灭菌注射用水无菌检查方法适用性-报告

编 号 SOP VM 02 076 版本号 00 陕西同康药业有限公司陕西同康药业有限公司 灭菌注射用水无菌检查方法灭菌注射用水无菌检查方法 适用性试验报告适用性试验报告 起草人日 期年 月 日 化 验 室 日 期年 月 日 会 审 质量管理处 日 期年 月 日 批准人日 期年 月 日 0 目目 录录 1 试验描述 2 2 试验依据 2 3 试验项目组成员及职责 2 4 试验内容 2 5 试验前准备 3 6 试验过程 4 7 偏差处理 8 8 变更控制 9 9 最终评价及建议 9 10 试验周期 9 1 陕西同康药业有限公司陕西同康药业有限公司 灭菌注射用水无菌检查方法灭菌注射用水无菌检查方法 适用性试验方案适用性试验方案 1 试验描述 试验描述 本分析方法为本公司的 灭菌注射用水检验标准操作规程 下称 SOP 该 SOP 制定依据 中华人民共和国药典 2015 年版二部的方法 为确保其检测结果 准确 本公司实验室对该品种无菌检查方法适用性是否适合进行试验 2 试验依据 试验依据 中华人民共和国药典 2015 年版四部分析方法指导原则 中华人民共和国药典 2015 年版二部 灭菌注射用水检验标准操作规程 SOP QC 01 001 无菌检查标准操作规程 SOP QC 07 018 灭菌注射用水质量标准 3 试验项目组成员及职责 试验项目组成员及职责 部门部门成员成员职责职责 QC报告起草 QC方法实施 QAQA 监督 质量部分析方法审核 4 试验内容试验内容 序列号序列号试验测试项目试验测试项目可接受标准可接受标准 1灭菌注射用水无菌检查方法 适用性试验 该检查方法适用于灭菌注射用水的无菌 检查 2 5 试验前准备 试验前准备 5 1 人员培训 根据试验方案已对本次试验相关人员进行培训 见附表 1 序号序号参加试验人员名单参加试验人员名单是是否否参参加加培培训训培培训训考考核核结结果果 1口是 口否口符合规定 口不符合规定 2口是 口否口符合规定 口不符合规定 3口是 口否口符合规定 口不符合规定 4口是 口否口符合规定 口不符合规定 5口是 口否口符合规定 口不符合规定 6口是 口否口符合规定 口不符合规定 7口是 口否口符合规定 口不符合规定 8口是 口否口符合规定 口不符合规定 9口是 口否口符合规定 口不符合规定 10口是 口否口符合规定 口不符合规定 11口是 口否口符合规定 口不符合规定 12口是 口否口符合规定 口不符合规定 5 2 仪器设备 标准品和试剂 5 2 1 仪器设备 仪器名称仪器名称编号编号设备操作规程设备操作规程 万分之一天平 pH 计 集菌仪 蒸汽灭菌器 生化培养箱 霉菌培养箱 生物安全柜 快速振荡器 5 2 2 标准品和试剂 名称名称厂家厂家批号批号 硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆胨液体培养基 TSB 培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 SDA 培养基 0 9 无菌氯化钠溶液 3 5 2 3 指导文件 文件名称文件名称编编 号号存放地点存放地点 无菌检查标准操作规程SOP QC 07 018质量管理处 5 2 4 样品 名称名称厂家厂家规格规格批号批号 灭菌注射用水本公司5ml 6 试验过程试验过程 6 1 培养基的适用性检查 对配制好的硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆胨液体培养基无菌性及灵敏度检 查均符合 中国药典 2015 年版无菌检查法 通则 1101 要求 6 2 菌种及菌液制备 6 2 1 菌种 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus CMCC B 26 003 枯草芽 孢杆菌 Bacillus subtilis CMCC B 63 501 生孢梭菌 Clostridium sporogenes CMCC B 64 941 大肠埃希菌菌 Escherichia coli CMCC B 44 102 白色念 珠菌 Candida albicans CMCC F 98 001 黑曲霉 Aspergillus niger CMCC F 98 003 上述标准菌株均源自 工作用菌株为第 三 代 6 2 2 菌液制备 6 2 2 1 接种金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基 TSB 培 养基 中 30 35 培养 18 24h 培养后 用 0 9 