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文档简介
血清学实验原理及应用,血清学实验的建立及概念,1883年 俄国动物学家 发现白细胞吞噬作用1890年 德国医师、日本学者 发现白喉抗毒素1894年 比利时血清学家 发现补体1896年 H. Durham 发现凝集反应1897年 R. Kraus 发现沉淀反应1900年 K. Landsteiner 发现ABO血型1900年 J. Bordet 发现补体结合反应1900s 英国医师 发现调理素1945年 R.Owen 同卵双生的两只小牛的不同血型可以相互耐受1948年 C.Snell 发现组织相容性抗原1953年 R.Billingham 成功进行了人工耐受试验1956年 Witebsky 建立自身免疫动物模型1980s 发现众多细胞因子, 受体、基因及其生物活性研究,建立细胞免疫学说,免疫学(抗感染免疫),血清学实验,建立体液免疫学说,免疫学,免疫学(分子免疫学),抗原抗体结合反应,血清学反应的实质,在体内表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素等作用,有时亦可引起免疫病理损伤。在体外,由于参与反应的抗原物理性状以及反应条件的不同,可出现凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应。,血清学实验的基本原理,分子表面结合(非共价键结合)亲水胶体转化为疏水胶体,水化膜电荷,血清学反应的特点,特异性可逆性比例性反应的阶段性,特异性结合阶段,可见反应阶段,影响血清学反应的因素,抗原抗体本身的性质电解质酸碱度温度,血清学反应的优缺点,不需要特殊仪器设备,操作简便。灵敏度低,绝大多数为定性测定。,血清学试验的应用,传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病、变态反应性疾病的确诊 疫苗免疫效果监测 人群免疫水平监测生物活性物质的超微定量、物种及微生物鉴定和分型 基因分离,克隆筛选,表达产物的定性、定量分析和纯化等,已经成为现代分子生物学研究的重要手段,抗原抗体反应类型,抗原抗体反应类型,ELISA的基本原理,ELISA-enzyme-linked-immunosorbent assay 以酶作为标记指示物、以抗原抗体反应为基础的固相吸附测定方法。 固相支持物及包被的抗原或抗体、 酶标记的抗体或抗原、 酶反应底物。,ELISA原理示意图,ELISA测定常用模式,双抗体夹心法测抗原双抗原夹心法测抗体竞争法测抗原竞争法测抗体间接法测抗体固相捕获法,酶免疫试验的优点和局限性,优点特异性高灵敏性强操作简便试剂稳定对环境无污染,局限性影响及干扰试验因素多定性ELISA试验中cutoff值“灰区”样本的确定,血清学试验的发展趋向,反应的微量化和自动化 方法的标准化和试剂的商品化技术的敏感、特异和精密化检测技术的系列化方法简便快速,参考文献,刘辉主编.免疫学与免疫学检验(全国医学高等职业技
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