(学生版)肿节风的提取、制片及片剂质量控制综合性实验讲义

1 肿节风的提取 制片及片剂质量控肿节风的提取 制片及片剂质量控 制综合性实验讲义制综合性实验讲义 范一文范一文 2 目录 实验一肿节风总黄酮的醇沉提取实验实验一肿节风总黄酮的醇沉提取实验 3 实验二肿节风分散片的制备及片剂的质量控制实验二肿节风分散片的制备及片剂的质量控制 5 3 实验一肿节风总黄酮的醇沉提取实验实验一肿节风总黄酮的醇沉提取实验 一 实验目的 一 实验目的 1 了解中药提取的基本方法 2 掌握肿节风有效成分的水提醇沉提取纯化技术 二 实验原理 二 实验原理 水提取乙醇沉淀法 简称醇沉法 是中药活性成份纯化与中药制剂精制过程中常用的 方法 水提醇沉是利用中药中的大多数有效成分 如生物碱盐 甙类 有机酸盐 氨基酸 多糖等易溶于水和醇的特性 先用水煮粗提有效成份 再将水提取液浓缩 加入适量的乙醇反 复数次沉降 去除杂质 从而得到纯化的有效成分提取液 影响醇沉效果的因素很多 水提 液浓缩温度 相对浓度 醇沉液含醇量 乙醇添加方法 醇沉次数 醇沉温度与时间等都 会对醇沉物的品质产生影响 本实验以肿节风为提取原材料 利用优化的醇沉条件 提取 纯化肿节风中的总黄酮 本实验中 总黄酮的含量测定采用的是紫外分光光度法 总黄酮溶液在紫外光谱的范 围内有明显的吸收峰 而且其溶液的浓度在一定的范围内与其吸光度呈线性关系 通过测 定不同浓度的芦丁 黄酮标准品 对照品溶液的吸光度 建立标准曲线 测定样品溶液的 吸光度 则可从标准曲线上确定溶液中总黄酮的含量 三 实验材料与仪器三 实验材料与仪器 1 实验材料 肿节风药材 芦丁标准品 无水乙醇 硝酸铝 氢氧化钠 亚硝酸钠 蒸馏 水 2 主要器材 紫外分光光度计 旋转蒸发仪 电子天平 离心机 电炉 25ml 容量瓶 0 45 m 的微孔滤膜 四 实验方法四 实验方法 一 实验基本流程 水煮肿节风药材 浓缩得到浸膏 为制片提供原材料 醇沉 通过芦丁标准曲 线测定肿节风总黄酮的含量 2 实验操作 1 水煮 用电子天平称取 100g 的肿节风药材于烧杯中 加 800ml 水在电炉上煮 2h 左右 过滤 保留药液 药材残渣再加 800ml 水煮 2h 左右 过滤合并药液并将药液在电炉上蒸发至 50ml 左右 将药液移至旋转蒸发仪中蒸发至液体相对密度为 1 3 左右 即得肿节风浸膏 差不多 20ml 2 醇沉 取 1ml 肿节风浸膏于烧杯中 用注射器 加水使其初膏浓度为 1 2 即每毫升浸膏 相当于 2g 干药材 然后加入浸膏液体总体积 1 5 倍量的无水乙醇 使浸膏溶液中乙醇浓 度达 60 说明 100g 药材旋蒸出 20ml 浸膏 初膏浓度即为 1 5 1ml 初膏浓度为 1 5 4 的浸膏相当于 5g 干药材 加 1 5ml 水使液体量达 2 5ml 则此时其初膏浓度变为 1 2 再 加 2 5 1 5 3 75ml 无水乙醇使乙醇浓度达 60 然后置冰箱中冷藏 15h 得到醇沉后溶 液 醇沉过程需做 3 个平行样 3 标准品溶液的制备 精密称取芦丁标准品 10 0mg 在小烧杯中加体积分数为 60 的乙醇溶解后转移至 50mL 量瓶中 定容至刻度 4 建立标准曲线 分别精密吸取芦丁标准品溶液 0 2 3 4 5 6 7mL 置 25mL 量瓶中 分别加体积 分数为 60 的乙醇补足至 7mL 然后加入质量分数为 5 亚硝酸钠 1 0mL 摇匀 静置 6min 加入质量分数为 10 硝酸铝 1 0mL 摇匀 静置 6min 再加入质量分数为 4 的氢氧 化钠 10 0mL 用蒸馏水定容至 25mL 摇匀 静置 10min 后 然后按 2 2 3 中方法处理 用 可见 紫外分光光度计于 510nm 处测吸光度 以芦丁标准品的浓度为横坐标 吸光度为纵坐 标 绘制标准曲线 5 样品溶液的制备 取醇沉后溶液 离心 4000r min 5min 再取离心上清液置蒸发皿中 在烘箱中烘 1h 左右烘干 先加入 