关有机化合物 产生特定的颜色反应 2 具体原理 可溶性还原糖 斐林试剂 砖红色沉淀 脂肪小颗粒 苏丹 染液 橘黄色小颗粒 蛋白质 双缩脲试剂 紫色反应 二 目标要求二 目标要求 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖 脂肪 蛋白质的基本方法 三 实验材料三 实验材料 1 可溶性还原糖的鉴定实验 选择含糖量较高 颜色为白色或近白色的植物组织 以苹 果 梨为最好 2 脂肪的鉴定实验 选择富含脂肪的种子 以花生种子为最好 3 蛋白质的鉴定实验 可用浸泡1d 2d 的黄豆种子 或用豆浆 或用鸡蛋蛋白 四 仪器 试剂四 仪器 试剂 1 仪器 双面刀片 试管 试管架 试管夹 大小烧杯 小量筒 滴管 酒精灯 三脚架 石棉网 火柴 载 玻片 盖玻片 毛笔 吸水纸 显微镜 2 试剂 斐林试剂 0 1g L 的 NaOH 溶液 0 05g mL 的 CuSO4溶液 苏丹 染液 双缩脲试剂 体积分数为50 的酒精溶液 蒸馏水 五 方法步骤五 方法步骤 一 还原糖的鉴定 1 实验流程 取材 加试剂 加热 观察 2 鉴定步骤 选材 梨 洗净 去皮 切小块 取5g 放入试管中 图1 加斐林试剂 2ml 由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成 不能分别加入 水浴加热 煮沸2min 观察溶液颜色变化 浅蓝色 棕色 砖红色 结论 还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀 图2 图1 图2 3 改进后优点 简化了用榨汁机榨汁这一步 节省了操作时间 以及对榨汁机的清洗等步骤 另外小 梨块可以在实验过程中切取 不需提前切好 不易因时间太长而褐化 从而避免对反应现 象的干扰 使实验现象更明显 二 脂肪的鉴定 1 实验流程 取材 挤压 加液 观察 2 鉴定步骤 取材 花生种子 挤压 在纸上用力按压 显出油斑 图3 加液 在油斑上滴2 3滴苏丹 染液 观察 油斑出被染成橘黄色 图4 结论 细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色 图3 图4 3 实验成功的要点 脂肪的鉴定实验 选择富含脂肪的种子 以花生种子为最好 该实验成功的关键是获得油斑或只含有单层细胞理想薄片 滴苏丹 染液染液染色2 3min 不需要用酒精洗去浮色 三 蛋白质的鉴定 1 实验流程 选材 加样 加液 观察 2 实验步骤 选材 鸡蛋白或卵清稀释液或黄豆 浸泡1 2d 豆浆 滤液等 加样 取鸡蛋白切成小块 放入试管中 加液 先加入 A 液 即0 1 g ml 的 NaOH 溶液 约十分钟 再加入双缩脲试剂 B 液 即0 01g ml 的 CuSO4 溶液 观察 在 NaoH 溶液中鸡蛋白逐渐变性成透明的胶状 并开 始溶解 加入双缩脲试剂 B 液后溶液变成紫色 图5 图6 结论 蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应 3 实验成功的要点 蛋白质的鉴定实验 用鸡蛋蛋白小块 不会因为蛋清液稀释不够而黏附在试管上 试 管易 清洗 双缩脲试剂的使用 一定要先加入 A 液 即0 1 g ml 的 NaOH 溶液 再加入双缩脲 试剂 B 液 即0 01 g ml 的 CuSO4