临床常用免疫学检测

临床常用免疫学检测,周有利武汉科技大学附属天佑医院,临床应用范围,临床应用感染性疾病免疫系统疾病变态反应性疾病肿瘤,检测项目血清免疫球蛋白检测肿瘤标志物检测自身抗体检测感染免疫检测,血清免疫球蛋白检测,Ag B cell plasma cell globulin, can combine with corresponding Ag immune functions,(antibody),血清免疫球蛋白检测,免疫球蛋白的存在形式,分泌型Ig（secreted Ig ，s Ig）主要存在于血液和组织液中，发挥各种免疫功能膜型Ig （membrane Ig，m Ig ）位于B细胞膜上，构成B细胞表面的抗原受体,血清免疫球蛋白检测,免疫球蛋白异常变化的临床意义,感染性疾病免疫增生性疾病免疫缺陷病,血清免疫球蛋白检测,一、免疫球蛋白G （immunoglobulin G, IgG） 一般特性： 血清中含量最高(70%80%Ig) 半衰期最长(21-23天) 是唯一能够通过胎盘的抗体,血清免疫球蛋白检测,IgG生物学活性： 通过胎盘（新生儿抗感染）； 激活补体 （裂解细胞）； 调理作用（促进吞噬）； 介导ADCC（细胞毒作用）。,IgG参考值：7.016.6g/L 临床意义： a. IgG增高： 慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、 自身免疫病（SLE）、多发性骨髓瘤等 b. IgG降低： 先天性和获得性免疫缺陷病，服用免疫抑制剂者,二、免疫球蛋白A （immunoglobulin A, IgA） 1. 两种类型：血清型 IgA和分泌型（SIgA） 血清型 IgA：占血清免疫球蛋白含量的 10%15。 SIgA：存在于分泌液中，如唾液、泪液、 初乳、鼻和支气管分泌液、胃肠液、尿液 、汗液等。是机体粘膜局部抗感染免疫的 主要抗体。故又称粘膜局部抗体。,二、免疫球蛋白A 参考值： 成人血清为 0.73.5g/L； SIgA唾液平均为0.3 g/L； 泪液3080mg /L； 初乳平均为5.06 g /L。,二、免疫球蛋白A 临床意义： 升高：IgA型多发性骨髓瘤,系统性红斑狼疮(SLE),类风湿性关节炎,肝硬化,某些感染性疾病,湿疹,血小板减少症,Wiskott-Aldrich综合征(湿疹血小板。 降低：非IgA型多发性骨髓瘤,重链病,轻链病, 原发性或继发性免疫缺陷病(放射线照射,使用免疫抑制剂), 自身免疫性疾病等。,三、免疫球蛋白M 1五聚体，分子量最大(900 kd),又称巨球蛋白； 2人类发育过程中最早合成的Ig； 3体液免疫应答最先产生的 Ig - 感染早期免疫； 4半衰期: 5天 - 血清中特异性IgM 水平增高提示有近期感染。 5. 不能通过胎盘脐带血或新生儿血清中IgM水平升 高表明胎儿有宫内感染； 参考值：成人血清为 0.52.6g/L,四、免疫球蛋白E 1. 血清中含量最低(占Ig的0.002%)； 2. 呼吸道和胃肠道浆细胞产生； 3. 介导 I 型超敏反应； 4. 过敏性疾病和某些寄生虫感染患者血清中特异性 IgE水平增高； 5. 参考值：成人血清为 0.10.9mg/L。,肿瘤标志物检测(tumor marker,TM)蛋白类TM：AFP、CEA、PSA糖脂TM：CA72-4、CA19-9、CA125、 CA15-3酶类TM：NSE,影像学诊断、内镜等 病理学诊断 生化诊断:肿瘤标志物,现代肿瘤诊断技术,肿瘤标志物(tumor marker,TM) 肿瘤细胞产生、释放或是机体对某种肿瘤细胞起反应而产生或升高的一类物质。 蛋白类、糖类和酶类 存在在血液、体液及组织中 可定量或定性检测到,AFP是一种在电场中泳动于-球蛋白区的单一多聚体肽链的糖蛋白，分子量约为70KD。胎儿期由卵黄囊、胎肝合成，出生后6月-2岁降致成人水平。肝细胞或生殖腺胚胎组织恶变时，细胞中合成AFP的基因又被激活。血中AFP明显升高。参考值：血清AFP25g/L,甲胎蛋白（alpha-fetoprotein ，AFP ）,原发性肝癌约70%阳性50%300g/L约10%阴性,卵巢癌畸胎瘤,睾丸癌,AFP临床意义,（1）原发性肝细胞癌：阳性率67.8%74.4%。约50%的患者AFP300g/L，但也有18%的病人AFP并不升高。（2）病毒性肝炎、肝硬化患者有不同程度的升高,但通常低于300g/L。,AFP临床意义,（3）生殖腺胚胎性肿瘤患者血清中AFP浓度可见升高，如睾丸癌，卵巢癌，畸胎瘤等。（4）妇女妊娠3个月后，血清AFP浓度开始升高，78个月时达到高峰，一般在400g/L以下，分娩后3周恢复正常。孕妇血清中AFP异常升高，应考虑胎儿神经管缺损畸形的可能性。,AFP临床意义,分子量为200KD的多糖蛋白复合物，45 为蛋白质。一般情况下，CEA是由胎儿胃肠道上皮组织、胰和肝细胞所合成。出生后含量极低。