染色体核型分析

细胞遗传学 染色体核型 分析细胞遗传学 染色体核型 分析 克隆性染色体异常是诊断恶性血液病的重要依据 许多特异性染色体畸变和特定的恶性血液病亚型 相联系 因而成为恶性血液病诊断分型的重要指标 诊断时的染色体核型对恶性血液病具有独立的预后 价值 对于治疗方案的选择具有指导意义 同时染色体畸变可作为监测白血病缓解 复发及突变的重要 参考指标 也为分子学研究提供了重要线索 比如 t 9 22 异常的急性淋巴细胞白血病 复杂染色体异常 的白血病预后很不好 应尽早进行异基因造血干细胞移植等 WHO 制定的恶性血液病分型系统中 将 染色体核型作为最重要的分型及诊断指标 发现重现性异常的染色体可提前作出 AML 的诊断 很多染 色体异常导致特异性的白血病融合基因 染色体分析除用于各类恶性血液病患者 如急 慢性白血病 MDS MPNs 淋巴瘤 多发性骨髓瘤 MM 患者外 还可用于儿童遗传性疾病 先天性畸形的染色体检 测 以及习惯性流产 不孕不育等疾病的诊断 但是染色体分裂相的制备和分析具有一定的难度 需要 时间长 因此导致临床染色体的诊断缺乏及时性 往往发报告时间需要一个月甚至更长的时间 染色体 核型分析需要细胞分裂才能完成 因此需要细胞具有良好的分裂活性 部分患者的细胞不分裂就不能观 察到可供分析的中期分裂相 正常染色体分裂相 核型排列后如图 3 和图 4 在一定程度上影响了患 者的确诊和治疗 此外染色体一般只能分析 20 30 个分裂相细胞 敏感性只有百分之一 当异常细胞比 例较低时 也难以发现异常的染色体 异常染色体核型的判断需要经验丰富的技术人员 尤其对一些复 杂染色体异常 或异常较小的染色体 往往难以正确判断 采用染色体全自动扫描暨自动核型分析系统 可以加快染色体检测和发报告速度 通过加用一些促细胞分裂的试剂可增加可供分析的核型 图 3 正常男性的染色体核型 图 4 正常女性核型 46 XX 不同血液恶性肿瘤常见的染色体异常见表 2 具体介绍如下 表表 2 白血病和淋巴瘤常见的染色体易位和融合基因白血病和淋巴瘤常见的染色体易位和融合基因 细胞类型 疾病 染色体异常 融合基因 髓细胞 AML M2 t 8 21 q22 q22 AML1 ETG8 ETO AML M2 M4 t 6 9 p23 q34 DEK CAN AML M3 t 15 17 q22 q11 22 PML RAR AML M4 inv 16 p13 q22 CBFb MYH11 AML t 6 11 q27 q23 MLL AF6 AML t 11 19 q23 p13 1 MLL ELL AML t 11 17 q23 q21 MLL AF17 AML t 10 11 p12 q23 MLL AF10 AML dupMLL 11q23 dupMLL AML t 16 21 p11 q22 TLS ERG AML t 9 11 p22 q23 MLL AF9 CML t 9 22 q34 q11 BCR ABL HES CEL Del4q FIP1L1 PDGFRa B 细胞 B 淋巴瘤 t 14 18 q32 q21 BCL 2 IgH Burkitt 淋巴瘤 t 8 14 q24 q32 MYC IgH T 细胞 T ALL t 8 14 q24 q11 MYC TCR T ALL t X 11 q13 q23 MLL AFX T ALL t 1 11 p32 q23 MLL AF1p T ALL t 11 19 q23 p13 3 MLL ENL T ALL TAL1D SIL TAL1 T ALL t 16 21 p11 q22 TLS ERG T ALL t 11 14 p15 q11 Rhom 1 TTG 1 TCR 1 伴有特异性遗传学异常的伴有特异性遗传学异常的 AML 在这一 AL 亚群中 WHO 确认了以下四种特征明确的遗传学异常 在原发性 AML 中此类异常占 30 这类 AML 有独特的临床表现 l t 8 21 q22 q22 和 或 AML1 ETO 基因的 AML 采用含大剂量阿糖胞苷的化疗方案治疗 临 床治愈率可达 50 被分类为低危险性 AML 如图 5 图 5 多发于急性粒细胞白血病 M2 型 46 XX t 8 21 q22 q22 l t 15 17 q22 q12 和 或 PML RAR 融合基因及其变异型的 APL 用全反式维甲酸及砷剂 疗效好 采用化疗 砷剂 全反式维甲酸联合方案治疗 临床治愈率可达 70 95 被分类为低危险性 AML 如图 6 图 6 急性早幼粒细胞白血病 46 XX t 15 17 q22 q12 l 染色体 inv 16 p13 q22 或 t 16 16 p13 q22 和 或 CBF MYH 融合基因的 AML 常伴有嗜酸细胞增加 采用含大剂量阿糖胞苷方案的化疗疗效好 临床治愈率可达 50 以上 被 分类为低危险性 AML 如图 7 图 7 急性粒细胞白血病 M4EO 型 46 XX inv 16 p13q22 l 伴有染色体 11q23 和 或 MLL 基因异常的 AML 