western转膜条件

western 转膜条件转膜条件 蛋白来源 RAW264 7 总蛋白 蛋白名称 可保密 一些转录因子 蛋白分子量 40 70 KD WB 用膜类型 孔径 0 45 NC 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 400 mA 转膜时间 60 90 min PS 其实吧 以我的经验来看 除非目的蛋白特别小 或者特别大 不然转膜时间真的不 是那么重要 曾经因为失误 转了 15 min 就拆下来了 但从丽春红染色来看 跟平常实 验也没有太大的区别 蛋白来源 内皮细胞 总蛋白 蛋白名称 可保密 occludin AKT 蛋白分子量 65 KD 56 KD WB 用膜类型 孔径 0 45 PVDF 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒压 100 V 转膜时间 60 70 min 设备名字是 Bio Rad mini 蛋白来源 乳鼠心肌细胞和成年鼠心肌组织 总蛋白和核蛋白 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 65 KD 55 KD WB 用膜类型 孔径 PVDF 预先用甲醇处理 转膜方式 恒压 恒流 半干转 恒压 12 V 转膜时间 30 40 min 设备 Bio Rad mini 建议 最开始做过湿转 过夜的那种 太费事费时 效果也不如半干转 蛋白来源 293T 细胞 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 95 KD 35 KD WB 用膜类型 孔径 PVDF 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒压 90 V 110 V 控制电流不要超过 300 mA 转膜时间 70 min 蛋白来源 肿瘤手术标本 蛋白名称 可保密 转录因子 蛋白分子量 33 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 350 mA 恒流 转膜时间 150 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 说明 相同条件曾用于数个 30 70 KDa 的蛋白 都能成功转上 不过没有试缩短时间效果 如何 实验时没为转膜条件苦恼 倒是电泳时胶的浓度及时间根据不同分子量而有区别 蛋白来源 成纤维细胞 蛋白名称 可保密 smad3 蛋白分子量 54 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 350 mA 恒流 转膜时间 150 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 胰腺癌细胞 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 16 KDa and 42 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 120 V 恒压 转膜时间 90 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 大鼠血管平滑肌细胞 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 72 KD 42 KD 和 22 KD WB 用膜类型 孔径 一般的 PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流一张膜 0 26 A 两张膜 0 3 A 转膜时间 90 min 设备 Bio Rad mini 建议 转膜缓冲液最多用 3 次 最好现用现配 我们用的没有加 SDS 转的时候最好能用 冰块一类的东西降一下温 这样转的效果要好一些 转的时候一定要把三明治每层之间的 气泡除去 同时使滤纸大于膜 膜大于胶 以免烧坏电极 蛋白来源 大鼠 PBMC 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 55 KD WB 用膜类型 孔径 0 22 的 PVDF 膜 转膜方式 恒流 湿转 转膜时间 60 90 min 设备 Bio Rad mini 建议 转膜液用过两三次之后转膜效果就很差了 其它按照常规就好了 其实 0 22 的膜一般 不怕转过头 以我们的经验 转膜时间 电压其实 也有很大范围的调整 并不是非要固定 于哪一个最合适 曾经做过 一张膜转 17 KD 的和 170 KD 的 按照 170 KD 的条件 17 KD 的转膜也很好的 蛋白来源 人非小细胞肺癌细胞系 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 大于 250 kD WB 用膜类型 孔径 millipore PVDF 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 0 3A 转膜时间 180min 设备 Bio Rad 建议 电转保持电压在 70 V 以上 保持低温 如果电压低过 70 就需要换缓冲液了 蛋白来源 白血病细胞 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 28 KD WB 用膜类型 孔径 0 45 的 NC 膜 转膜方式 恒流 湿转 90 min 0 25 A 设备 Bio Rad 建议 海绵厚度要合适 一次转磨用的海绵太薄 导致三明治没夹紧 转膜后拿出来一看 marker 都变得七扭八歪 但是有前辈说垫的海绵太厚可能将胶压断 没经历过 不知道是 不是会有这种情况 蛋白来源 肿瘤细胞 蛋白名称 可保密 磷酸化蛋白 蛋白分子量 10 200 KDa WB 用膜类型 孔径 millipore PVDF 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 120 v 恒压 转膜时间 120 