薄层层析常用显色剂配制及显色方法

碘 适用于不饱和或者芳香族化合物 配制方法 在 100ml 广口瓶中 放入一张滤纸 少许碘粒 或者在瓶中 加入 10g 碘粒 30g 硅胶 高锰酸钾 适用于含还原性基团化合物 比如羟基 氨基 醛 配制方法 1 5g KMnO4 10g K2CO3 1 25mL 10 NaOH 200mL 水 使用期 3 个月 磷钼酸 PMA 广谱 配制方法 10 g of 磷钼酸 100 mL 乙醇 紫外灯 适用于含共轭基团的化合物 芳香化合物 硫酸铈 生物碱 配制方法 10 硫酸铈 IV 15 硫酸的水溶液 氯化铁 苯酚类化合物 配制方法 1 FeCl3 50 乙醇水溶液 桑色素 羟基黄酮 广谱 有荧光活性 配制方法 0 1 桑色素 甲醇 茚三酮 适用于氨基酸 配制方法 1 5g 茚三酮 100mL of 正丁醇 3 0mL 醋酸 二硝基苯肼 DNP 适用于醛和酮 配制方法 12g 二硝基苯肼 60mL 浓硫酸 80mL 水 200mL 乙醇 香草醛 香兰素 广谱 配制方法 15g 香草醛 250mL 乙醇 2 5mL 浓硫酸 溴甲酚绿 适用于羧酸 pKa酸纳的浓硫酸溶液 与多种生物碱呈不同颜色 11 碘 碘化钾 Wagner 试剂 检查生物碱 1 克碘及 10 克碘化钾 溶于 50 毫升水中 加热 加 2 毫升醋酸 再用水稀释至 100 毫升 可作纸层板显色剂 液可作沉淀试剂 酚类 鞣质 12 三氯化铁 检查酚类及 酸 喷洒剂 1 5 三氯化铁的水溶液或乙醇溶液 并加盐酸少许 酸呈红色斑点 酚类称蓝色或绿色斑点 13 铁氰化钾 三氯化钾 检查酚类 芳香胺类及还原性物质 喷洒剂 1 铁氰化钾水溶液 2 三氯化铁水溶液 临用前等体积混合 喷洒后处理 喷洒后酚性物质呈蓝色斑点 再喷 2N 盐酸 能使颜色加深 纸谱可用烯盐酸洗去喷洒液 14 4 胺基安替比林 铁氰化钾 Emerson 反应 检查酚类 喷洒剂 I 2 4 氨基安替比林乙醇溶液 II 8 铁氰化钾水溶液 或用 0 9 4 氨基安替比林和 5 4 铁氰化钾水溶液 方法 先喷洒 I 再喷洒 II 即显色 或再放入密闭缸中 缸内放 25 氢氧化铵 即产生橙色至深红色 15 对氨基苯磺酸 重氮盐 Pauly 试剂 检查酚类 芳香胺类及能偶合的杂环化合物 喷洒剂 4 5 克对氨基苯磺酸 加热溶于 45 毫升 12N 盐酸中 用水稀释至 500 毫升 取 10 毫升稀释液用冰冷却 加 10 毫升冷 4 5 亚硝酸钠水溶液 0 放 15 分钟 此试剂于 0 可保存 3 天 用 前加等体积 1 碳酸钠水溶液 一般重氮化试剂 也可用联苯胺 对硝基苯胺等 16 对甲苯磺酸 检查甾体 黄酮 鞣质 喷洒剂 20 对甲苯磺酸氯仿溶液 喷洒后处理 100 加热数分钟 紫外线分析灯下检查荧光斑点 含氧杂环及蒽醌类 17 三氯化铝 检查黄酮体 喷洒 1 三氯化铝乙醇液于紫外线荧光分析灯下检示 呈黄色荧光 18 碱式醋酸铅 检查黄酮体 喷洒剂 饱和碱式醋酸铅 或饱和醋酸铅 水溶液 于紫外线荧光分析灯下检查荧光斑点 19 醋酸镁 检查蒽醌甙 甙元及黄酮体 喷洒剂 0 5 醋酸镁甲醇溶液 方法 90 加热 5 分钟 呈红色至紫色斑点 20 氢氧化钾 检查香豆素 蒽醌甙及甙元 喷洒剂 5 10 氢氧化钾的甲醇溶液 于日光及紫外线荧光分析灯下检示斑点 萜类 甾体 21 三氯化锑 Carr Price 试剂 检查甾体 萜类 皂类 喷洒剂 25 克三氯化锑溶于 75 克氯仿中 亦可以用氯仿或四氯化碳的饱和溶液 喷洒后处理 100 加热 5 分钟 于紫外线荧光分析灯下检示荧光 22 五氯化锑 检查甾体 萜类 皂甙 喷洒剂 五氯化锑 氯仿或四氯化碳 1 4 