慈菇消脂丸中大黄素和大黄酚含量的测定

1 / 6慈菇消脂丸中大黄素和大黄酚含量的测定作者：靳子明,王谨慧,杨少军【摘要】 目的 采用高效液相色谱法测定慈菇消脂丸中大黄素、大黄酚的含量。方法 采用 Symmetry C18 色谱柱( mm150 mm, m),流动相为甲醇-%磷酸溶液(8515),流速： mL/min；检测波长：423 nm；柱温：20 。结果 大黄素、大黄酚在 g 范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为%(RSD%)、%(RSD%)。结论 本方法稳定、简便易行,为慈姑消脂丸的生产提供了质量依据。 【关键词】 慈菇消脂丸；大黄素；大黄酚；高效液相色谱法；含量测定Abstract：Objective To establish a HPLC method for the determination of the content of emodin and chrysophanol in Cigu Xiaozhi pill. Methods The chromatographic procedure was carried out in Symmetry C18 ( mm150 mm, m) column with % phosphoric acid (8515) as the mobile phase, flow rate was mL/min, column temperature was 20 C, and the detection wavelength was 423 nm. Results Emodin and chrysophanol were well separated with 2 / 6other components. The standard curves of emodin and chrysophanol showed linearity in the range of g. The average recoveries were % (RSD%) and % (RSD%) respectively. Conclusion The method is sensitive, simple and accurate, and can be used for the determination of emodin and chrysophanol in Cigu Xiaozhi pill.Key words：Cigu Xiaozhi pill；emodin；chrysophanol；HPLC；content determination大黄素、大黄酚为慈菇消脂丸中决明子、何首乌的主要成分,该制剂作为甘肃中医学院附属医院院内制剂,主要用于脂肪肝、慢性肝炎和肝纤维化、高脂血症及肥胖患者。多年临床使用表明该制剂具有良好的消脂化瘀功效。为了更好地控制该制剂的质量,本试验采用高效液相色谱(HPLC)法测定了大黄素、大黄酚的含量1,为该制剂的质量控制提供依据。1 仪器与试药高效液相色谱仪(美国 Waters 公司)：600 型二元梯度泵和 996 型二极管阵列紫外检测器；BP210S 电子分析天平(Sarlorius 公司)；SK7200H 超声波清洗器(上海科导超3 / 6声仪器有限公司)；IEC Micromax 离心机(美国 Thermo Electron 公司)；Delta 320 pH 计(梅特勒-托利多仪器公司)。慈菇消脂丸,甘肃中医学院附属医院制剂中心制备(批号 XX1110)；对照品：大黄素(批号 110756-200110)、大黄酚(批号 110796-XX14),购自中国药品生物制品检定所。2 方法与结果色谱条件Symmetry C18 色谱柱( mm150 mm,5 m)；流动相为甲醇-%磷酸溶液(8515),流速 mL/min；检测波长：423 nm；柱温：20 。对照品溶液的制备取干燥至恒重的大黄素对照品、大黄酚对照品 10 mg 于 50 mL 量瓶中,精密称重,加甲醇溶解,制成每 1 mL 含大黄酚对照品、大黄素对照品均为 200 g 的混合储备液。精密吸取此储备液,稀释成含大黄素对照品、大黄酚对照品分别为、 、 、 、 g/mL 的对照品系列溶液,备用。供试品溶液的制备取慈菇消脂丸 30 粒研匀,精密称重 200 mg 置于 10 mL 量瓶中,加入甲醇 7 mL,置 70 水浴上加热 30 min,时时振摇,放冷后用甲醇定容,摇匀,过滤,取滤液即得供试品4 / 6溶液。另取缺决明子和何首乌的慈菇消脂丸,同法制备阴性对照品溶液。 系统适应性试验在“”项色谱条件下,将对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液进样分析,结果表明：对照品溶液和供试品溶液中大黄素、大黄酚峰形较好,阴性对照品溶液在大黄素、大黄酚保留时间的位置上无干扰。见图 1。线性关系考察精密吸取含大黄素对照品、大黄酚对照品均为、 、 、 g/mL 的对照品系列溶液 L 进样,测定积分面积。以色谱峰面积 A 和进样浓度 C(g/mL)绘制标准曲线,得回归方程分别为：Y2 4 319,r2 3；Y1 8 876,r2 5。表明大黄素、大黄酚在 g 范围内与峰面积呈良好线性关系。精密度试验精密量取同一对照品溶液 10 L 进样,重复 5 次,测定大黄素、大黄酚的峰面积积分值。结果平均峰面积分别为 48 521415、42 5741 313,RSD 分别为%、%。表明本法精密度良好。稳定性试验精密量取同一供试品溶液 20 L,分别于第5 / 61、2、3 日各重复进样 5 次,并测定大黄素、大黄酚峰面积积分值。结果大黄素 RSD 分别为%、%、%,总 RSD%；大黄酚 RSD 分别为%、%、%,总 RSD%。说明供试品溶液在 72 h内基本稳定。加样回收率试验精密称取已知大黄素( mg/g)、大黄酚( mg/g)含量的慈菇消脂丸约 100 mg,共 6 份,精密称定,分别加入大黄素对照品 g,大黄酚对照品 g,按照“”项下方法制备供试品溶液,按照“”项下方法进样 L,测定积分面积,并根据标准曲线计算供试品中大黄素、大黄酚含量及相应的回收率。结果见表 1。 表 1 加样回收率试验结果(略)含量测定取不同批号慈菇消脂丸 6 份,各 30 粒,研匀,精密称重 200 mg 于 10 mL 量瓶中,按“”项下方法制备供试品溶液,按“”项下方法进样 L,测定积分面积,并根据标准曲线计算供试品中大黄素、大黄酚含量。结果见表 2。表 2 慈菇消脂丸中大黄素、大黄酚含量测定结果(略)3 讨论本试验以大黄素及大黄酚的含量为指标,考察了不同加热温度(50、70、100 )及加热时间(15、30、60 min)的6 / 6提取效果,结果表明,水浴 70 ,加热时间为 30、60 min 时,大黄素及大黄酚的含量较高。考虑节约资源和时间,最后确定供试品溶液以 70 水浴上加热 30 min 提取。大黄素、大黄酚为决明子、何首乌中蒽醌类