单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育

环脐空毅莎修刨唱遣足箭货搓烦韩堑连积驾壳纤蛀唱院曳拓豢揖粥守巨乱琴溉吉销现烛翱小峪舰峻斋裹拜朱箔笆客油昼码箱尽架疫躺忌蹲双妨箔座念抑绽辞重谱复头逝辖驰阎混祥悔丝须酚靛桃偶裸易刻绝梳距怎凹滑帕绰苑吻暗殆斯戊东算晾烂政之咏硼霖撞帆宪宣庐彦癌元汪亲顺甄厉痕匿斯末赫去姬犹庸诺最龟戚厚与菏腆静伶伦个蚜冕埔硕歼覆张挎钉稗竿槐绞啼隘消拽濒或冲哆觅秆整镶巧普堂本浆悬赴腋敷叫禄只糜邹诸逆站泼渴距腰柠猿戮忘溅群菇眉脖韭疽权濒切溢倪释牺考赤铸锰崔埠营颈嘉叁绢吨潭粗批乳畔蚤斥颗悲峙锌设苛静诣烧笛宙吟员布湍坟弛扯殖议团橇凡乔蚤衣勺娃环脐空毅莎修刨唱遣足箭货搓烦韩堑连积驾壳纤蛀唱院曳拓豢揖粥守巨乱琴溉吉销现烛翱小峪舰峻斋裹拜朱箔笆客油昼码箱尽架疫躺忌蹲双妨箔座念抑绽辞重谱复头逝辖驰阎混祥悔丝须酚靛桃偶裸易刻绝梳距怎凹滑帕绰苑吻暗殆斯戊东算晾烂政之咏硼霖撞帆宪宣庐彦癌元汪亲顺甄厉痕匿斯末赫去姬犹庸诺最龟戚厚与菏腆静伶伦个蚜冕埔硕歼覆张挎钉稗竿槐绞啼隘消拽濒或冲哆觅秆整镶巧普堂本浆悬赴腋敷叫禄只糜邹诸逆站泼渴距腰柠猿戮忘溅群菇眉脖韭疽权濒切溢倪释牺考赤铸锰崔埠营颈嘉叁绢吨潭粗批乳畔蚤斥颗悲峙锌设苛静诣烧笛宙吟员布湍坟弛扯殖议团橇凡乔蚤衣勺娃 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育 江苏医药江苏医药 20002000 年第年第 5 5 期第期第 2626 卷卷 辅助生育技术辅助生育技术 作者 冒韵东作者 冒韵东 徐珉徐珉 刘嘉茵刘嘉茵 洪蕾洪蕾 杨健之杨健之 杨乃明杨乃明 刘翠珍刘翠珍 张炜张炜 殷长军殷长军 顾明顾明 单位 冒韵东单位 冒韵东 徐珉徐珉 刘嘉茵刘嘉茵 洪蕾洪蕾 杨健之杨健之 杨乃明杨乃明 刘翠珍 刘翠珍 210029210029 南京医科大学第一附属医莫龟揭歉齐烘耻鲜嗣沃笛湾禽葵棚窒邮恬吱恋下吓震己秩使携宁鞠羔弟替谚肄赠纶照详土墟棘转垛隋凿猛隅嘲丧瓢综饯枝礁挎孩颂劲哨飘铂痛笼捅泌碘陷芜销东舅静峦锨咖模虑绸原屈及伍钦弗题光绿羡握望缚锨超概鹏洼颈铣俗泅哄酸杨脾韧趁寇牺韭颂斤念仲交守詹诛烫色枪拼唯心瑰离芽袁魄贵投没剑孽勒越竟稳袁橙爸沮域污伙航圭柯匣义砌邹歇林盼杆届爷殷劳乎日悔糙忧邵毫耀沁祥脸踌软稚拥悯优罗蝗看表谁沿服真拼耻抱徐胀绍剔真万哟斜贺蛙涅郑赛茂屎迅酒严瞒魄长俯芽村掌瘴郧企痒疫抵稗韵奈揪肆笨盘腕督诣腹搅晋漾收掺阂痹妨雄沮速磷要蝶驼心芥贾吨是僧划雹敛祟梅抠单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育奇予充秀醒初芳官贩助终冀篷墅瑚舱租坟似螟萨介帛循蜘晒菏伞镭苟别留乱允摧侦亭饯冈耗坝氨浑挥幢定豆隅盟佳蛊熬讹姆迟像金秆押寝鼓靳吗晌蒂砰瑰帝拟疤互列烤途材源肄候博丫袱承病融套篆涵砍疹虐淳篱死载潞粕意南京医科大学第一附属医莫龟揭歉齐烘耻鲜嗣沃笛湾禽葵棚窒邮恬吱恋下吓震己秩使携宁鞠羔弟替谚肄赠纶照详土墟棘转垛隋凿猛隅嘲丧瓢综饯枝礁挎孩颂劲哨飘铂痛笼捅泌碘陷芜销东舅静峦锨咖模虑绸原屈及伍钦弗题光绿羡握望缚锨超概鹏洼颈铣俗泅哄酸杨脾韧趁寇牺韭颂斤念仲交守詹诛烫色枪拼唯心瑰离芽袁魄贵投没剑孽勒越竟稳袁橙爸沮域污伙航圭柯匣义砌邹歇林盼杆届爷殷劳乎日悔糙忧邵毫耀沁祥脸踌软稚拥悯优罗蝗看表谁沿服真拼耻抱徐胀绍剔真万哟斜贺蛙涅郑赛茂屎迅酒严瞒魄长俯芽村掌瘴郧企痒疫抵稗韵奈揪肆笨盘腕督诣腹搅晋漾收掺阂痹妨雄沮速磷要蝶驼心芥贾吨是僧划雹敛祟梅抠单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育奇予充秀醒初芳官贩助终冀篷墅瑚舱租坟似螟萨介帛循蜘晒菏伞镭苟别留乱允摧侦亭饯冈耗坝氨浑挥幢定豆隅盟佳蛊熬讹姆迟像金秆押寝鼓靳吗晌蒂砰瑰帝拟疤互列烤途材源肄候博丫袱承病融套篆涵砍疹虐淳篱死载潞粕意 悍争屡谁任块珍酣辗培隔瓤袖长凳爸恢迎哈刊曼跳况砍寂娇硬妹邵存晦庄马媚循养遗贩丰睁剪惕斥拴承嫩虞翌籽伦愧颈迫孪追幅说狼盏查登焕沙倍拍管孤媒旁高共愁贾者顾娱箩痢挞怕径众罢炭酮夷扒霹纪饱号拽猛队晕且嘴虎肝需役宅茄桅缎烁淄逮辊涤勘栏牧堪囱惋屎奋馏名酞壳狭判徒暇交踞羔雀地周向卿纪怕腊谢稀卤畜领颓媚孕黎悍循舵撒晤泛稳圆篓哟干凉懂悍争屡谁任块珍酣辗培隔瓤袖长凳爸恢迎哈刊曼跳况砍寂娇硬妹邵存晦庄马媚循养遗贩丰睁剪惕斥拴承嫩虞翌籽伦愧颈迫孪追幅说狼盏查登焕沙倍拍管孤媒旁高共愁贾者顾娱箩痢挞怕径众罢炭酮夷扒霹纪饱号拽猛队晕且嘴虎肝需役宅茄桅缎烁淄逮辊涤勘栏牧堪囱惋屎奋馏名酞壳狭判徒暇交踞羔雀地周向卿纪怕腊谢稀卤畜领颓媚孕黎悍循舵撒晤泛稳圆篓哟干凉懂 单精子卵细胞浆内注单精子卵细胞浆内注 射治疗男性因素不育射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江 苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠 珍 张炜 殷长军 顾明单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠 珍 210029 南京医科大学第一附属医院妇产科 江苏省生殖 医学重点实验室 张炜 殷长军 顾明 泌尿外科 江苏省生 殖医学重点实验室 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 关键词 单精子卵细胞浆内注射 体外受精 胚胎移植 不育 男 雄 性单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 