上海交大网络课程检验微生物讲义17

检验专业必修课考试辅导丛书检验专业必修课考试辅导丛书 临床微生物学检验临床微生物学检验 第 25 章 疱疹病毒 一 教学大纲要求 1 疱疹病毒的种类和共同特点 单纯疱疹病毒的致病性和检测方法 2 水痘 带状疱疹病毒的致病性 3 巨细胞病毒的病毒特性 致病性和检测方法 4 EB 病毒的致病性和检测方法 5 人疱疹病毒 6 型 7 型和 8 型的致病性 二 教材内容精要 疱疹病毒科是一组中等大小 有包膜的 DNA 病毒 分为 三个亚科 亚科疱疹病毒主要包括单纯疱疹病毒属的单纯疱疹病毒 1 型 单纯疱疹病毒 2 型和水痘 带 状疱疹病毒 亚科疱疹病毒主要包括巨细胞病毒 人疱疹病毒 6 型和人疱疹病毒 7 型 亚科疱疹病毒主要包括淋巴滤泡病毒属的 EB 病毒和细长病毒属的人疱疹病毒 8 型 疱 疹病毒具有以下共同特点 1 形态特点 病毒体呈球形 核衣壳是由 162 个壳粒组成的二 十面体立体对称结构 核衣壳周围有一层厚薄不等的非对称性披膜 最外层是包膜 有糖 蛋白刺突 基因组为线性双链 DNA 2 培养特点 人疱疹病毒 EB 病毒除外 均能在二 倍体细胞核内复制 产生明显的 CPE 核内出现嗜酸性包涵体 感染细胞同邻近未感染的 细胞融合成多核巨细胞 3 感染特点 病毒可表现为增殖性感染和潜伏性感染 部分病毒 还具有整合感染作用 与细胞转化和肿瘤的发生相关 一 单纯疱疹病毒 1 单纯疱疹病毒 herpes simplex virus HSV 直径为 120 150nm 由核心 衣壳 被膜及包膜组成 包膜表面含 gB gC gD gE gG gH 糖蛋白 参与病毒对细胞吸附 穿入 gB gC gD gE 控制病毒从细胞核膜出芽释放 gH 及诱导细胞融合 gB gC gD gH 并有诱生中和抗体 gD 最强 和细胞毒作用 HSV 糖蛋白均可 包含 HSV 1 和 HSV 2 二个血清型 2 人类是 HSV 的惟一宿主 主要通过直接密切接触和性接触传播 HSV 的致病性包 括 1 原发感染 HSV 1 原发感染多发生在婴幼儿或儿童 常为隐性感染 感染部位主 要在口咽部 还可引起唇疱疹 湿疹样疱疹 疱疹性角膜炎 疱疹性脑炎等疾病 原发感 染后 HSV 1 常在三叉神经节内终身潜伏 可被激活而引起复发性唇疱疹 HSV 2 原发感染 多发生在青少年以后 主要引起生殖器疱疹 原发感染后 HSV 2 在骶神经节或脊髓中潜伏 可被激活而引起复发性生殖器疱疹 2 潜伏感染和复发 HSV 原发感染后部分病毒在神 经细胞内潜伏并持续存在 当机体受到某些非特异因素刺激时潜伏的病毒即被激活而增殖 沿神经纤维索下行至感觉神经末梢 到达附近表皮细胞内继续增殖 引起复发性局部疱疹 3 先天性感染 HSV 2 通过胎盘感染 易导致流产 胎儿畸形和智力低下等 新生儿疱 疹是在母体分娩时接触 HSV 2 感染的产道所致或者出生后获得 HSV 感染 患儿病死亡率 高达 50 4 HSV 2 还与子宫颈癌关系密切 3 HSV 感染的检测 病变处组织细胞涂片后 Wright Giemsa 染色镜检 如发现核内包 涵体及多核巨细胞可考虑 HSV 感染 用特异性抗体可检测病毒抗原 病毒分离培养是确诊 HSV 感染的 金 标准 HSV 引起的 CPE 常在 2 3d 后出现 细胞出现肿胀 变圆 折光 性增强和形成融合细胞等病变特征 二 水痘 带状疱疹病毒 1 水痘 带状疱疹病毒 varicella zoster virus VZV 的生物学性状类似于 HSV 只有 一个血清型 2 水痘 带状疱疹病毒在儿童初次感染后引起水痘 而潜伏体内的病毒复发后引起带 状疱疹 水痘是 VZV 的一种原发性感染 传染性强 病毒经呼吸道或接触传播 潜伏期 14 15d 皮疹首先出现在躯干 然后离心性播散到头部和四肢 表现为红色斑疹 丘疹 水疱及结痂 病情一般较轻 但在免疫功能不足或无免疫力的儿童中可表现严重 甚至危 及生命 儿童时期患过水痘 病毒可潜伏在脊髓后根神经节或者颅神经的感觉神经节等部 位 当机体受到某些刺激或免疫功能低下时 活化的病毒经感觉神经纤维轴索下行至皮肤 在其支配皮区繁殖而引起带状疱疹 一般在躯干 呈单侧性 水疱集中在单一感觉神经支 配区成带状 三 巨细胞病毒 1 巨细胞病毒 cytomegalovirus CMV 具有典型的疱疹病毒形态 对宿主或培养细 胞有高度的种属特异性 病毒在细胞培养中增殖缓慢 初次分离培养需 30 40d 才出现 CPE 其特点是细胞肿大变圆 核变大 核内出现周围绕有一轮 空晕 的大型包涵体 形 似 猫头鹰眼 状 2 人是人巨细胞病毒的唯一宿主 