参考值：血清CEA5g/L,癌胚抗原(carcinoembryomic antigen ，CEA),肺癌,结/直肠癌,胃癌,乳癌,胰腺癌,临床意义,辅助诊断疗效观察预后判断复发观察,良性疾病：肠道憩室炎，直肠息肉、结肠炎、肝硬化、肝炎和肺部疾病也有不同程度的升高，但阳性率较低。生理变化：96% 97%的非吸烟者CEA2.5g/L，少数人5g/L,CEA临床意义,胃癌CA72-4,乳癌CA153,胰腺癌A19-9,卵巢癌CA125,糖脂类TM,小细胞肺癌的首选标记物，敏感性93%。神经母细胞瘤，精原细胞瘤，脑瘤，类癌瘤等。也存在于正常红细胞中，标本溶血会影响结果。,神经元特异性烯醇化酶 （neuron specific enolase,NSE,原发性肝癌AFP,小细胞肺癌NSE,结/直肠癌CEA,胃癌CA72-4,乳癌CA15-3,胰腺癌CA19-9,卵巢癌CA125,子宫内膜癌HCG,前列腺癌PSA,TM选用,肿瘤与肿瘤标记物的关系,相同的肿瘤可能检测出多种不同的肿瘤标记物；相同的肿瘤标记物可能出现在不同的肿瘤上,肿瘤标志物检查结果高于正常值 = 癌 ！,术后肿瘤标记物水平变化,自身抗体检测 类风湿因子(RF)测定 抗核抗体检测,类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)，,RA是一常见的以关节组织的慢性炎症性病变为主要表现的全身性自身免疫性疾病。关节表现关节外表现,1、全身表现：发热、乏力、体重下降2、皮下结节3、血管炎：皮疹、皮肤溃疡、巩膜炎等4、脏器受累：心脏、脾、肺、神经系统,RA的关节外表现,发 病 机 制,Ag,巨噬细胞,Th细胞活化,T细胞,B细胞,细胞因子：IL-1、 IL-6、TNF 继续分泌：IL-2、 IL-3、 IL-4 干扰素等,免疫球蛋白：RF、 其他的免疫球蛋白,关节的滑膜炎 血管炎,实验室及其他检查,血常规血沉(ESR)C反应蛋白(CRP)免疫复合物和补体类风湿因子(RF)关节滑液关节X线检查,类风湿因子(rheumatoid factor，RF),1. 命名：抗人或动物免疫球蛋白IgG分子 Fc片段的特异抗原决定簇的抗体 2. 生产部位：由外周血和滑膜液中的B淋巴 细胞产生 3. 生化学特点 分子量100万 ，沉降系数 为19S,RF阳性的临床意义,1. RA阳性率70%2. 其他自身免疫性疾病如SLE，SS等3. 某些感染，如肺结核，亚急性细菌性心内 膜炎4. 肝脏病，如慢性肝炎，肝硬化等5. 血液病，如多发性骨髓瘤等,抗核抗体检测（Anti-nuclear antibody， ANA）,广义：靶抗原为整个细胞成份 = 细胞核+细胞浆经典：细胞核成分自身抗体的总称，其中含有多 种自身抗体，因此又称其为抗核抗体谱。,ANA 概 念,核型： 均质型、斑点型、 膜型、 核仁型 、 着丝点型,均质型,膜 型,斑点型,核仁型,着丝点型,ENA,抗双链DNA抗体抗Sm抗体抗RNP抗体抗SSA 抗体抗SSB抗体抗SCL70抗体抗JO1抗体,可提取的核抗原抗体谱（ Extractable nucler antigen， ENA）抗体,ENA是可提取性核抗原的总称。抗ENA抗体是针对细胞核中可提取性核抗原的自身抗体，约有十余种,按照抗不同细胞核成分抗体来分类,DNA,抗单链DNA抗体（抗ss-DNA抗体）,抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体）,ENA,抗Sm抗体抗RNP抗体抗SSA 抗体抗SSB抗体抗SCL70抗体抗JO1抗体,RNA,抗核仁抗体,着丝点,抗着丝点抗体,免疫印迹技术测定风湿病多肽抗体谱临床意义,抗Sm抗体阳性： SLE 抗RNP抗体阳性： 混合性结缔组织病、SLE 抗SS-A抗体阳性： 多于干燥综合症、SLE 抗SS-B抗体阳性： 女性患者、干燥综合症、SLE 抗Scl-70抗体阳性： 进行性系统性硬化症 抗着丝点抗体阳性： 局限型进行性系统性硬化症 抗PM-1抗体阳性： 多发性肌炎、进行性系统性硬化症 抗JO-1抗体阳性： 多发性肌炎 抗核仁抗体阳性： 进行性系统性硬化症、类风关,感染免疫检测 抗链球菌溶血素O测定 伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定 C反应蛋白测定,抗链球菌溶血素O(anti-streptolysin “O”,抗O或ASO),抗O增高常见于活动性风湿热、风湿性关节炎、风湿性心肌炎、急性肾小球肾炎等疾病。 抗O值增高，提示近期有A群溶血性链球菌感染。,C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）,1930年Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现能在钙离子存在时与肺炎球菌细胞壁C多糖起沉淀反应而得名，是人类重要的急性期反应蛋白，急性期浓度可升高上千倍，循环中的CRP半衰期为19小时。,CRP的临床意义,CRP升高可见于 1组织损伤、感染、肿瘤、心肌梗塞及一系列急慢性炎症性疾病，