1ml 蒸馏水溶解 再加入 8ml 无水乙醇 搅拌均匀 然后离心取上清 液 用 0 45 m 的微孔滤膜滤过 加水定容至 25mL 作为样品溶液 6 样品含量测定 精密吸取样品溶液 1 0ml 按 4 项中所示方法加试剂 于 510nm 处测定吸光度 另取 一空的 25ml 容量瓶 按相同操作加试剂 作为空白对照 测定吸光度 将三个平行样取平 均值计算含量 5 实验结果实验结果 1 获取制备肿节风片的原材料 浸膏 2 测得肿节风中总黄酮的含量 六 注意事项六 注意事项 1 水煮药材时 要随时观察 切记烧干了 2 醇沉时加入乙醇请尽量缓慢添加 并用玻璃棒搅拌均匀 3 在实验过程中发现 样品随放置时间延长 吸光度测定值逐渐减小 而且结果相差较大 因 此 在试验的过程中应严格控制各个步骤的操作时间及最终测定含量时间不能相差太大 保 证各样品在同一条件下测定 七 思考题七 思考题 1 中药材常用的提取技术有哪些 2 为什么药液醇沉时初膏浓度不能太稀或太浓 5 实验二实验二 肿节风分散片的制备及片剂的质量控制肿节风分散片的制备及片剂的质量控制 一 一 实验目的实验目的 1 了解和掌握湿法制粒压片技术 2 学会使用单冲压片机 3 熟悉并掌握片剂的质量检查方法 二 实验原理二 实验原理 片剂系指药物与适宜的辅料均匀混合 通过制剂技术压制而成片状的固体制剂 片剂 由药物和辅料两部分组成 辅料是指片剂中除主药外一切物质的总称 亦称赋形剂 为非 治疗性物质 加入辅料的目的是使药物在制备过程中具有良好的流动性和可压性 有一定 的黏结性 遇体液能迅速崩解 溶解 吸收而产生疗效 片剂中常用的辅料包括填充剂 润湿剂 黏合剂 崩解剂及润滑剂等 通常片剂的制备包括制粒压片法和直接压片法两种 前者根据制颗粒方法不同 又可 分为湿法制粒压片和干法制粒压片 其中湿法制粒压片较为常用 湿法制粒压片适用于对 湿热稳定的药物 其一般工艺流程如下 润湿剂 黏合剂 粉碎 过筛 混合 制软材 制湿颗粒 湿粒干燥 整粒 润滑剂 崩解剂混合 混合 压片 包衣 包装 挥发性成分 三 仪器和材料三 仪器和材料 一 仪器 烧杯 普通天平 玻璃棒 药匙 不锈钢盘子 钢筛 20 100 目 烘箱 单冲压片机 冲头 12mm 或 9mm 智能崩解仪 溶出度仪 片剂硬度仪等 二 材料 肿节风浸膏 密度 1 3g ml 左右 微晶纤维素 羧甲基纤维素钠 羟丙基纤 维素 羧甲基淀粉钠 滑石粉 乙醇 蒸馏水等 四 实验步骤四 实验步骤 一 片剂成品的制备 1 肿节风分散片的制备 处方 主药 肿节风浸膏 4 0g 填充剂 微晶纤维素 12 0g 崩解剂 羟丙基纤维素 5 占干颗粒重 6 崩解剂 羧甲基淀粉钠 3 占干颗粒重 润滑剂 滑石粉 4 占干颗粒重 黏合剂 3 羧甲基纤维素钠 适量 润湿剂 50 乙醇 适量 制法 按处方量准确称取肿节风浸膏 填充剂 搅拌均匀 喷洒 50 乙醇适量 并加入适量 黏合剂 混合均匀 制成软材 把软材置于 20 目筛 边小力挤压边抖动钢筛 使软材过筛 成较结实的小颗粒 放于 600C 的烘箱中烘干 干颗粒过 20 目筛整粒 称重 按处方量加 入事先过 100 目筛的崩解剂 润滑剂 混合均匀 即可进行压片 二 片剂的质量检查 1 查阅药典 制剂规则 的片剂内容 2 外观检查 检查法 取所制分散片 平铺于白底板上 置于 75w 光源下 60cm 处 距离片剂 30cm 以肉眼 观察 30 秒钟 检查结果应符合下列规定 完整光洁 色泽一致 无杂质 无异物 3 重量差异限度的检查 检查方法 取药片 20 片 精密称重总重量 求得平均片重后 再分别精密称定各片的重量 每片重是 与平均片重相比较 超出重量差异限度的药片不得多于 2 片 并不得有 1 片超出重量差异限 度的 1 倍 检查结果 填表 每片重 g 总重 g 平均片重 g 重量差异 限度 超限的有 X 片 超限 1 倍的 有 Y 片 结论 附注 1 片剂重量差异限度 中国药典 2000 