车间环境卫生检测规范-doc

文件名称 车间环境卫生检测规范车间环境卫生检测规范版次 B 文件编号 第 1 页 共 7 页 车间环境卫生检测规范车间环境卫生检测规范 1 目的 目的 根据 GB 12693 2010 乳制品企业良好生产规范 及本公司 生产 洁净区环境 卫生管理规定 中的相关规定及要求 特制定本规范 2 范围范围 本规范规定了本公司实验室实施车间环境卫生检测的依据 方法及 检测结果判定标准 本规范适用于本公司实验室实施车间环境卫生的各项检测 3 检测项目 检测项目 菌落总数 霉菌 酵母 阪崎肠杆菌 大肠菌群 沙门氏菌 4 检测频率及检测时间 检测频率及检测时间 每日生产前进行生产设备 工器具 包装材料 员工个人卫生等 部位的涂抹试验 每日生产过程中对生产车间空气进行沉降试验 5 职责职责 由检验人员负责车间环境卫生检测的具体操作 6 检测方法检测方法 6 1 空气沉降法空气沉降法 6 1 1 菌落总数 菌落总数 1 车间空气采样 选取 4 个采样点 见附录 1 车间空气采样位点 文件名称 车间环境卫生检测规范车间环境卫生检测规范版次 B 文件编号 第 2 页 共 7 页 图 采样高度为 1 2m 1 5m 采样点应远离墙壁 1 m 以上 并避开空 调 门窗等空气流通处 2 生产车间空气检测采样部位 混粉间 杀菌机 预封机 真封 机 100g 灌装间 软包装灌装间 压片间 储粉间等 每部位为一采 样点 3 将营养琼脂平板置于采样点处 打开平皿盖 暴露 30min 盖上 平皿盖 反转平板 置 36 1 培养 48h 4 若为车间空气菌落总数测定 则应计算 4 个采样点菌落的平均数 若为生产车间空气检测采样部位菌落总数测定 则应计数每个平板上 的菌落数 均以每皿菌落数 CFU 皿 报告结果 6 1 2 霉菌 酵母 霉菌 酵母 1 2 同 6 1 1 菌落总数 3 将虎红琼脂平板置于采样点处 打开平皿盖 暴露 30min 盖上 平皿盖 反转平板 置 25 1 培养 3d 5 d 4 若为车间空气霉菌 酵母总数测定 则应计算 4 个采样点菌落的 平均数 若为生产车间空气检测采样部位霉菌 酵母总数测定 则应 计数每个平板上的菌落数 均以每皿菌落数 CFU 皿 报告结果 6 1 3 阪崎肠杆菌阪崎肠杆菌 1 车间空气采样 选取 4 个采样点 见附录 1 车间空气采样位点 图 采样高度为 1 2m 1 5m 采样点应远离墙壁 1 m 以上 并避开空 调 门窗等空气流通处 文件名称 车间环境卫生检测规范车间环境卫生检测规范版次 B 文件编号 第 3 页 共 7 页 2 将阪崎肠杆菌显色平板置于采样点处 打开平皿盖 暴露 30min 盖 上平皿盖 反转平板 置 36 1 培养 48h 3 计数每个阪崎肠杆菌显色平板上蓝绿色菌落 并计算 4 个采样点 蓝绿色菌落的平均数 以每皿阪崎肠杆菌菌落数 CFU 皿 报告结果 6 2 表面涂抹法表面涂抹法 6 2 1 物体表面涂抹 物体表面涂抹 6 2 1 1 菌落总数 霉菌和酵母菌落总数 霉菌和酵母 6 2 1 1 1 将经灭菌的内径为 5cm 5cm 的规格板放在被检物体表面 用 一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹 然后剪去手接触的部分棉棒 将棉签放入装有 10mL 灭菌生理盐水 乳糖胆盐发酵管的采样管内及时 送检 6 2 1 1 2 将每支灭菌生理盐水采样管充分混匀后 取 1mL 样液 分别 放入灭菌平皿内 加入冷至 45 左右的营养琼脂 虎红琼脂约 15mL 每个样品平行接种 2 个平皿 将营养琼脂平板置 36 1 培养 48h 虎红琼脂平板置 25 28 培养 3 5d 6 2 1 1 3 计数平板上的细菌 霉菌 酵母菌落数 以每毫升检样中的菌 落总数 CFU 的平均数报告结果 6 