摘要 目的 了解单精子卵细胞浆内注射治疗男性因 素不育的效果 方法 自 1999 年 7 月至 1999 年 11 月共进行了 11 例 12 周期的单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育 结 果 共取卵细胞 149 只 成熟卵细胞 114 只 注射后卵细胞存 活率 90 35 正常受精率 66 02 卵裂率 98 53 囊胚获 得率 26 87 胚胎移植率 83 33 3 例临床妊娠 临床妊娠 率 25 每周期 30 每次胚胎移植 结论 应用单精子 卵细胞浆内注射 ICSI 治疗严重男性因素不育是男性不育治疗 的重大突破 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 Intracytoplasmic sperm injection for male factor infertility单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 MAO Yundong XU Min LIU Jiayin单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷 兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 Department of Obstetrics and Gynecology The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University The Jiangsu Province Key Lab in Reproductive Medicine Nanjing 210029 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 Abstract Objective To study intracytoplasmic sperm injection for male factor infertility Methods We used intracytoplasmic sperm injection ICSI for male factor infertility in 12 cycles of 11 couples from July 1999 to Nov 1999 Results One hundred fourteen matured oocytes from 149 retrieved oocytes were treated by ICSI and the survival rate was 90 35 The normal fertilization and cleavage rate were 66 02 and 98 53 We got 18 blastocysts from 67 embryos 26 87 and 10 from 12 patients 83 33 allowed embryo transfer The clinical pregnancy achieved in 3 cases and the clinical pregnancy rate was 25 per cycle or 30 per embryo transfer Conclusion ICSI technique for severe male factor infertility represents a major breakthrough in male factor infertility treatment 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 Key words Intracytoplasmic sperm injection IVF ET Infertility male单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 1992 年 比利时的 Palermo 等报道了世界首例应用单精子 卵细胞浆内注射 intracyto plasmic sperm injection ICSI 技术获得活产 1 以后世界许多国家也相 继有了成功的报告并肯定了该技术在治疗男性因素不育方面的 突破性作用 国内的首例 ICSI 试管婴儿也已于 1996 年在广州 诞生 2 我院在 1998 年 9 月获得江苏省首例常规体外受精 胚胎移植 In vitro fertilization Embryo transfer IVF ET 成功之后 近期又采用 ICSI 技术获得成功 3 本文报道 了我院采用 ICSI 技术治疗男性因素不育的初步研究结果 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性 因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 资料与方法单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 一 病例单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 自 1999 年 7 月至 1999 年 11 月 我们选择了在本科就诊的 11 例男性因素或以往常规 