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 建议 转膜缓冲液只用 2 次 基本都转上 5 BSA 封闭 减少背景 蛋白来源 胰腺 细胞 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 90 130 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 250 mA 恒流 转膜时间 150 min 转膜设备 湿转 蛋白来源 原核表达 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 38 KD WB 用膜类型 孔径 0 45 NC 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒压 100 V 转膜时间 120 min 蛋白来源 心脏 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 220 kDa 130 kDa 70 kDa 41kDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 转膜方式 恒压 恒流 恒压 转膜时间 70 v120 min 180 min 5 6 h 转膜设备 伯乐湿转 建议改进方向 可选 40 kDa 一下 70 v 60 90 min 足够 40 70 kDa 90 120 min 即可 70 120 kDa 70 v 120 180 min 足够 120 180 kDa 180 240 min 180 kDa 以上建 议 6 h 蛋白来源 卵巢癌细胞膜蛋白 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 53 KD WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 恒压 转膜时间 80 V 100 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 人宫颈癌 HELA 细胞总蛋白 蛋白名称 可保密 actin 蛋白分子量 42 WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 恒压 转膜时间 50 4 h 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 脑组织 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 16 KD 27 KD 32 KD 42 KD WB 用膜类型 孔径 PVDF 0 22 um 转膜方式 恒压 恒流 半干转 恒流 1 mA cm2或 2 mA cm2 转膜时间 不定 转膜设备 北京六一仪器 建议 我共做了六个蛋白 所以总在想节约时间的方式 在 预试时我会观察电压数与转膜效率的关系 所以我不会按时间来定何时转完 而是按电 压来定 通过染胶来确定电压数与转移蛋白分子量上限的关系 这样有的 5 分 钟就转完 了 不用多浪费时间 并且六一的半干转膜仪随着使用次数的增多 效率也会下降 所以 时间和转膜效率 尤其是使用后期 的关系并不稳定 单纯依靠时 间有时会有问题 蛋白来源 CHO cell 蛋白名称 可保密 酶原 蛋白分子量 40 KD WB 用膜类型 孔径 0 22 的 PVDF 膜 Biorad 转膜方式 恒压 100 V 湿转 转膜时间 60 min 设备 Tanon 上海天能 建议 1 转膜液现用现配 用完倒掉 2 转膜时间 电压可以适当调整 分子量大或者小一些的蛋白 采用此条件一样转膜效率 很高 蛋白来源 Hepg2 蛋白名称 可保密 EGFR 蛋白分子量 170kd WB 用膜类型 孔径 pvdf 0 45 转膜方式 恒压 恒流 24V 转膜时间 2 个半小时 转膜设备 伯乐半干转 蛋白来源 肝癌细胞 蛋白名称 HIF 1 蛋白分子量 120 kD WB 用膜类型 孔径 NC 膜 转膜方式 恒压 80 伏 湿转 转膜时间 150 分钟 设备 Bio Rad mini 建 议 湿转 转膜液特别重要 否则会导致电压或者电流不稳影响转膜条带 转膜均现配 先用 不重复利用 转膜时间一般是 150 分钟 80 伏恒压 经李春红染 色 靠近蛋白胶 的一侧膜上蛋白染色深 膜另外一面染色浅 说明蛋白未转过 该湿转条件自己做过的蛋 白分子量范围 170 36 kD 蛋白来源 心肌细胞总和膜 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 128 KD 100 60 55 43 KD WB 用膜类型 孔径 NC 膜 0 2 um 转膜方式 恒压 恒流 恒压 转膜时间 70 V 200 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 建 议 转膜液最好现配现现用 或配成母液 最好不重复使用 70 V 电压下 电流约 154 mA 甲醇可以加到 150 ml 对大分子量如 200 KD 转膜时间延长 6 8 h 蛋白来源 肺脏 蛋白名称 可保密 ICAM 1 蛋白分子量 85 110 KD WB 用膜类型 孔径 0 22NC 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 300 mA 转膜时间 120 min 设备名字 Bio Rad mini 一抗用的 santa cruz 1 mL 包装的 比例调整到 1 800 做出很好的条带 效价会一直降 低的 去年做的这个指标 今年夏天做就不行了 蛋白来源 成纤维细胞 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 16 KDa WB 用膜类型 孔径 0 2 um PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 0 2 A 恒流 转膜时间 65 