复方白芍保肝颗粒生产工艺研究-答辩稿

复方白芍保肝颗粒生产工艺研究,目 录,一、选题意义二、研究内容三、实验方法四、实验结论,一、选题意义,化学性肝损伤,是由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。这些化学物质包括酒精、环境中的化学毒物及某些药物。大自然和人类工业生产过程中均存在一些对肝脏有毒性的物质，可引起不同程度的肝细胞坏死、脂肪变形、肝硬化和肝癌。对治疗化学性肝损伤的药物研究很多,但多为单方药物。近些年对白芍、五味子、甘草、葛根、丹参五味药，在对抗化学性肝损伤方面的研究报道较多，经查证复方中药对化学性肝损伤在功效及安全性上优于单方中药。而目前我国保健品市场空前发展，因此复方白芍保肝颗粒的开发，有相当大的潜在市场。 考虑到复方白芍保肝颗粒的开发属厂家委托，原料白芍产地优势，因此配方以白芍为主药，其它四味药为辅药。,二、主要研究内容,实验主要通过正交实验研究提取工艺。选择生产效率高、能源资源节约的生产条件。,三、实验方法,3.1 生产流程图,醇沉、冷藏,料液比、提取时间、提取次数,至相对密度1.251.30g/cm3,回收乙醇,乙醇浓度、提取次数、料液比、提取时间,白芍300g、丹参150g,合并滤液,浓缩液,浸膏,五味子150g、葛根250g、甘草250g,合并滤液,醇沉后浸膏,600C烘干研磨粉碎,图3-1 提取工艺流程图,图3-2 制粒工艺流程图,3.2 工艺研究（1） 正交实验,本实验通过正交实验选择提取工艺最佳条件，正交实验得指标为各指标成分的收率及提取率。正交试验指标计算方法： 标志性成分收率= VoC （M2 M1 ）W 100% （ 3.1）； 提取率= M2 W 100% （3.2）； C测定的A值在回归方程中求出的目标成分浓度，g/ml； Vo样品提取液总体积，ml； M1取样品干膏量，g； M2总干膏重, g； W原药材重量，g；,（2）浸膏标志性成分检测,紫外分光光度法,薄层层析法,表3-1 浸膏中各指标志性成分处理,表3-2 标准曲线绘制方法,图3-3芍药苷标准曲线,图3-5葛根素标准曲线,图3-4五味子醇甲标准曲线,检测经处理后浸膏样品的吸光度值，带入以上各标志性成分的回归方程，即可得出浓度再按照公式（3.1）计算可得各指标成分收率。,（3）提取方法选择 白芍中主要标志性成分芍药苷；丹参中主要标志性成分丹参酮A、丹酚酸B，经查阅相关文献均采用醇提工艺。 五味子中主要标志性成分五味子醇甲；葛根中主要标志性成分葛根素；甘草中主要标志性成分为甘草苷，经查阅相关文献均采用水提工艺。 本实验通过正交试验选择最佳工艺条件。,（4）醇提最佳工艺研究,丹参、白芍进行混合醇提。影响醇提工艺的因素主要有：料液比、醇浓度、提取时间，提取次数四个因素。正交试验表如下。实验通过测定芍药苷收率、提取率并计算综合评分=芍药苷收率（%）0.7+提取率（%） 0.3,表3-3 醇提因素水平表,综合评分：芍药苷收率（%）0.7+提取率（%） 0.3,表3-4 正交实验结果,表3-5 醇提实验结果方差分析,根据方差分析结果：B、C、D因素各水平之间没有显著差异，A因素各水平之间存在显著差异，且四个因素对实验结果影响主次顺序ADBC.由于A3 A2 A1， B3B1B2，C2C3C1， D3D2D1，且B、C对结果影响不大，考虑经济、能源资源条件，因此最佳工艺应为A3B1C2D3，即：醇浓度75%，料液比1:4,提取3次，每次1h。实际生产中,原料研碎后冷浸1h效果更好。,(5)醇提实验结果验证,按处方量称取各药材，共份，按照所选提取条件进行实验，并测定芍药苷的收率、出膏率，计算综合评分，结果见下表。3次验证实验结果表明，检测指标接近或者高于正交表中最优值，说明优选的提取条件可行。,表3-6 结果验证表,综合评分：芍药苷收率（%）0.7+提取率（%） 0.3,（6）水提最佳工艺研究,对五味子，甘草，葛根采用水提法。分别称取五味子（150g）、甘草（250g）、葛根（250g），共九份进行正交实验。 影响提取效率的主要因素为料液比、提取次数、提取时间。利用 L9(34) 正交表进行试验。其因素水平安排见下表:,表3-7水提工艺因素水平表,表3-8 水提正交实验结果,表3-9水提结果分析五味子醇甲方差分析,表3-10 水提结果分析葛根素方差分析,根据五味子醇甲方差分析结果，B因素各水平之间存在显著差异，C各水平之间没有显著差异，A因素稍有明显差异，且各因素对结果影响先后顺序为BCA，又由于A3 A1 A2，B3B2B1，C2C3C1，因实际生产中从节约能源资源考虑，因A、C个水平影响不显著，故最佳工艺应为暂定为A1B3C2。根据葛根素收率方差分析结果，B因素个水平之间差异显著，A因素各水平之间无明显差异，各因素对结果影响先后顺序为BAC,且A3A1A2,B3B2B1,C2C3C1，因为C因素各水平间影响不显著故最佳工艺可定为A3B3C2。综合五味子醇甲收率与葛根素收率方差结果，最后选择最佳工艺为A3B3C2。即3次；每次1.5h；料液比1:6。,(7)水提实验结果验证,按处方量称取各药材，共份，按照所选提取条件进行实验，并测定葛根素、五味子醇甲的收率，计算综合评分，结果见下表。3次验证实验结果表明，检测指标接近或者高于正交表中最优值，说明优选的提取条件可行。,表3-6 结果验证表,(8) 醇沉工艺,影响醇沉的主要因素有相对密度和醇浓度。一般选择相对密度为 1.101. 20(70750C ), 醇沉时间一般为 1236 h, 通常 24 h即可较好沉淀分层, 故选择醇沉时间为 24 h。选择醇沉浓度为 50% 、60% 、70% , 以浸膏得率和芍药苷的含量为指标, 进行考核筛选。结果见表：,表3-11 醇沉工艺,综合评分=提取率（%） 0.3+五味子醇甲收率(%)+葛根素收率(%) 0.7,采用不同浓度乙醇沉淀时, 随着醇沉浓度的增大, 浸膏得率不同程度地减少, 有效成分芍药苷的含量有所变化, 参考综合评分结果，故选择70%乙醇效果最佳。,四、实验结论,通过测定最佳工艺所得浸膏中的功效成分，五味子醇甲收率：1.62%；葛根素收率：3.69%；芍药苷收率：2.52%。回收率均在70%以上。制粒工艺通过筛选，选择附形剂乙醇浓度85%，使麦芽糊精与白砂糖适量与浸膏烘干物混合均匀，制粒。,表 4-1 结 论,前景展望,我国保健食品市场近些年得到空前发展，产品功能性与安全性一直是大众最关心的两点，在保健食品27种功效声称里，对化学性肝损伤有辅助保护功能是一个重要的研究方向，并且近些年对有保肝功效的中药研究的文献及报道较多，复方白芍保肝颗粒属于保健食品，突破单方中药制剂在功能性等方面的不足。本实验通过研究其制作方法选择了效率高，资源能源节约的工艺流程