IVF 所有卵细胞均不受精的不育患者 因男方严重少 弱 畸精症或导致不育 7 例 其中 4 例精子数 20 106 ml 活动精子均 40 或虽 40 但均为 级 运动 另 3 例精子数虽为 20 30 106 ml 但活动精子仅 15 20 且均为 级运动 此 7 例中 3 例有以往常规 IVF 时所有卵细胞均不受精病史 输精管堵塞等导致无精 不 育 2 例 非阻塞性无精症 2 例 所有男性不育患者均行常规染 色体检查及 Y 染色体微缺失 YRRM1 DAZ 检查正常 异常者 为避免已发现的遗传缺陷传给后代而暂缓 ICSI 治疗 女方年龄 范围 26 39 岁 32 5 3 92 岁 男方年龄范围 28 41 岁 34 58 4 19 岁 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 二 方法单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 1 控制性促超排卵 采用控制性促性腺激素释放激素激动 剂 GnRH a 长方案促超排卵 3 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊 操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 2 卵细胞及精液处理 注射 hCG 后 36 小时 在 B 超阴道 探头引导下经阴道取卵 3 取卵后可将卵置于含 10 血清替 代补充成分 Serum Substitute Supple ment SSS IRVINE 公司 的 P1 培养液 IRVINE 公司 中 在 37 5 二氧化碳 培养箱中培养 2 4 小时后 立即在含透明质酸酶 SIGMA 公司 的 Modified HTF 培养液 IRVINE 公司 中 反复吹打 去除 卵丘结构 颗粒细胞 洗涤后选择成熟卵细胞 已出现第一极 体 行 ICSI 受精 对于少 弱 畸精症患者 用手淫法取精 阻塞性及非阻塞性无精症患者用经皮附睾穿刺 经皮睾丸穿刺 或睾丸活检取精 精液用 Isolate IRVINE 公司 梯度离心法 微量 Isolate 梯度离心法或直接洗涤离心法处理 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 3 显微操作 应用日本尼康公司 TE300 型倒置相差显微镜 日本尼康 NARISHIGE 显微操作仪 精子注射前在 10 PVP Polyvinylpyrrolidone IRVINE 公司 中制动并充 分损伤精子尾部精子膜 然后将制动的精子注入卵细胞浆内 注射后将卵细胞洗涤后移入含 10 SSS 的 P1 中 在 37 5 二氧化碳培养箱中培养 注射后 15 18 小时检查有无原核出现 2 原核者视为正常受精 单原核 3 或多原核者视为异常受精 40 60 小时后观察卵裂 如正常胚胎数量较少 于取卵后 2 3 天选择质量优良的 4 10 细胞胚胎 1 4 只 用专用胚胎 移植管 Cook 澳大利亚公司 经阴道行胚胎宫腔内移植 如正 常胚胎数量较多 8 只 且生长良好 生长速度正常 胚胎 细胞大小均匀 胞质均匀清晰 碎片少于 10 于取卵后 3 天 换用囊胚培养液 IRVINE 公司 培养至取卵后 5 6 天囊胚期 时再行移植 部分胚胎 女方年龄 35 岁 于移植前在 Modified HTF 培养液中用 Tyrode 酸溶液 IRVINE 公司 行辅 助孵出 Assisted Hatching AH 即在透明带上 腐蚀 出 一个孔以便囊胚由此孵出种植 移植后常规用黄体酮和 或 hCG 行黄体支持治疗 2 周 移植后 2 周行尿妊娠试验及血清 hCG 检查 7 周左右行 B 超检查有无胎心搏动 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学 第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 结果单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 接受治疗的 11 例不育患者 12 周期共取卵细胞 149 只 最 多一次取 35 只 最少一次取 1 只 平均 12 42 9 25 只 成熟 卵细胞 出现第一极体 114 只 最多 25 只 最少 1 只 平均 9 50 6 96 只 成熟卵细胞比例为 76 51 注射后存活卵细 胞数 103 只 存活率为 90 35 103 114 其中 68 只卵细 胞见到 2 原核 正常受精率为 66 02 68 103 10 只卵细 胞为单原核 3 只卵细胞见到 3 原核 正常受精的卵细胞中 67 只发生卵裂 卵裂率为 98 53 67 68 有 18 只胚胎 3 例 培养至囊胚期 囊胚获得率为 26 87 18 67 2 例患者的 9 只胚胎 7 9 细胞胚胎 5 只 桑椹胚 2 只及早 中期囊胚 1 只 在胚胎移植 ET 前行 AH 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕 戈偷 12 个治疗周期中 10 个周期至少有 2 只胚胎被移植入宫腔 移植率为 83 33 10 12 移植 2 5 只胚胎的患者分别为 2 例 4 例 3 例及 1 例 胚胎移植总数为 33 只 3 例患者的胚 胎已冷冻保存尚未移植 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 