有机实验报告

1/10有机实验报告糖、氨基酸和蛋白质的鉴定糖一、糖的鉴定糖类化合物：又称碳水化合物，是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称，一般由碳、氢与氧三种元素所组成。实验目的：进一步了解糖的化学性质；掌握鉴定糖的方法及其原理。?-萘酚试验作用生成紫色环。实验方法取3支试管，编号，分别加入mL%的各待测糖水溶液，滴入2滴Molish试剂，摇匀。把试管倾斜450，沿管壁慢慢加入约1mL浓硫酸，小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。硫酸在下层,试液在上层样品：葡萄糖、蔗糖及淀粉2/10解释:糖被浓硫酸脱水生成糠醛或糠醛衍生物，后者进一步与?-萘酚缩合生成紫红色物质，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫色环。Fehling试验实验原理Fehling试剂：含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热，生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀，Fehling试剂中需加入酒石酸钾钠，它与Cu2形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离子。操作方法取4支试管，编号，分别加入Fehling试剂I和II各。摇匀并置于水浴中微热后，分别加入5滴待测糖溶液，振荡后置于沸水浴中加热23min，取出冷却，观3/10察颜色变化及有无沉淀析出。Fehling试剂I：称取g硫酸铜溶于100mL蒸馏水中,得淡蓝色的Fehling试剂I。Fehling试剂II：将17g酒石酸钾钠溶于20mL热水中，然后加入20mL含5gNaOH的水溶液，稀释至100mL得无色透明的Fehling试剂II。样品：葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖解释:硫酸铜与碱溶液混合加热，生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。Benedict试验实验原理：Benedict试剂是Fehling试剂的改良。Benedict试剂利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂。Benedict试剂：取g柠檬酸钠和10g无水碳酸钠溶于80mL水中，再取g结晶的硫酸铜溶解在10mL水中，慢慢将此溶液加入上述溶液，用水稀释至1004/10mL得Benedict试剂。操作方法用Benedict试剂代替Fehling试剂重复以上实验，取4支试管，编号，分别加入Benedict试剂。摇匀并置于水浴中微热后，分别加入5滴待测糖溶液，振荡后置于沸水浴中加热23min，取出冷却，观察颜色变化及有无沉淀析出。样品：葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖解释:硫酸铜与碱溶液混合加热，生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。成脎试验实验原理:单糖与过量的苯肼作用生成糖脎，糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎，其晶形、熔点及生成速度大都不同，所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。由于成脎反应是发生在C1和C2上，不涉及糖分子的其他部分，所以葡萄塘、果糖都能生成相同的脎。但由于成脎的速度不同，仍然是可以区别的。操作方法在试管中加人1mL5%的样品溶液，再加入5/10mL10%的苯肼盐酸盐溶液和mL15%的乙酸钠溶液，在沸水浴中加热并振摇，记录并比较形成结晶所需要的时间。并在低倍显微镜下观察脎的结晶形状。样品:葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖注意:苯肼有较高毒性。取用时慎勿触及皮肤。若已发生皮肤沾染，先用稀醋酸洗，再用清水洗净。解释:单糖与过量的苯肼作用生成糖脎，糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎，其晶形、熔点及生成速度大都不同，所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。Tollens试验在洗净的试管中加入1mLTollens试剂，在加入mL5%糖溶液，在50oC水浴中温热，观察有无银镜生成。样品：葡萄糖，果糖，麦芽糖，蔗糖6/10解释:淀粉水解试验实验原理:淀粉是葡萄糖的高聚体，在餐饮业又称芡粉，通式是n。淀粉在酸的催化作用下，能发生水解；淀粉的水解过程：先生成分子量较小的糊精，糊精继续水解生成麦芽糖，最终水解产物是葡萄糖，其与Fehling试剂作用可发生显色反应。操作方法:在试管中加入3mL淀粉溶液,再加入mL20%稀硫酸，将试管放在沸水中加热5min，然后取出试管冷却后用10%NaOH溶液中和至中性。取2滴与Fehling试剂作用，观察有何现象发生？现象:产生砖红色沉淀解释：淀粉是葡萄糖的高聚体，淀粉在酸的催化作用下，能发生水解；淀粉的水解过程：先生成分子量较小的糊精，糊精继续水解生成麦芽糖，最终水解产物是葡萄糖，其与Fehling试剂作用可发生显色反应。二、氨基酸及蛋白质的鉴定氨基酸：含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称，是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。7/10蛋白质：是由氨基酸以酰胺键形成的复杂高分子化合物，是生物体的基本组成物质。实验目的：了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。掌握蛋白质和某些氨基酸的显色反应原理。学习几种常用鉴定蛋白质和氨基酸的方法。茚三酮反应实验原理?-氨基酸或含有游离氨基的蛋白质的水解产物与茚三酮水溶液共热，能生成蓝紫色化合物。这是?-氨基酸特有的反应，因此常用于?-氨基酸的定性或定量测定。操作方法取3支试管，编号后分别加入4滴%的甘氨酸、酪蛋白和蛋白质溶液，再加入2滴%的茚三酮-乙醇溶液，混合均匀后，将试管放在沸水浴中加热12min，观察并比较3支试管显色的先后次序。样品：甘氨酸、酪蛋白和蛋白质解释：双缩脲反应实验原理：尿素加热至180左右，生成双缩8/10脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。由于蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，因此也能发生此反应生成蓝色、紫色或红色的铜盐配合物。氨基酸因不含肽键，故除组氨酸外都不发生此反应。NH2CONHCONH2操作方法：取1支试管，加入10滴蛋白质溶液和15-20滴10%NaOH溶液，混合均匀后，再加入3-5滴5%硫酸铜溶液，边加边摇，观察有何现象。现象：变成蓝色溶液解释：尿素加热至180左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩9/10脲反应。由于蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，因此也能发生此反应生成蓝色、紫色或红色的铜盐配合物。黄色反应实验原理：几乎所有的蛋白质与浓硝酸作用产生黄色，黄色物质在碱性溶液中进一步形成橙红色。这是因为多数蛋白质分子都含有带苯环的氨基酸，产生黄色的硝化物。操作方法：，然后置于水浴中加热，沉淀变成黄色，冷却后，逐滴加入10%NaOH溶液至溶液呈碱性，观察颜色的变化。醋酸铅反应操作方法取一支试管，加1mL%醋酸铅溶液，再逐滴加入1%NaOH溶液，直到生成的沉淀溶解为止，摇动均匀。再加入5-10滴蛋白质溶液，混合均匀，在水浴上小心加热，待溶液变成棕黑色时，将试管取出冷却，再小心加入2mL浓盐酸。观察有何现象产生，并嗅其味，判断是什么物质。现象：产生大量白色，具有刺激性气味的气体10/10。该气体是硫化氢气体解释：蛋白质分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白质在强碱条件下，可分解形成硫化钠。硫化钠和醋酸铅反应生成