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 成纤维细胞 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 28 KDa WB 用膜类型 孔径 0 2 umPVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 0 25 A 恒流 转膜时间 60 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 人肿瘤细胞 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 80 KD WB 用膜类型 孔径 0 45 um PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 半干转移系统恒流 勿超过 0 85 mA cm2 同时转多张膜电流 需累加 串联 转膜时间 60 90 min 设备 Bio Rad 其实有些东西并不是非常严格的 要转移的目的蛋白分子量小 那么转移的时间就短一些 反之 则长一点 蛋白量充足 可以多转一会 蛋白量较少 则要少转一下 免得蛋白穿 膜而过到了滤纸上而前功尽弃 蛋白来源 人和鼠肝癌细胞总蛋白 胞浆 胞核蛋白 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 17 116 kd WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 恒流 200 mA 转膜时间 3 h 转膜设备 湿转 北京六一 24D mini 蛋白来源 CO COS7 293T 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 80 72 56 52 48 25 18KD WB 用膜类型 孔径 0 45 um PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 湿转 90 V 电流约为 230 280 mA 之间 两张膜串联叠加 转膜时间 40 min 设备 Bio Rad 法码西亚 蛋白来源 人肿瘤细胞 蛋白名称 可保密 磷酸化蛋白 蛋白分子量 30 60 KDa WB 用膜类型 孔径 pall NC 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 恒流 0 85 1 mA 平方厘米膜 转膜时间 60 90 min 转膜设备 北京六一 半干转 建议 转膜缓冲液用新鲜配制的 可先配成 2 倍的母液 转膜液的多少会影响电转的效率 一般将吸水纸润湿即可 不要和膜一起浸泡 这样效果很好 蛋白来源 人肝癌肿瘤细胞 蛋白名称 可保密 notch 蛋白分子量 60 120 KDa WB 用膜类型 孔径 pall NC 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 恒流 0 3 A 转膜时间 20 度冰柜 120 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 建议 转膜缓冲液用新鲜配制的 可先配成 10 倍或 5 倍的母液 保持低温是转膜效果的 一个保证 这样效果很好 蛋白来源 胶质瘤细胞总蛋白和核蛋白 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 18 KDa 36 KDa 55 KDa 98 KDa WB 用膜类型 孔径 NC 膜 PALL 转膜方式 恒压 恒流 0 35 恒流 转膜时间 60 min 转膜设备 湿转 Bio Rad mini 转缓液的配制有点讲究 如果蛋白大于一百多 一般加入 SDS 时间延长结果会更好些 由于 目前试验的蛋白就都不大 所以 我们都采用不加 SDS 的转缓液 跑出来的条带 也很整齐 干净 蛋白来源大肠癌 205 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 92 kd 43 kd WB 用膜类型 孔径 0 45pvdf 转膜方式 恒压 恒流 恒压 转膜时间 90 min 转膜设备 湿转 天能 蛋白来源 大鼠脑组织 蛋白名称 可保密 BDNF 28 KDa Bactin 42 KDa LaminB 72 KDa 以 及磷酸化蛋白 保密 43 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 0 45 膜 转膜方式 恒压 恒流 300 mA 恒流 转膜时间 60 min 转膜设备 湿转 Bio Rad Mini 转膜缓冲液 25 甲醛 觉得这个浓度的甲醛可以有效降低电转的热量 而且使膜对蛋白 的吸附效果较好 Marker 转到膜上很鲜艳 用立春红染色效果也很好 蛋白来源 表达产物 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 29 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 转膜方式 恒压 恒流 0 3 A 恒流 转膜时间 80 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 cell lysate culture medium 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 15 50 kD WB 用膜类型 孔径 NC PVDF 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 恒压 semi dry 转膜时间 about 2h is ok if the protein is small and the voltage can keep 100 V if not increase to 3 4 h 转膜设备 Bio Rad 蛋白来源 肺脏 肝脏等 蛋白名称 可保密 