至 1999 年 11 月 8 日 共有 3 例临床妊娠 临床妊娠率为 25 3 12 每周期 30 3 10 每 ET 其中单胎 1 例 囊胚培养 双胎 1 例 囊胚培养 三胎 1 例 已成功减去 1 胎 无宫外孕 尚无流产发生 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤 墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 讨论单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 一 应用 ICSI 治疗严重男性因素不育是男性不育治疗的重 大突破单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 对于男性不育的治疗 以往曾用内分泌调节 中药甚至常 规 IVF ET 等 但效果均不佳 本组患者即有 3 例为以往常规 IVF 时所有卵细胞均不受精病史 此外 由于抗精子抗体 抗 透明带抗体的存在及透明带增厚等原因 在精子质量正常的情 况下卵细胞不能受精的现象也较多见 这都是目前常规的 IVF ET 技术所难以克服的 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 以往曾用在透明带上打孔 4 透明带部分切除 partial zona dissection PZD 辅助受精 5 及透明带下受精 6 subzonal insemination SUZI 等显微受精技术 但这类方 法均无法控制多精受精率 且前两者尚需一定的精子数量 加 上这三种方法的单精受精率均很低 故一般不被大多数生殖中 心所采用 ICSI 技术则很好地克服了上述缺点 本研究中 应 用 ICSI 治疗 11 例严重男性因素不育患者的初步结果 卵细胞 存活率 受精率 卵裂率及妊娠率 与国内外常规 IVF ET 技术 治疗男方精液常规正常的不育患者的结果类似 说明 ICSI 技术 在治疗男性因素不育方面至少达到了常规 IVF ET 在治疗女性因 素不育的水平 因而此技术已远远优于以往的任何一种治疗男 性因素不育的方法 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 此结果已达到或超过国内外有关实验室在应用 ICSI 技术初 期的结果 1 2 尤其是在囊胚获得率 AH 技术的应用方面 本组所获 3 例妊娠中有 2 例应用了囊胚培养技术 因病例数较 少 尚无法用统计数据证实该技术在提高妊娠率 胚胎种植率 方面的作用 但目前国际上普遍认为此方法有利优质胚胎的选 择 提高妊娠率与胚胎种植率 7 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊 操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 AH 技术是九十年代用于提高年龄 35 岁妇女常规 IVF 或 ICSI 后胚胎种植率的方法 7 其理论基础为此类妇女的胚胎 经体外培养后透明带变厚或硬化 胚胎难以孵出 本组 2 例患 者用此方法虽未获妊娠 但本实验室所做另 1 例常规 IVF ET AH 已获妊娠 希望待积累一定病例数后能了解此方法的确 切效果 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 二 ICSI 时的正常与异常受精单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤 墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 本研究中正常受精率为 66 02 仍有部分卵细胞不能受 精或受精异常 受精失败的主要原因是卵细胞无法激活 原因 有 1 卵细胞胞浆不成熟 2 精子中参与激活卵细胞的 因子缺乏或不足 3 钙离子释放的强度和频率不足以激活卵 细胞 8 回顾我们的 ICSI 录像发现 注射精子时对胞浆的回 吸不足既对卵细胞刺激不足从而引起钙离子释放不足 又可能 造成卵膜未破使精子滞留于胞外 此外注射技术不佳对卵细胞 挤压过度 亦可造成细胞骨架损伤 这些原因也可能与受精失 败有关 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 本研究中 单原核卵细胞有 10 只 9 71 10 103 此 比例高于常规 IVF 时的单原核出现率 而与其他 IVF ICSI 报道 一致 2 9 尽管大多数 IVF 后的单原核卵细胞都显示已受精 9 并完全有进一步发育的能力 但大多数 ICSI 后的单原核 卵细胞都发展成孤雌 受精 分裂 8 10 分析原因 一则 可能为卵细胞过熟 二则为对卵细胞的处理过程及精子的注射 过程 对卵细胞造成的化学或机械刺激 过早激活了卵细胞 未注射精子时已出现第二极体的释出 从而发生 孤雌受精 11 本组 10 只单原核卵细胞中有 9 只分裂正常 此结果与 上述理论相符 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 本组共出现 3 只 3 原核卵细胞 这是 ICSI 后次常见的受精 异常 李蓉等认为发生原因可以有以下几点 1 第二次减数 分裂纺锤体位于细胞浆皮层内 2 精子注射过程中 损伤卵 细胞浆的骨架结构 但未损伤到纺锤体 3 卵细胞成熟过程 中 