版 片剂的平均重量重量差异限度 0 30 以下 7 5 0 30 或 0 30 以上 5 2 只需要保留小数点以下两位 4 崩解时限的检查 1 将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上 浸入1000ml 烧杯 中 并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm 烧杯内盛有温度为37 7 1 的水 调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下15mm 处 2 除另有规定外 取供试品6 片 分别置上述吊篮的玻璃管中 加挡板 启动 崩解仪进行检查 各片均应在3 分钟内全部崩解 如有1 片不能完全崩解 应另取6 片复试 均应符合规定 如果供试品黏附挡板 应另取 6 片 不加挡板按上述方法检查 应符合规定 5 硬度检查 检查方法 1 指压法 取药片置中指和食指之间 以拇指用适当的力压向药片中心部 如立即分成 两片 则表示硬度不够 2 自然坠落法 取药片 10 片 以 1 米高处平坠于 2cm 厚的松木板上 以碎片不超过 3 片为合格 否则应另取 10 片重新检查 本法对缺解不超过全片的 1 4 不作碎片论 3 片剂四用测定仪 开启电源开关 检查硬度指针是否零位 将硬度盒盖打开 夹住被 测药片 将倒顺开关置于 顺 的位置 拔选择开关至硬度档 硬度指针左移 压力逐渐 增加 药片碎自动停机 此时的刻度值即为硬度值 kg 随后将倒顺开关拔至 倒 的位 置 指针退到零位 6 分散均匀性 取肿节风分散片 2 片 置 20 1 的 100ml 水中 振摇 3min 平行测定 3 份 结 果分散片全部崩解并全部通过二号筛 7 溶出度检查 1 溶出度测定方法 以水为溶出介质 向溶出杯中加入 800ml 加热到 37 1 恒 温 随机取样品 6 片 置于转篮中 转速为 50r min 在 3 5 10 15 30 45min 取样 5ml 向溶出杯中补回等温等量的水 过 0 45nm 滤膜 移取 2ml 样品溶液于 50ml 容量瓶 中 加入 2 3ml 无水乙醇 再加 2 7ml70 乙醇至 12ml 加入 5 亚硝酸钠 2ml 摇匀 放置 6min 加入 10 硝酸铝溶液 2ml 摇匀 放置 6min 加入 4 NaOH20ml 加 70 乙醇至刻度 摇匀 放置 10min 测量 以芦丁为检测指标 紫外分光光度法测定黄酮含量 并计算浓 度和各取样时间的累积溶出百分率 2 溶出度测定 取肿节风分散片 6 片 按 1 中方法测定分散片在 3 5 10 15 30 45min 时的溶出度 3 得出溶出曲线 五 注意事项五 注意事项 1 因季节 地区不同 所加乙醇量应相应变化 也就是温度高可稍增加一些 温度低 则用醇量可稍减一些 2 软材以握之成团 触之即散为度 3 干颗粒一般含水量在 5 8 为度 在本实验中湿颗粒烘干时间可控制在 8 10 分钟 4 干颗粒与辅料必须充分混匀 否则压成的片剂会出现色班等现象 5 压片前需先调好压力和填充 以获得符合硬度要求 4 5kg 左右 的片剂 一般 情况下压力与填充得根据实验的具体条件而调节 但在本实验下 压力表调到黑色指针指 8 向 7 红色指针指向 19 填充表调到黑色指针指向 5 红色指针指向 4 即可 6 开始压片时先在物料斗中放人少量颗粒试压片 调慢转速 11r min 左右 观察是 否有裂片 粘冲 崩裂等现象发生以及重量 硬度是否符合要求 若由于颗粒水分不足而 引起裂片松片现象 则可加人 90 左右乙醇进行混合均匀 以增加含水量 实践证明 适当提 高含水量同时增大压力 能使颗粒内部水分逸出 附着于片面 有助于片剂的成型和增加赫结 力 若由于颗粒含水量太多 出现粘冲现象 则可将颗粒放人烘箱再烘干即可 7 在压片过程中 若出现卡住停转现象 务必按 stop 按键 然后改用摇转轮顺