微生物和免疫学试验(六)七年制

微生物与免疫学试验 六 要求 讲解 肠道杆菌 霍乱弧菌 3种厌氧菌示教片 肠道杆菌 霍乱弧菌 3种厌氧菌示教平板 SS平板 肠道致病均和非致病均各一个 双糖铁培养基 大肠 痢疾 伤寒 变形 炭疽卷发样菌落 其它示教 小生化反应 大肠 痢疾 伤寒 变形 操作 肥达反应 注意标签贴试管上 不要贴到架子上 录像 肠道杆菌 操作 肥达反应 试管凝集反应 器材 试管6支 人 试管架1个 2人 吸管1支 人 标签1个 人已知 伤寒H抗原 O抗原 4人 组 甲型副伤寒H抗原乙型副伤寒H抗原待检 病人血清 1 10稀释 倍比稀释法123456生理盐水0 50 50 50 50 50 5血清0 5 吹打 0 50 50 50 50 5 弃 菌液0 5ml 管 从第61管加 振匀水浴43度 2h最终血清1 401 801 1601 3201 640对照稀释度凝集强弱效价 吸管桶 试管锅 标签贴在试管上 结果判断 以出现凝集的血清最高稀释倍数为该血清抗体效价O达到1 80 H达到1 160H甲 PA 或H乙 PB 达到1 80或以上有诊断意义结合当地流行病学史 病程和抗体消长的意义进行判断 肠道杆菌的鉴定 大肠杆菌 伤寒杆菌 变形杆菌 痢疾杆菌 SS培养基 胆盐枸橼酸盐煌绿乳糖蛋白胨中性红 抑制杂菌生长 被非致病菌分解产酸 被致病菌分解产碱 酸 红碱 黄 Shigella Salmonellamedium 菌落红色 乳糖发酵阳性 非致病菌菌落无色 乳糖发酵阴性 致病菌 双糖铁培养基 下层上层 葡萄糖半固体酚红乳糖硫酸亚铁 生化反应表 霍乱弧菌 炭疽杆菌 致病菌中最大的G 粗大杆菌 两端平切 排列呈竹节状 有荚膜 芽胞在有氧条件下形成 呈椭圆形 位于菌体中央 培养 30 35 在普通琼脂培养基上形成灰白色粗糙型菌落 边缘不整齐 在低倍镜下观察边缘呈卷发状 炭疽杆菌培养基 厌氧菌 1 破伤风 G 芽胞位于菌体顶端 大于菌体 使细菌呈鼓槌状 菌体细长 有周身鞭毛 厌氧血平板上的羽毛状菌落 庖肉培养基 成分牛肉浸液1000mL蛋白胨30g酵母膏5g磷酸二氢钠5g葡萄糖3g可溶性淀粉2g碎肉渣适量pH7 8制法1称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g 加蒸馏水1000mL和1mol L氢氧化钠溶液25mL 搅拌煮沸15min 充分冷却 除去表层脂肪 澄清 过滤 加水补足至1000mL 加入除碎肉渣外的各种成分 校正pH 2碎肉渣经水洗后晾至半干 分装15mm 150mm试管约2 3cm高 每管加入还原铁粉0 1 0 2g或铁屑少许 将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约1cm 上面覆盖溶化的凡士林或液体石蜡0 3 0 4cm 121 高压灭菌15min 庖肉培养基 破伤风梭菌培养基 破伤风痉挛 2 产气荚膜梭菌 两端几乎平切的G 粗大杆菌 芽胞位于次极端 呈椭圆形 不大于菌体 在体内有明显的荚膜 无鞭毛 生化反应 血琼脂平板上 双层溶血环 毒素 靶样溶血 血平板 双层溶血环 代谢活跃高层琼脂断裂试验庖肉培养基 分解肉渣中的糖类 产酸产气 肉渣淡红色牛乳培养基 可出现 汹涌发酵 stormyfermentation Nagler反应 卵黄琼脂平板