预后较差 尤其是 MLL AF4 异常 被分类为高危 险性 AML 如图 8 图 8 多发于急性粒细胞白血病 M5 型 46 XY del 11q23 2 急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病 ALL 的染色体异常的染色体异常 B ALL 系列常见的染色体异常有系列常见的染色体异常有 t 14 11 q21 q23 见于 30 60 的新生儿和婴儿 ALL 临床上常有高白细胞计数和中枢神经系 统受累 预后不良 t 1 19 q23 p13 见于 5 6 的儿童 ALL 预后不良 图 9 图 9 急性 B 淋巴细胞白血病 46 XX t 1 19 q12 p13 t 9 22 q34 q11 见于 2 5 的儿童 ALL 和 15 30 的成人 ALL 化疗效果差 预后不良 t 12 21 p13 q22 见于 12 27 的儿童 ALL 为儿童 B 细胞 ALL 中最常见的畸变 CR 率高 复发少见 预后较好 T ALL 系列的染色体断裂点常涉及系列的染色体断裂点常涉及 T 细胞抗原受体细胞抗原受体 TCR 基因所在位点 有 基因所在位点 有 t 11 14 p13 q11 t 10 14 q24 q11 t 1 14 p32 q11 t 8 14 q24 q11 t 11 14 p15 q11 系列非特异性系列非特异性 ALL 6q 常见于 4 13 的儿童 ALL 成人 ALL 较少见 预后较好 9p 见于 7 12 的 ALL 预后不良 12p 见于 10 12 的 ALL 缺失或易位 预后较好 3 慢性粒细胞白血病慢性粒细胞白血病 CML 的染色体异常的染色体异常 根据 WHO 的建议 虽然根据临床表现 肝脾明显肿大的体征 血液粒细胞明显升高 骨髓以成熟粒 细胞增生为主的特征应考虑 CML 的诊断 但遗传学或基因检查确证是必需的 诊断 CML 必须有 t 9 22 q34 q11 如图 10 或其变异型染色体异常 和 或 BCR ABL 融合基因 如果仅有以上临床 血液 学及骨髓特征 只能诊断为不典型 CML 在 CML 加速期和急变期 20 的患者保持原核型不变 80 的患者可发生核型演变 即出现额外的染色体异常 常见的依次为 Ph 8 i 17q 19 21 因此 病程中定期的染色体检查 有助于早期诊断 CML 是否进入加速期或急变期 典型的 CML 患者对格列卫治疗的反应好 大部分患者可达到细胞遗传学及分子生物学的缓解 即 Ph 染色体和 BCR ABL 融合基因消失 图 10 慢性粒细胞白血病患者 46 XY t 9 22 q34 q11 4 慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病 CLL 的染色体异常的染色体异常 CLL 患者核型演变很少见 无核型异常者 预后较好 有核型异常者 均提示预后不良 12 号染色 体三体 12 最为常见 如图 10 其次为 3 号和 18 号染色体三体 在结构异常中 13q 和 14q 较 常见 图 11 慢性淋巴细胞白血病患者 46 XX 12 5 骨髓增生异常综合征骨髓增生异常综合征 MDS 的染色体异常的染色体异常 大约 40 70 的 MDS 有克隆性染色体改变 典型的异常为 8 5 del 5q 7 del 7q del 11q del 11p del 17p del 20q 如图 11 等等 5q31 CEP7 7q31 CEP8 20q CEPY P53 也是容易累及的区域 孤立的 5q 染色体异常的 MDS 具有独特的临床 治疗反应及预后特征 故单独分类 常有血小板增多 雷利度胺 lenolidomide 或强化疗治疗可以达到完全细胞遗传学缓解 图 11 骨髓增生异常综合征 46 XY del 20q 6 淋巴瘤的染色体异常淋巴瘤的染色体异常 淋巴瘤常涉及 t 14 18 q32 q21 t 8 14 t 11 14 t 11 18 等染色体易位 涉及与 IgH 基因相关的 易位 7 多发性骨髓瘤的染色体异常多发性骨髓瘤的染色体异常 13q 13 和 14q 是多发性骨髓瘤最常见的异常 结构上常发生下列易位 t 11 14 q13 q32 t 4 14 p16 q32 t 14 16 q32 q23 t 8 14 t 6 14 p25 q32 法国 MM 协作组报道 无 IgH 易位者 del 13q 发生率低 预后较好 而在 t 4 14 t 14 16 异常的患者 del 13q 发生率高 且 2 微 球蛋白增高 预后较差 标本送检方法和注意事项标本送检方法和注意事项 l 送检时间 周一至周五下午 4 00 前接受标本 本院提供含抗凝剂和细胞培养液的无菌标本瓶 l 标本要求 1 血液病均送骨髓血 除慢淋可送静脉血 2 先天性疾病可以送静脉血 肝素抗凝 3 淋巴瘤应送活检的淋巴结组织块 4 标本量的要求 正常白细胞数的 送 3 5ml 骨髓和或静脉血 白细胞数 50 0X109 L 时 送 2 3ml 骨髓和 或静脉血 按无