人类 CMV 感染非常普遍 并且其临床表现差异很 大 从无症状感染到致命性感染 初次感染多在 2 岁以下 大多呈隐性或潜伏感染 但在 一定条件下侵袭多个器官和系统可产生严重疾病 孕妇 CMV 原发或复发感染均可引起胎 儿先天性感染或围产期感染 导致胎儿畸形 智力低下或发育弛缓等 严重者可引起全身 性感染综合征 称巨细胞包涵体病 CMV 和其他疱疹病毒一样具有潜在的致癌作用 CMV DNA 很可能整合于宿主细胞 DNA 因而被认为在某种程度上与恶性肿瘤的发生有关 在某些肿瘤如宫颈癌 结肠癌 前列腺癌 Kaposis 肉瘤中 CMV DNA 检出率高 CMV 抗 体滴度亦高于正常人 3 病毒分离是诊断 CMV 感染的有效方法 人胚肺成纤维细胞对 CMV 敏感 但病毒 在培养细胞中生长很慢 需 1 2 周出现 CPE 一般需观察 28d 如有病变即可诊断 抗原 检测可用特异性抗体直接检测临床标本 外周血白细胞中测出 CMV 抗原表明有病毒血症 该法敏感 快速 特异 抗体检测可明确急性或活动性 CMV 感染 了解机体的免疫状况 及筛选献血员和器官移植供体 特异性 IgG 抗体需测双份血清以作临床诊断 同时了解人 群感染状况 IgM 抗体只需检测单份血清 用于活动性 CMV 感染的诊断 病毒核酸检测 包括核酸杂交和 PCR 四 EB 病毒 1 EB 病毒系疱疹病毒科嗜淋巴病毒属 其抗原分为 2 类 病毒潜伏感染时表达的 抗原 包括 EBV 核抗原 EB nuclear antigen EBNA 和潜伏感染膜蛋白 latent membrane protein LMP 这类抗原的存在表明有 EBV 基因组 病毒增殖性感染相关的抗原 包 括 EBV 早期抗原 early antigen EA 和晚期抗原 如 EBV 衣壳抗原 virual capsid antigen VCA 和 EBV 膜抗原 membrane antigen MA EA 是病毒增殖早期诱导的非结构蛋白 标 志着病毒增殖活跃和感染细胞进入溶解性周期 VCA 是病毒增殖后期合成的结构蛋白 MA 是病毒的中和性抗原 能诱导产生中和抗体 2 EB 病毒在人群中广泛感染 95 以上的成人存在该病毒的抗体 它主要通过唾液 传播 也可经输血传染 幼儿感染后多数无明显症状 或引起轻症咽炎和上呼吸道感染 青年期发生原发感染 约有 50 出现传染性单核细胞增多症 EB 病毒在口咽部上皮细胞 内增殖 然后感染 B 淋巴细胞 这些细胞大量进入血液循环而造成全身性感染 并且它可 长期潜伏在人体淋巴组织中 当机体免疫功能低下时 潜伏的病毒活化形成复发感染 由 EBV 感染引起或与 EBV 感染有关的疾病主要有三种 传染性单核细胞增多症 Burkitt 淋 巴瘤和鼻咽癌 人体感染 EBV 后能诱生 EBNA 抗体 EA 抗体 VCA 抗体及 MA 抗体 体液免疫能阻止外源性病毒感染 却不能消灭病毒的潜伏感染 3 病毒检测 1 病毒分离 采集唾液 咽漱液 外周血细胞和肿瘤组织等标本 接 种人脐带血淋巴细胞 根据转化淋巴细胞的效率确定病毒的量 2 病毒抗原及核酸检测 多采用免疫荧光法检测病毒特异性蛋白质抗原 利用核酸杂交和 PCR 或 RT PCR 可在病 变组织内检测病毒核酸和病毒基因转录产物 3 血清学诊断 用免疫荧光法或免疫酶法 检测病毒 VCA IgA 抗体或 EA IgA 抗体 滴度 1 5 1 10 或滴度持续上升者 对鼻咽癌有 辅助诊断意义 传染性单核细胞增多症患者血清中 VCA IgM 抗体阳性率较高 五 其它疱疹病毒 1 人疱疹病毒 6 型 human herpes virus 6 HHV 6 在人群中的感染十分普遍 60 90 的 儿童及成人血清中可查到 HHV 6 抗体 健康带毒者是主要的传染源 经唾液传播 HHV 6 的原发感染多见于 6 个月至 2 岁的婴儿 感染后多无症状 少数可引起幼儿丘疹或婴儿玫 瑰疹 免疫功能低下的病人 体内潜伏的 HHV 6 常可被激活而发展为持续的急性感染 病 原体检查可采集早期原发感染病儿的唾液和外周血淋巴细胞标本 接种经 PHA 激活的人脐 血或外周血淋巴细胞作 HHV 6 病毒分离 也可用原位杂交和 PCR 技术检测受感染细胞中 的病毒 DNA 间接免疫荧光法常用于测定病毒 IgM 和 IgG 类抗体 以确定是近期感染和 既往感染 2 人疱疹病毒 7 型 HHV 7 是一种普遍存在的人类疱疹病毒 75 健康人唾液可检出 此病毒 从婴儿急性 慢性疲劳综合征和肾移植患者的外周血单核细胞中也分离出 HHV 7 HHV 7 主要潜伏在外周血单个核细胞和唾液腺中