无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含 菌数小于 100cfu 的混悬液 6 2 2 2 接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基 琼脂 中 30 35 培养 18 24h 培养后 用 0 9 无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含菌数小于 100cfu 的混悬液 6 2 2 3 接种大肠埃希菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基 TSB 培养基 中 30 35 培养 18 24h 培养后 用 0 9 无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含菌数小 于 100cfu 的混悬液 6 2 2 4 接种枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基 TSB 培养 基 中 30 35 培养 18 24h 培养后 用 0 9 无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含菌 数小于 100cfu 的混悬液 4 6 2 2 5 接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基 SDB 培养基 中 20 25 培养 24 48h 培养后 用 0 9 无菌氯化钠溶液制成每 1ml 含菌数小 于 100cfu 的混悬液 6 2 2 6 接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基 SDA 培养基 上 20 25 培养5 7d 加入含0 05 ml ml 聚山梨酯80 的0 9 无菌氯化钠溶液 将孢子洗脱 然后 采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内 用 0 05 ml ml 聚山梨酯80 的0 9 无菌氯化钠溶液制成每1ml 含菌数小于100cfu 的孢子悬液 表 1 菌液制备计数结果 计数结果计数结果 cfu 皿皿 试验菌株试验菌株代代 数数 菌液菌液 稀释度稀释度 接菌量接菌量 ml 皿皿 平皿平皿 1平皿平皿 2 均值均值 cfu ml 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 生孢梭菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 黑 曲 霉 6 3 方法适用性试验 6 3 1 供试液制备 按照 中国药典 2015 年版 无菌检查法 通则 1101 取供试品 120 支 每次 按无菌操作法处理 以薄膜过滤法进行试验 6 3 2 试验过程 6 3 2 1 试验管 取供试品20支 导入集菌过滤器内 单联 按薄膜过滤法过滤 用 0 9 无菌氯化钠溶液冲洗 每次100ml 共冲洗2次 在最后一次冲洗液中分别 加入小于 100cfu的金黄色葡萄球菌 加入硫乙醇酸盐培养基 枯草芽孢杆菌 生孢梭菌 大肠埃希 菌菌 白色念珠菌 黑曲霉等试验菌 同法操作 加入相应培养基 6 3 2 2 对照管 不加入供试液 按试验管方法同法试验 6 3 2 3 培养 硫乙醇酸盐流体培养基置 30 35 培养 胰酪大豆胨液体培养基 培养基置 20 25 培养 培养不得超过 5 天 6 3 2 4 结果判断 与对照管比较 如含供试品各容器中的试验菌均生长良好 则说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计 照此检查方法和检查条件进行供试品的无菌检查 如含供试品的任一容器中的试验 菌生长微弱 缓慢或不生长 则说明供试品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用 应采用增加冲洗量 使用中和剂或灭活剂 更换滤膜品种等方法 消除供试品的抑 5 菌作用 并重新进行方法适用性试验 6 3 2 5 阴性对照 阴性对照试验同时进行 不得有菌生长 6 3 3 方法适用性试验结果 6 3 3 1 第一次结果 试验时间 年 月 日 培养温度 硫乙醇酸盐流体培养基置 胰酪大豆胨液体培养基置 试验结果见表 2 表 2 无菌检查方法适用性第一次试验结果 硫乙醇酸盐流体培养基观察结果硫乙醇酸盐流体培养基观察结果 试验菌试验菌 培养对象培养对象 