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厌氧性细菌需氧芽孢杆菌白喉杆菌结核分枝杆菌,第十次实验,1.掌握其他细菌（厌氧性细菌、需氧芽 孢杆菌、白喉杆菌、结核分枝杆菌） 的形态、培养特点。2.掌握白喉杆菌的奈瑟氏染色和结核杆 菌的抗酸染色方法。,实验目的与要求,实验内容,厌氧菌：破伤风杆菌、产气荚膜杆菌 1. 厌氧培养法 2.破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒梭菌的生物学特性需氧芽孢杆菌：炭疽杆菌和枯草杆菌的生 物学特性白喉杆菌：结核杆菌：,本次实验示教,产气荚膜“汹涌发酵”、破伤风庖肉培养管产气荚膜庖肉培养管动物实验：小鼠破伤风厌氧培养：焦性没食子酸法枯草普通平板，白喉亚碲酸钾血平板,本次实验操作,镜下观察：炭疽杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽杆菌串珠、肉毒梭菌。实验标本：病人痰液和白喉培养物各1支 实验操作：Neisser染色（白喉培养物） 抗酸染色（病人痰液）,小结,厌氧培养法,1.庖肉培养基厌氧培养法2.焦性没食子酸法3.气袋法4.厌氧罐法5.厌氧手套箱法,破伤风梭菌,1. 形态观察-示教,2. 培养物观察 -示教,破伤风梭菌 庖肉培养基,破伤风梭菌血琼脂平板,3. 破伤风外毒素毒性作用试验（示教）,原理：破伤风梭菌产生的外毒素封闭抑制性神经介质释放，伸肌、屈肌同时强烈收缩，导致骨骼肌痉挛。,产气荚膜梭菌,1.形态观察-示教片,2.培养物观察-示教,产气荚膜梭菌庖肉培养基,产气荚膜梭菌 血琼脂平板,“汹涌发酵”现象,产气荚膜梭菌能分解牛乳培养基中的乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，将培养基中隔绝氧气的凡士林冲向试管口，甚至冲开管口棉塞，此现象称“汹涌发酵”。,肉毒梭菌,形态观察-示教片,炭疽杆菌,炭疽杆菌串珠试验,炭疽杆菌（普通平板）,炭疽杆菌（血平板菌落）,枯草杆菌,枯草杆菌,枯草杆菌,白喉杆菌,白喉杆菌的奈瑟氏染色,取吕氏血清斜面上培养的白喉杆菌涂片,干燥,固定,奈瑟氏染液,第一液（美兰）,第二液,水冲洗,水冲洗,待干镜检,染7分钟,染1分钟,涂片,奈瑟氏染液,Neissser染色,Albert染色,菌落观察,白喉棒状杆菌 血平板,白喉亚碲酸钾血平板,Elek平板试验结果,Elek Test,沉淀线(阳性),含白喉抗毒素滤纸片,白喉杆菌菌苔,3,2,1,结核杆菌,结核杆菌的抗酸染色,痰涂片,干燥,固定,石炭酸复红加温染色5分钟,冷却,水冲洗,3%盐酸酒精脱色1分钟,水冲洗,碱性美蓝复染1分钟,待干镜检,水冲洗,庖肉培养基培养法,由于肉渣培养基含不饱和脂肪酸，氧化时能消耗溶解于培养液中的氧气，且组织中所含的还原性化合物为谷胱甘肽（含SH基）可使培养基的氧化还原电势下降，造成厌氧环境，故适于培养厌氧菌。,焦性没食子酸法（示教）,将厌氧菌接种血平板。用方形的消毒玻板一块，中央放焦性没食子酸0.2g，覆盖纱布或棉花一
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