巴比妥类药物的分析(精)

第五章巴比妥类药物的分析 AnalysisofBarbitalsDrugs 巴比妥类药物是一类临床常用的催眠镇静药 由于这类药物应用广泛 容易因不合理使用而引起中毒 需要对本类药物的原料 制剂进行分析 有时也需要对生物样品中微量巴比妥类药物进行分析 本章重点介绍巴比妥类药物的化学结构与分析方法间的关系 介绍鉴别 检查和含量测定的原理与方法 一巴比妥类药物的结构剖析 巴比妥类药物的基本结构通式 多数为5 5 取代的巴比妥类药物 少数有1 5 5 取代的巴比妥类药物 还有5 5 取代的硫代巴比妥类药物 5 5 取代的巴比妥类药物 5 Barbital Phenylbarbital Secobarbital 5 5位是烯丙基和异丙基 5位通常是乙基 戊巴比妥 仲戊基 环己烯巴比妥 C C N C N H O O O H 3 C C H 3 1 5 5 取代的巴比妥类药物 己琐巴比妥 海索巴比妥 5 1 硫代巴比妥类药物 仲戊基 区别各种巴比妥类药物 环状丙二酰脲 1 3 二酰亚胺基团决定巴比妥类药物的特性 1 环状母核部分 2 取代基部分 二 巴比妥类药物的理化性质 Physicalandchemicalproperties 白色结晶或结晶性粉未 具有固定的熔点 游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水 易溶于乙醇及有机溶剂 其钠盐则易溶于水 而不溶于有机溶剂 六元环的结构比较稳定 酸 氧化剂 还原剂时不会破裂 碱共沸时则水解开环 化学性质 一 弱酸性巴比妥类药物分子结构中都有1 3 二酰亚胺基团 能发生酮式和烯醇式的互变异构 在水溶液中可以发生二级电离 因此 本类药物的水溶液显弱酸性 pKa为7 3 8 4 可与强碱形成水溶性的盐类 与强碱的成盐反应 主要是钠盐 二 水解反应 巴比妥类药物 N a O H N H 3 可使红色石蕊试纸变蓝 三 与重金属离子反应1与银盐的反应 碳酸钠的目的是为形成钠盐而溶解 一银盐是可溶性的 硝酸银应过量 1 5 5取代的药物只能形成一银盐 2与铜盐的反应 首先巴比妥在碱性的吡啶溶液中易形成更多的烯醇式异构体 吡啶与铜离子形成配位二价阳离子 与二位碳上的氧结合 成有色络合物 有色配位化合物 巴比妥类药物呈紫堇色 或生成紫色沉淀 含硫的成绿色 在pH较高的溶液中 5 5取代的亲酯性越强 生成的紫色物越容易溶于氯仿 可以此鉴别 3与钴盐的反应 反应条件 无水 所用试剂均应不含水分 碱性 异丙胺 与铜盐吡啶法有什么不同 4与汞盐的反应巴比妥类药物 汞盐 白色 可溶于氨试液 可用硝酸汞或氯化汞 P99 汞可以看作是碱 而二酰亚胺之氨基是具有酸性的 成沉淀的汞盐 四 与香草醛 vanillin 的反应 BP2000 英国药典 瓷盘中加戊巴比妥10mg 香草醛10mg 硫酸2ml 混合 水浴上加热 2min 产生棕红色 放冷 加乙醇5ml 先变紫后转蓝 P99香草醛 3 甲氧基 4 羟基苯甲醛 醛与羟基都十分活泼 特别是在苯环上 甲氧基由到了致活的作用 和水相比 乙醇是碱 因此生成烯醇式的异构体 五紫外吸收光谱特征 H2SO4溶液 0 05mol L pH9 9缓冲溶液NaOH溶液 0 1mol L pH13 巴比妥类药物的紫外吸收光谱 A nm 硫喷妥的紫外吸收光谱HCl溶液 0 1mol L NaOH溶液 0 1mol L 巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其电离的程度有关 5 5 取代的巴比妥类药物在pH 2的酸性溶液中 因不电离 几乎无明显的紫外吸收 在pH 10的碱性溶液中 发生一级电离 于240nm处有最大吸收 在pH 13的强碱性溶液中 发生二级电离 最大吸收红移至255nm处 硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中 均有较明显的紫外吸收 六 色谱行为特征TLC GC HPLCTLC 生物样品分析一般采用对照品 或标准品 比较法 要求供试品斑点的Rf值应与对照品斑点一致 取巴比妥类药物50ug 点于硅胶60F254薄层板 氯仿 丙酮 4 1 展开 温热空气干燥 先喷2 氯化汞乙醇液 再喷2 1 5 二苯卡巴腙 在紫色背景上显兰色斑点 GC 巴比妥的GC行为很好 七显微结晶药物本身的结晶 巴比妥 长方形 苯巴比妥 球形 花瓣状 反应产物的结晶 巴比妥 铜吡啶试液 十字形紫色结晶苯巴比妥 铜吡啶试液 细小不规则或似菱形的浅紫色结晶 三鉴别试验 Testofidentification 一 丙二酰脲类反应本品显丙二酰脲类的鉴别反应 为共有的反应 收载于药典附录中 取供试品约0 1g 加碳酸钠试液1ml与水10m1 振摇2min 滤过 滤液中逐滴加入硝酸银试液 即白色沉淀 振摇 沉淀即溶解 继续滴加过量的硝酸银试液 沉淀不再溶解 1 与银盐的反应 附录 一般鉴别试验 取供试品约50mg 加吡啶溶液 1 10 5m1 溶解后 加铜吡啶试液 硫酸铜4g 水90ml溶解后 加吡啶30m1 即得 1m1 即显紫色或生成紫色沉淀 2 与铜盐的反应 二 熔点测定及衍生物熔点测定1 熔点测定 巴比妥类的钠盐 酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点举例如下 思可巴比妥钠的鉴别ChP 2000 取本品约1g 加水100ml溶解后 加稀醋酸5ml 强力搅拌 再加水200ml 加热煮沸 溶解成澄清溶液 液面无油状物 放冷 静置 析出结晶 过滤 结晶在70 干燥 熔点约为97 苯巴比妥钠的鉴别ChP 2000 取本品约0 5g 加水5ml溶解后 加稍过量稀盐酸 即析出白色结晶性沉淀 滤过 沉淀用水洗净 在105 干燥后 依法测定 熔点为174 178 三 特殊取代基或元素的鉴别试验反应 1 与碘司可巴比妥钠ChP 2000 取本品0 1g 加水10ml溶解后 加碘试液2m1 所显棕黄色在5min内消失 也可使溴试剂退色 不饱和烃取代基的反应 2 含不饱和取代基的巴比妥类药物具有还原性 在碱性水溶液中与紫色高锰酸钾反应生成棕色二氧化锰 苯巴比妥ChP 2000 1 硝化反应 与硝酸钾硫酸共热 发生硝化 生成黄色硝基化合物 2 芳环取代基的反应 2 硫酸 亚硝酸钠反应 确切原理不清 可区别是否含有苯环 鉴别 取本品约10mg 加硫酸2滴与亚硝酸钠约5mg 混合 即显橙黄色 随即转橙红色 3 甲醛 硫酸反应 取本品约50mg 置试管中 加甲醛试液1ml 加热