培养时间培养时间 12345 试验管 大肠埃希菌 对照管 试验管金黄色 葡萄球菌对照管 试验管 生孢梭菌 对照管 阴性对照硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆胨液体培养基观察结果胰酪大豆胨液体培养基观察结果 试验菌试验菌 培养对象培养对象 培养时间培养时间 12345 试验管 枯草芽孢杆菌 对照管 试验管 白色念珠菌 对照管 试验管 黑曲霉 对照管 阴性对照胰酪大豆胨液体培养基 备注 备注 表示混浊 表示澄清 表示生长微弱 试验结果评价 评价人 日期 年 月 日 6 3 3 2 第二次试验结果 试验时间 年 月 日 6 培养温度 硫乙醇酸盐流体培养基置 胰酪大豆胨液体培养基置 试验结果见表 3 表 3 无菌检查方法适用性第二次试验结果 硫乙醇酸盐流体培养基观察结果硫乙醇酸盐流体培养基观察结果 试验菌试验菌 培养对象培养对象 培养时间培养时间 12345 试验管 大肠埃希菌 对照管 试验管金黄色 葡萄球菌对照管 试验管 生孢梭菌 对照管 阴性对照硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆胨液体培养基观察结果胰酪大豆胨液体培养基观察结果 试验菌试验菌 培养时间培养时间 培养对象培养对象 12345 试验管 枯草芽孢杆菌 对照管 试验管 白色念珠菌 对照管 试验管 黑曲霉 对照管 阴性对照胰酪大豆胨液体培养基 备注 备注 表示混浊 表示澄清 表示生长微弱 试验结果评价 评价人 日期 年 月 日 6 3 3 3 第三次试验结果 试验时间 年 月 日 培养温度 硫乙醇酸盐流体培养基置 胰酪大豆胨液体培养基置 试验结果见表 4 表 4 无菌检查方法适用性第三次试验结果 7 硫乙醇酸盐流体培养基观察结果硫乙醇酸盐流体培养基观察结果 试验菌试验菌 培养对象培养对象 培养时间培养时间 12345 试验管 大肠埃希菌菌 对照管 试验管金黄色 葡萄球菌对照管 试验管 生孢梭菌 对照管 阴性对照硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆胨液体培养基观察结果胰酪大豆胨液体培养基观察结果 试验菌试验菌 培养对象培养对象 培养时间培养时间12345 试验管 枯草芽孢杆菌 对照管 试验管 白色念珠菌 对照管 试验管 黑曲霉 对照管 阴性对照胰酪大豆胨液体培养基 备注 备注 表示混浊 表示澄清 表示生长微弱 试验结果评价 评价人 日期 年 月 日 6 3 4 灭菌注射用水无菌检查方法适用性试验结论 评价人 日期 年 月 日 6 4 灭菌注射用水无菌检查方法小结 取供试品 60 支 采用薄膜过滤法 三联 以 0 9 无菌氯化钠溶液为冲洗液 冲洗量 200ml 膜 100ml 次 按照 中国药典 2015 年版四部无菌检查法 以 相应溶剂和稀释液 冲洗液同法操作 作为阴性对照 以金黄色葡萄球菌为阳性对 照菌 6 5 结果判断 8 阳性对照应生长良好 阴性对照管不得有菌生长 否则 试验无效 若供试品管均澄清 或虽显浑浊但均确证无菌生长 判供试品符合规定 若供 试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长 判供试品不符合规定 除非能充分证明 试验结果无效 即生长的微生物非供试品所含 当符合下列至少一个条件时方可判 试验结果无效 1 无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的 要求 2 回顾无菌实验过程 发现有可能引起微生物污染的因素 3 供试品中污染的微生物经鉴定后 确证是因无菌试验中所使用的物品和 或 无菌操作技术不当引起的 试验若经确认无效 应重试 重试时 重新取同量供试品 依法检查 若无 菌生长 判供试品符合规定 若有菌生长 判供试品不符合规定 7 偏差处理偏差处理 方案执行过程中如有偏差产生 根据 偏差处理管理规定 处理 并填写偏差 处理记录最终报告包括偏差列表和以下信息 偏差编号偏差编号发生工序发生工序 产生原因产生原因处理情况处理情况 处理措施处理措施 处理结果处理结果 8 变更控制变更控制 方案执行过程中如有对原系统进行变更 提出的变更应遵循 变更控制管理 规程 并要求填写变更申请控制表 最终报告应包括变更控制列表 见附表 4 和以下信息 变更控制号变更控制号变更内容变更内容变更原因变更原因处理情况处理情况变更结果变更结果 9 最终评价及建议最终评价及建议 评价人 日期 年 月 日 10 试验周期试验周期 当质量标准有变更 需对相关项目进行再试验 附表 1 验证方案培训签到表验