用前新鲜配制 喷洒后处理 120 加热至斑点出现 并于紫外线荧光分析灯下检示 23 香兰醛 硫酸 检查高级醇类 酚类 甾体 萜类 芳香油 喷洒剂 1 克香兰素溶于 100 毫升浓硫酸 或 0 5 克香兰醛溶于 100 毫升硫酸 乙醇 4 1 中 喷洒后处理 室温或 120 加热观察显色斑点 24 4 二甲氨基苯甲醛 醋酸 磷酸 E P 试剂 检查 Azulene 及 前体 Proazulene 喷洒剂 0 25 克 4 二甲氨基苯甲醛 溶于 50 毫升醋酸 5 克 85 磷酸和 20 毫升水的混合液中 棕色瓶中保存数月 烃室温即成蓝紫色斑点 前体于 80 加热 10 分钟出现蓝紫色斑点 25 氯胺 T 三氯醋酸 检查强心甙 喷洒剂 I 3 氯仿 T 水溶液新鲜制备 II 25 三氯醋酸乙醇溶液 能保存数天 10 毫升 I 加 40 毫升 II 用前混合 喷洒后处理 110 加热 7 分钟 紫外线荧光分析灯下检示呈蓝色或黄色荧光 26 亚硝酸基铁氰化钠 氢氧化钠 Legal 试剂 检查不饱和内酯 甲基酮或活性次甲基 常用于强心甙 喷洒剂 1 克亚硝基铁氰化钠溶于 100 毫升 2N 氢氧化钠 乙醇 1 1 的水溶液 显红色或紫色斑点 27 3 5 二硝基苯甲酸 Legal 试剂 检查强心甙 不饱和内酯 喷洒剂 1 克 3 5 二硝基苯甲酸溶于 50 毫升甲醇 加入 1N 氢氧化钾 50 毫升 强心甙呈紫红色斑点 糖类 28 邻苯二甲基苯胺 检查还原糖 喷洒剂 0 93 克苯氨 1 66 克邻苯二甲酸溶于 100 毫升水饱和的正丁醇中 喷洒后处理 105 加热 10 分钟 29 2 3 5 Triphenyl tetrazolium chloride T T C 检查还原糖及其他还原物质 溶液 I 4 T T C 甲醇溶液 溶液 II 1N 氢氧化钠 喷洒液 I II 临用前等体积混合 喷洒后处理 100 加热 5 10 分钟 得红色斑点 30 Keller Kiliani 试剂 检查 去氧糖 常用于强心甙 试液 100 毫升冰醋酸加三氯化铁试液 0 5 毫升混合均匀 试样 1 毫克加试液 2 毫克溶解后 沿试官管壁滴入浓硫酸 2 毫升 接触面即显棕色 渐变浅绿 蓝色 最后冰醋酸层全部燃呈蓝色 31 1 3 二羟基萘 磷酸 检查糖类 喷洒液 0 2 1 3 二羟基萘 Naphthoresorcinol 乙醇溶液 100 毫升 与 10 毫升 85 磷酸混合 32 费林溶液 Fehling 检查还原糖 溶液 I 69 3 克结晶硫酸铜溶于 1000 毫升水中 上述二溶液如不清可滤过 临用前等体积混合 氨基酸 33 茚三酮 检查氨基酸及氨基糖 喷洒剂 0 3 克茚三酮溶于 100 毫升正丁醇 加入 3 毫升醋酸 或 0 2 克茚三酮溶于 100 毫升乙醇 或丙酮中 喷洒后处理 110 加热至斑点出现 34 吲哚醌 检查氨基酸和一些肽 喷洒剂 0 2 吲哚醌 Isatin 丙酮溶液 含 4 醋酸 或用 100 毫升 1 吲哚醌丙酮溶液加 10 毫升醋酸 喷洒后处理 100 110 加热 10 分钟 35 1 2 萘醌 4 硫磺酸 Folin 试剂 检查氨基酸 喷洒剂 新鲜制备 0 02 克 1 2 萘醌 4 磺酸钠 溶于 100 毫升 5 碳酸钠中 喷洒后处理 室温放于 不同氨基酸出现不同颜色 有机酸 36 酸碱指示剂 检查有机酸 喷洒剂 0 05 溴酚蓝 或溴甲酚绿 或溴麝香草酚蓝 的乙醇溶液 37 氧化还原显色剂 检查有机酸 喷洒剂 I 0 075 溴甲酚绿及 0 025 溴酚蓝的无水乙醇液 II 0 5 高锰酸钾及 1 碳酸钠 10H2O 的蒸馏水液 临用前 取 I 和 II 按 1 1 混合后喷酒