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文档简介

荧光法测定维生素B2 一 实验目的 荧光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2学会使用荧光光度计 二 实验原理 维生素B2 又叫核黄素 VB2 是橘黄色无臭的针状结晶易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂在中性或酸性溶液中稳定光照易分解 对热稳定 基本性质 二 实验原理 基本性质 二 实验原理 在430 440nm蓝光的照射下 发出绿色荧光 荧光峰在535nm 维生素B2在pH 6 7的溶液中荧光强度最大 在pH 11的碱性溶液中荧光消失 荧光分光光度法 定量测定 三 实验试剂 仪器 荧光光度计5ml吸量管1只 2ml吸量管1只 50ml容量瓶6只 100ml容量瓶1只10 0 g ml维生素B2标准溶液 冰乙酸 多维葡萄糖粉试样 四 实验步骤 了解荧光光度计的基本操作 调节仪器到工作状态 设置激发波长为440nm 发射波长为540nm 灵敏度 2 入射缝宽和出射缝宽均为10nm 四 实验步骤 1 标准系列溶液的配制及标准溶液荧光强度的测定 标准液 0 50 1 00 1 50 2 00 2 50 3 00ml冰醋酸 2 00ml浓度 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6ug ml从稀到浓测量系列标准溶液的荧光强度 四 实验步骤 2 未知样的测定多维葡萄糖粉试样 1 3368g冰醋酸 2 00ml用测定标准系列时相同的条件 平行测量其荧光强度3次 五 实验数据处理 以维生素B2的浓度为横坐标 相对荧光强度为纵坐标 绘制标准
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