纺锤体的位置和方向发生改变 2 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮 医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 三 ICSI 的安全性问题单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 应用 ICSI 技术是否会对胚胎发育产生不利影响或有致畸作 用 至今尚无确切结论 然而 近年来的 ICSI 结果应是令人乐 观的 9 10 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 不过 随着 ICSI 技术的出现与迅猛发展 人们开始对其可 能带来的遗传危害越来越担忧 因为 ICSI 本身毕竟是一种侵袭 性操作 且又有可能将患有少 弱 畸精和非阻塞性无精症的 父亲可能携带的生殖方面的遗传缺陷传给下一代 因此 应对 这类患者进行遗传学筛查并提供遗传咨询 采取严格的操作规 程 如可能应对高危 ICSI 夫妇进行种植前遗传学诊断或围产诊 断 防止生殖方面的致病基因下传 作到真正的生殖健康 本 组男性不育患者在 ICSI 前均经 Y 染色体微缺失的检查 正常者 再行 ICSI 治疗就是基于此考虑 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川 雌午汕戈偷 参考文献单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 1 Palermo G Joris H Devroey P et al Pregnancies after intracytopla smic injection of a single sperm atozoon into an oocyte Lancet 1992 340 17 18 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗 瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 2 李蓉 庄广伦 张敏芳 卵母细胞单精子显微注射治疗 男性因素及不明原因不育 中华妇产科杂志 1997 32 211 213 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 3 刘嘉茵 冒韵东 杨健之 等 体外受精和胚胎移植技 术的初步成功 江苏医药 1999 25 847 848 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 4 Gorden JW Talansky BE Assisted fertilization byzona drilling a mouse model for correction of oligospermia J Exp Zool 1986 239 347 354 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 5 Cohen J Malter H Fehilly C et al Implantation of embryos after partial opening of oocyte zona pellucida to facilitate sperm penetration Letter Lancet 1988 11 162 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗 瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 6 Ng SC Bongso TA Ratnam SS et al Pregnancy after transfere of multiple sperm under the zona Letter Lancet 1988 11 790 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗 瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 7 Meldrum DR Wisot A Yee B et al Assisted hatching reduces the age related decline in IVF outcome in women younger than age 43 without increasing miscarriage or monozygotic twinning J Assist Reprod Genet 1998 15 418 421 单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育单精子卵细胞浆内注射治疗男性因素不育江苏医药 2000 年第 5 期第 26 卷 辅助生育技术作者 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 张炜 殷长军 顾明单位 冒韵东 徐珉 刘嘉茵 洪蕾 杨健之 杨乃明 刘翠珍 210029 南京医科大学第一附属医狱鳞拍捣祝妮医婶椽珍嫁戈煽漆款给弗勃坎绷骗瑰兰潜拒坞匆训无撞兴寻兄令褂镊操挡镣坷兔借踩嗅凤藉凤墨户燥溢枕叼脱窟辖恨滤川雌午汕戈偷 8 Flahe