actin 蛋白分子量 43 kD WB 用膜类型 孔径 NC 膜 PALL 0 22 um 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 200 mA 转膜时间 45 60 min 设备名字 Bio Rad mini 用的 santa cruz 分装和整装的都可以 效价一般 1 1000 1 3000 左右 可稳定较长一 段时间 蛋白来源肺脏 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 19 kd 35 kd WB 用膜类型 孔径 0 2pvdf 转膜方式 恒压 恒流 恒流 250 转膜时间 150 min 转膜设备 湿转 Bio Rad mini 蛋白来源 大鼠血管 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 140 kd WB 用膜类型 孔径 0 45pvdf 转膜方式 恒压 恒流 恒流 200 mA 转膜时间 210 min 转膜设备 湿转 北京六一 蛋白来源 心肌 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 90 kDa 70 kDa 12 6 kDa WB 用膜类型 孔径 NC 转膜方式 恒压 恒流 恒压 转膜时间 70 v 240 min 120 min 60 min 转膜设备 伯乐湿转 蛋白来源 脑 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 16 KD 60 KD WB 用膜类型 孔径 16 的用 0 22 的 PVDF 60 的用 0 45 的 NC 转膜方式 恒压 恒流 20 V 转膜时间 16 的 30 min 60 的 90 min 转膜设备 Bio Rad 半干 蛋白来源 子宫内膜癌组织 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 156 8 WB 用膜类型 孔径 NC 膜 转膜方式 恒压 恒流 恒流 400mA 转膜时间 90 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 真核表达 蛋白名称 可保密 多种 30 个以上 蛋白分子量 40 200 kD WB 用膜类型 孔径 PVDF 转膜方式 恒压 恒流 恒压 100 V 电流在 280 mA 至 350 mA 之间 转膜时间 60 min M 100kD 60 100min 100kD M 200kD 转膜设备 湿转 蛋白来源 大鼠肾脏 蛋白名称 可保密 保密 蛋白分子量 130 kD WB 用膜类型 孔径 0 45NC 膜 PALL 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 350 mA 转膜时间 120min 设备名字 Bio Rad mini 一抗用的 sigma 羊抗大鼠 0 2 mL 包装的 打折后价格 3000 多 有些贵哦 比例调整到 1 1500 左右条带可 用 BSA 封闭 但是背景稍高 蛋白来源 脑组织 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 38 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 转膜方式 恒压 恒流 80 v 恒压 转膜时间 180 min 转膜设备 湿转 Bio Rad mini 蛋白来源 真核表达 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 约 35 kD 双亚基 WB 用膜类型 孔径 0 22 um PVDF 转膜方式 恒压 恒流 恒流 200 mA 转膜时间 60 min 转膜设备 湿转 Bio rad 天能 六一 转膜时间其实不需要那么长的 转膜没转上一般原因不在这里 可能是转膜液的原因 有 些蛋白 SDS 可能影响其与膜的结合 还原型电泳因巯基乙醇的原因也可能导致后面的抗 体不结合 这是我最近的经验教训 还有一抗的选择很重要 一定要选识别线性表位的 抗体 才能用于做 WB 蛋白来源 细菌蛋白 蛋白名称 可保密 全部的可溶性蛋白 蛋白分子量 11 170 KD WB 用膜类型 孔径 0 45 NC 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 300 mA 转膜时间 80 min 蛋白来源 骨肉瘤细胞 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 72 kDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 半干转 恒流 200 mA 转膜时间 20 30 min 转膜设备 Bio Rad 型号忘了 就是有 4 个插孔的电泳仪 建议改进方向 低温很重要 新鲜的电转液也很重要 蛋白来源 骨肉瘤 CELL LINE 蛋白名称 可保密 Beta actin 蛋白分子量 42 kDa WB 用膜类型 孔径 Nitrocellulose Membrane 0 2 um Pore Size Invitrogen 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒压 22 v 转膜时间 90 min 转膜设备 X cell Sure Lock Mini cell Invitrogen 建议改进方向 转膜过程冰水浴 保持低温 Transfer Buffer 重复使用 蛋白来源 肾瘤细胞 蛋白分子量 39 kDa WB 用膜类型 孔径 Nitrocellulose Membrane 0 2 um Pore Size Invitrogen 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒压 100 v 转膜时间 50 min 蛋白来源 MCF7 