家兔有机磷酸酯类中毒及其解救

生理科学实验,第七课： 有机磷酸酯类中毒及其解救 红细胞渗透性和化学性溶血 实验,有机磷酸酯类中毒及其解救,实验目的,掌握有机磷酸酯类农药中毒 症状和中毒原理掌握解救药的选择、作用原理、 解救效果并结合临床应用,实验原理实验步骤注意事项实验后处理,乙酰胆碱中枢和外周神经系统的内源性神经递质易被胆碱酯酶水解释放部位： 神经突触和神经效应器接头部位作用： 激动M胆碱受体和N胆碱受体,基本原理,有机磷酸酯类胆碱酯酶 磷酰化胆碱酯酶 (难水解，无活性，易老化),有机磷酸酯类中毒原理及症状,乙酰胆碱积聚,M样、N样、中枢神经系统中毒症状,Ach,N-R,M-R,心脏活动的抑制 支气管平滑肌收缩 消化腺分泌增加 胃肠道泌尿道平滑肌收缩 汗腺分泌增加 瞳孔括约肌的收缩,骨骼肌收缩,CNS,先兴奋不安，继之惊厥、后而转为抑制，出现意识模糊昏迷等,有机磷,AchE,磷酰化AchE,呼 吸 困 难,口 吐 白 沫,大 汗 淋 漓,大 小 便 失 禁,针 尖 样 瞳 孔,骨骼肌纤维震颤 强 直 性 痉 挛,心率减慢、血压下降,阿托品,碘解磷定,磷酰化碘解 磷 定,抢救原则,阿托品碘解磷定,联合用药,阿托品化缓解症状,尽快复活胆碱酯酶,死亡原因,呼吸抑制 呼吸衰竭心血管功能衰竭,基本原理,阿托品 （M胆碱受体阻断药）缓解支气管痉挛减少腺体分泌改善呼吸状况解除部分中枢神经系统的中毒症状,碘解磷定 （胆碱酯酶复活药） 复活胆碱酯酶 讯速控制肌束颤动,实验步骤,1. 家兔称重, 观察: 正常活动、呼吸、瞳孔大小(注意光线条件一致)、 唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤2. 3.5%敌百虫3ml/kg制备有机磷中毒模型 观察: 瞳孔、唾液分泌、大小便、骨骼肌活动3. 解救，观察解除的症状 1、3、5组：先阿托品，10min后解磷定 2、4、6组：先解磷定，10min后阿托品,处理,乙兔,给药前给敌百虫后给阿托品后给解磷定后,甲兔,唾液,大小便,骨骼肌活动,瞳孔,表1 有机磷中毒及其抢救试验结果,给药前给敌百虫后给解磷定后给阿托品后,1. 测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔 大小的影响,实验前后光源要一致， 同一方向同一只眼。2.敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉 注射时要避免药物外漏。3.事先准备好抢救工作，中毒症状明 显后立即解救。,注意事项,实验后处理,结果：P123表9-8讨论：列两表 比较不同用药顺序解救效果差异结论：有效抢救需联合用药,红细胞渗透性和 化学性溶血实验,实验目的,1.掌握测定红细胞渗透脆性及引 起红细胞溶解的实验方法2.熟悉红细胞混悬液的制备方 法和溶血现象的判断,红细胞膜具一定伸展性和弹性，对低渗溶液具一定抵抗力 红细胞渗透脆性 红细胞于低渗溶液中破裂、解体特性渗透抵抗力表示方法：最小抵抗力（最大脆性）刚开始溶血最大抵抗力（最小脆性）刚完全溶血,基本原理,实验观察红细胞渗透性溶血：10管 红细胞混悬液处于低渗溶液中红细胞化学性溶血：4管 红细胞混悬液处于有机溶剂、 酸、碱中,制备红细胞悬液 取家兔动脉血2ml，离心5min, 1500r/ min 吸弃上清液，加生理盐水混匀离心洗涤2次 得洗涤后红细胞 用生理盐水配成30%和3%红细胞悬液 (兔红细胞比容0.4) 配30% （20.4） 0.3 = 2.7ml 配3%: 取30%的溶液稀释10倍,按表6-9滴入30%红细胞悬液2滴，轻轻摇匀 1 10 10支不同浓度NaCl溶液试管（低 高） 静置30分钟,渗透性溶血实验,溶血判断,完全溶血 管内液体完全红色透明部分溶血 上层红色透明 下层红色不透明(混浊)不溶血 上层浅黄色或无色透明 下层红色不透明,4支试管内各加入3%红细胞混悬液1ml分别加入下列溶液2ml/管，混匀 11号 0.9%NaCl 12号 氯仿 13号 0.1mol/L HCl 14号 0.1mol/L NaOH 静置30min后观察试管内颜色、透明度和溶血情况,化学性溶血实验,注意事项,向试管中滴加红细胞混悬液时要靠近液面，轻轻滴入，以免冲击力太大使红细胞破损，造成溶血假象。滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀，切勿剧烈震荡。静置一段时间后在光线明亮处观察。,实验后处理,结果： P102表6-10 和 P103表6-11讨论：各因素对红细胞膜的影响及原理结论：渗透性溶血 化学性溶血,预习氯丙嗪抗激怒(安定)实验药物半数有效量(ED50 )和 半数致死量(LD50)的测定,N样症状,神经节