病毒感染的检查方法和防治原则

病毒感染的检查方法和防治原则,第一节 病毒感染的检测方法,一、病毒分离培养与鉴定：,1.标本的采集与运送 (1)急性期标本； (2)根据感染性质取不同的标本； (3)标本置于转运液中； (4)冷藏快运。,2. 病毒的分离培养,动物接种,鸡胚培养,细胞培养,原代细胞培养,二倍体细胞株,传代细胞系,绒毛尿囊膜痘病毒特异性损伤,(1) 原代细胞培养 动物或人组织直接用蛋白酶消化所得的细胞经体外培养后可贴壁或悬浮生长； (2)二倍体细胞株 在体外连续培养5060代仍保持其二倍染色体数目的单型细胞。,为生产人用疫苗的首选细胞株。,(3) 传代细胞系 能在体外连续传代、来自癌细胞或发生自发转化、突变的原代细胞或二倍体细胞株。,3.病毒在细胞内增殖的检测与鉴定,(1)细胞病变效应：cytopathic effect，CPE 病毒感染宿主细胞后，细胞形态的变化，如细胞团缩、肿大、融合等。,Negri Body,*包涵体形成的观察,(2)红细胞吸附： 某些病毒感染的宿主细胞能吸附脊椎动物的红细胞而发生血吸现象。,(3)干扰现象：,(4)病毒蛋白、核酸的检测：,Fig HSV 荧光抗体法查抗原,4.病毒数量与感染性的测定,蚀斑测定 plaque forming unit/PFU,50%组织细胞感染量50% tissue culture infective doseTCID50,TCID(50% tissue culture infective dose):在半数细胞培养板孔或试管内引起细胞病变（CPE）的病毒量空斑试验：在细胞培养表面覆盖一层半固体物质使细胞病变形成空斑,二、检测病毒的基本组成,蛋白抗原,病毒核酸,PCR cycler,三、检测机体的体液免疫应答：,1、单份血清检测：,IgM,IgG,2、双份血清检测：,IgG,恢复期/早期 4:1,Fig Identification of specific IgM antibody by capture and ELISA.,第二节 病毒感染的防治原则,一、抗病毒治疗,1. 抗病毒药物或制剂 核苷类药物 阻抑子代病毒结构基因的合成与表达。 病毒蛋白酶的抑制剂 阻止大分子病毒蛋白的降解。 其他：IFN、TNF、IL-2、中草药等抑制病毒复制。 抗病毒基因治疗：asODN、asON、ribozyme 策略：作用于病毒复制周期的不同环节2.免疫制剂,吸附,拟受体制剂,拟配体制剂,中和抗体,穿入,金刚烷胺,脱壳,生物合成,装配、释放,核苷类似物,干扰素,反义技术等,Fig A) HIV attach to a CD4 receptor. B) A soluble synthetic version of the receptor can prevent attachment of the virus.,mRNA,Protein,二、 病毒感染的预防,传统疫苗 1.灭活疫苗 2.减毒活疫苗,Fig Edward Jenner vaccinating (inoculating) James Phipps with