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 70 kDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 GE 转膜方式 恒压 恒流 湿转 100 伏 转膜时间 60 min 转膜设备 伯乐小转膜仪 蛋白来源 pichia 分泌表达 蛋白名称 可保密 细胞因子等 蛋白分子量 17 到 30 kDa WB 用膜类型 孔径 millipore PVDF 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒压 100 V 转膜时间 60 min 这个条件除了 100 KDa 的预染 maker 转的不好 剩下的条带都非常清晰 正向前面 ycwzq 说的 感觉时间不是很重要 只要蛋白别太小或太大 在一个比较宽的时间和电压 范围都能转上 当然这些还有一个重要的影响因素就是所用的蛋白转印缓冲液 所以建议把自己用的转印缓冲液的配方也贴上 便于分析交流 我先说我的吧 是大师兄师姐的配方 我用了感觉还不错 但是 100 KDa 以上的转的不好 蛋白转印缓冲液 pH8 2 Tris 碱 1 93 g 甘氨酸 9 g 甲醇 200 ml 加水定容至 1000 ml 蛋白来源 大鼠坐骨神经 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 30 kDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 2 um 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 300 mA 转膜时间 45 min 转膜设备 Bio Rad 蛋白来源 小鼠胚胎成纤维 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 36 KDa 55 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 转膜方式 恒压 恒流 0 3 A 恒流 转膜时间 60 min 转膜设备 湿转 Bio Rad mini 垫子变薄时 可用三层纤维垫 也没问题 蛋白来源 小鼠前列腺癌细胞 蛋白名称 可保密 P53 P21 RAD51 GAPDH 蛋白分子量 53 KDa 21 KDa 37 KDa 36 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 转膜方式 恒压 恒流 恒压 110 v 转膜时间 60 min 转膜设备 湿转 Bio Rad mini 蛋白来源 HEK293 总蛋白 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 200KD WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 2 um 用甲醇预先处理 转膜方式 恒压 恒流 恒压 25 V 转膜时间 过夜 16 20 hours 转膜设备 biorad mini 蛋白来源 人前列腺癌细胞 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 40 KD WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 um 用甲醇预先处理 转膜方式 恒压 恒流 恒压 20 V 限制最高电流 0 3 A 转膜时间 过夜 16 20hours 转膜设备 biorad semi dry 蛋白来源 组织 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 42 KDa WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 22 转膜方式 恒压 恒流 350 mA 恒流 转膜时间 60 90 min 转膜设备 湿转 Bio Rad 蛋白来源 E Coli BL21 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 4 kd WB 用膜类型 孔径 PVDF 0 22 um 转膜方式 恒压 恒流 恒压 15 v 转膜时间 O N 转膜设备 Bio Rad Mini 湿转 转膜液的配制 for 1 L transfer buffer 200 ml Methanol 14 4 g Glycine 3 03 g Trizma base 用了 Trcine gel SDS Page 效果不错 蛋白来源 肾脏 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 23 kd WB 用膜类型 孔径 PVDF 0 45 um 转膜方式 恒压 恒流 恒压 20 v 转膜时间 35 mins 转膜设备 Bio Rad 半干 蛋白来源 来自 MDCK 增殖的流感病毒裂解物 蛋白名称 可保密 PB1 蛋白分子量 96 kd 注意 10 SDS PAGE 冰上电泳 用预染 marker 观察 100kd 的条带跑到胶的正中间位置时 才开始转膜 否则转膜效率降低 WB 用膜类型 孔径 NC 膜 0 45 转膜方式 恒压 恒流 恒压 100V 转膜时间 2 hours 转膜设备 BIO rad 转膜设备 其间 准备一个冰盒 将电泳槽半埋到冰里 转膜液的配制 如甲醇的比例和是否加 SDS 以及多大质量浓度等 2 9 g 甘氨酸 5 8 g tris 0 37 g SDS 200 ml 甲醇 蛋白来源 肾脏 蛋白名称 可保密 蛋白分子量 9 kd WB 用膜类型 孔径 PVDF 0 22 um 转膜方式 恒压 恒流 恒压 20 v 转膜时间 30 min 转膜设备 Bio Rad 半干 蛋白来源 软骨细胞 蛋白名称 可保密 b actin 蛋白分子量 43 kd WB 用膜类型 孔径 PVDF 膜 0 45 转膜方式 恒压 恒流 湿转 恒流 350 mA 转膜时间 85 min 转膜设备 BIO rad 转膜设备 其间 准备一个冰盒 将电泳