2 1 2 阪崎肠杆菌阪崎肠杆菌 6 2 1 2 1 将经灭菌的内径为 5cm 5cm 的规格板放在被检物体表面 用 一浸有灭菌营养肉汤的棉签在其内涂抹 然后剪去手接触的部分棉棒 文件名称 车间环境卫生检测规范车间环境卫生检测规范版次 B 文件编号 第 4 页 共 7 页 将棉签放入装有 10mL 灭菌营养肉汤的采样管内及时送检 6 2 1 2 2 将每支灭菌营养肉汤的采样管充分混匀后 取1mL样液 以 0 3 mL 0 3 mL 0 4 mL 接种量分别加入三个阪崎肠杆菌显色平板 然后用无菌L 棒涂布整个平板 注意不要触及平板边缘 使用前 如 阪崎肠杆菌显色平板表面有水珠 可放在25 50 的培养箱里干燥 直到平板表面的水珠消失方可使用 6 2 1 2 3 反转平板 置36 1 培养48h 6 2 1 2 4 挑取蓝绿色可疑菌落 采用API 20E进行生化鉴定及进行氧化 酶 产黄素试验 6 2 1 2 4 根据鉴定及试验结果报告检出或未检出阪崎肠杆菌 6 2 1 3 沙门氏菌沙门氏菌 6 2 1 3 1 将经灭菌的内径为 5cm 5cm 的规格板放在被检物体表面 用 一灭菌的棉签在其内涂抹 然后剪去手接触的部分棉棒 将棉签放入 装有 10mL 灭菌营养肉汤的采样管内及时送检 6 2 1 3 2 将灭菌营养肉汤的采样管于于 36 1 培养 8 18h 6 2 1 3 3轻轻摇匀采样管内的混合物 取1mL样液转种于10mL亚硒酸盐 胱氨酸 SC 内 于36 1 培养18 24h 6 2 1 3 4 用接种环取增菌液1环 划线接种于一个科马嘉显色培养基平 板 于36 1 培养18 24h 6 2 1 3 5 挑取紫红色可疑菌落 采用API 20E进行生化鉴定试验 6 2 1 3 6 根据鉴定及试验结果报告检出或未检出沙门氏菌 文件名称 车间环境卫生检测规范车间环境卫生检测规范版次 B 文件编号 第 5 页 共 7 页 6 2 1 4大肠菌群大肠菌群 6 2 1 3 1 将每支乳糖胆盐发酵管置 36 1 培养 24h 2 h 6 2 1 3 2 若产气 即初步判定为大肠菌群阳性 以大肠菌群阳性 阴性 报告结果 6 2 2 员工手部涂抹 员工手部涂抹 6 2 2 1 被检人五指并拢 用一浸有灭菌生理盐水的棉签在右手指曲面 从指尖到指端来回涂抹 10 次 然后剪去手接触的部分棉棒 将棉签放 入装有 10mL 灭菌乳糖胆盐发酵管内及时送检 6 2 2 2 将每支乳糖胆盐发酵管置 36 1 培养 24h 2 h 若产气 即初 步判定为大肠菌群阳性 6 2 2 3 以员工手表面大肠菌群阳性或阴性 手报告结果 6 2 3 涂抹部位 涂抹部位 6 2 3 1 生产设备 工器具的涂抹 生产设备 工器具的涂抹 预混机 混粉缸 混粉缸上 下料口 筛粉机下料口 下粉漏斗 填充器 筛网 受粉槽 钢管 软管 盆 勺等 6 2 3 2 包装材料的涂抹 包装材料的涂抹 底盖 内袋等 6 2 3 3 员工卫生状况涂抹 员工卫生状况涂抹 连体服 手套 手 涂抹及检测方法同 6 2 1 7 判定依据判定依据 文件名称 车间环境卫生检测规范车间环境卫生检测规范版次 B 文件编号 第 6 页 共 7 页 菌落总数 空气暴露 30min 10 CFU 皿 表面涂抹 50 CFU mL 霉菌 酵母 空气暴露 30min 10 CFU 皿 表面涂抹 10 CFU mL 阪崎肠杆菌 空气暴露 30min 0 CFU 皿 表面涂抹 不得检出 大肠菌群 阴性 8 检测报告检测报告 检验员应真实 准确填写 生产车间环境微生物检测报告 经实 验室主管审核后 报送品控部和生产部 9 说明说明 9 1 混粉间 杀菌机 预封机 真封机为每天必须检测的部位 100g 灌装间 软包装灌装间 压片间 储粉间仅在使用时进行检测 9 2 钢管 软管应每次拆卸清洗后进行检测 9