肝肾阴虚证大鼠下丘脑—垂体—甲状腺轴的变化及中药对其调节作用.docx

肝肾阴虚证大鼠下丘脑垂体甲状腺轴的变化及中药对其调节作用2001年l0月第8卷第10期中国中医药信息杂志21 肝肾阴虚证大鼠下丘脑一垂体一甲状腺轴 的变化及中药对其调节作用 樊蔚虹岳广欣任小巧卢跃卿唐柬 (河南中医学院郑州450008) 一目的:探讨肝肾阴虚证太鼠下丘脑一垂体一甲状腺轴的变化及中药对其调节作用方法:H激怒法制 遣大鼠肝肾阴虚模型.研究下丘脑一垂体一甲状腺轴(NPT)各项指标的变化结果:肝肾阴虚模型太鼠下丘脑TRH增 高,血清TSB,FT3.FT.水平均降低(,<0.05).而血清rT3浓度升高P<0.05):运用滋补肝肾方能够减轻这种激怒 应激反应,滋补肝肾方药组各指标与模型组比差异显着,<0.O5),与正常组比较无显着差异,而柴胡疏肝散无明显 作用结论:下丘脑一垂体一甲状腺轴的部分抑制是肝肾阴虚证形成的关键. 一肝肾阴虚征下丘脑一垂体一甲状腺轴 ChangeWhichaRatModelwithYin-diffiencyofLiverand KidneyInducedbySlowIrritationonHypothalamus-Pituitary-thalamuspituitarythypoidglandandregulatoryeffect ofherbs.M嘲:TostudychangeofvariousindexeswhicharatmodelwithYindiffiency ofliverandkidneywasmadebywayofslowirritation.Rl缸:IheTRH(thyrotropinreleasing hormone)ofsecretionfromhypothalamusincrease.FT(3,3,5-traiodothyronne),FT4(3,5,3,5一 tetraiodotbyr0nine)andTSHinblooddecreased(P<0.05),butrTinbloodincreased (<O.05).variousindexesofnourishing1iverandkidneyfangyaocontrolgroupcould improvedmoreeffectiwewithmodelgroup,butitcouldprovedmoreeffectivewithnormol, butchaihushugansancouldimprovedmoreeffectire.(耐_:ThekeytothequestionofYin diffiencyof1iverandkidneyiSapartofrestraininHPT. Ke,WYindiffiencyofliverandkidneyHPT 肝肾阴虚证是临床上常见的复台证型,对于其本质的研 究有诸多报道,但都只反映了这种状态的一个侧面,而从整体 上,本质上反映肝肾阴虚证内涵的研究则鲜有报道.肝肾阴 虚证临床见多汗,喜凉怕热,消瘦,颧红,烦躁不安,多梦, 肌肉震颤等症状,此与现代医学下丘脑一垂体一甲状腺轴功能 紊乱相关.故我们从下丘脑一垂体一甲状腺轴方面较全面探索 该证的本质. 1实验材料 1.1实验动物 健康sD太鼠.雄性,体重220g20g,共33只,河南医科 大学实验动物中心提供,饲养条件为室温2028,每天黑 暗12h,光照12h,普通饲料喂养 河南省教委自然科学基金项目(.98360003) 1.2药品 滋补肝肾方:生地黄,熟地黄,北沙参,当归,麦冬, 川楝子,丹参,生麦芽,山药,山萸肉,牡丹皮等;柴胡疏 肝散:柴胡,陈皮,香附,JI芎,枳壳,白芍,甘草.上药 均由河南省药材公司提供,滋补肝肾方常规煎煮3次,滤渣, 浓缩至2.Og/ml(含原药材).柴胡疏肝散经蒸馏,提取挥发 油后,浓缩至0.75g/ml(含原药材),兑入挥发油. 1.3主要试荆 游离3.3,5-三甲碘原氨酸(FT)试剂盒,游离甲碘原氨 酸VT)放射免疫试剂盒,3,3,5-三碘甲状腺原氨酸(rT)放 射免疫试剂盒,血清甲状腺(TSH)放射免疫试剂盒,促甲状 腺激素释放激素(TRH)放射免疫试剂盒,均由北京生物技术所 生产,批号9809. 2实验方法 22中国中医药信息杂志2001年10月第8卷第10期 2.1分组及造模 按随机数字法将大鼠分为空白对照组(8只),肝肾阴虚 模型组(9只),滋补肝肾方治疗组(8只)柴胡疏肝散治疗组 (8只).除空白对照组外.余组大鼠均双后肢束缚固定于盖 网上,每2只一笼以引起明显激怒,表现为粗叫,扭打和嘶 咬,每日1次,首次维持应激20mi】1以后隔日增加lOmin.共 20d.对照组除不固定后肢外,余处理同其他组 2.2给药方法 按人和大鼠体表面积系数换算方法计算,滋补肝肾方治 疗组从造模第1天起以20g/(kg?d)剂量灌服滋补肝肾方浓 缩液,柴胡疏肝散治疗组以75g/(kg?d)剂量灌服柴胡疏肝 散,空白对照组和肝肾阴虚模型组灌服生理盐水剂量为 1Ore/【kg?d),共20d. 2.3取材与样表制备 断给予铃声刺淝Omin每0mi】1做为新异刺激为避免时差, 把各蛆动物配组处死断头取血.粟血分2管,一管中预先 加入TP,H抗灭活剂5OuL故入冰水浴中,粟血12m1后,摇动. 迅速放回冰水浴中.15min内低温离心取上清液,故一40”(2冰 箱保存.待测TP,H.另一管取血34m,低温下退缩后离心. 取血清,低温冰箱保存,待测TSH,FT3,FT,rT大鼠处 死后迅速打开颅脑,分离出垂体和大脑.置沸腾的生理盐水 中烧5rain,用小打孔器在大脑腹侧视交叉后,打孔取组织柱 23咖【即下丘脑),称重后加入ItC1mo/L2M,匀浆lmin, 以NaOIt1mo/L2m中和.离心后取上清液置一40C冰箱保存. 待测下丘脑TRH;将垂体去除后叶后称重,加入lmol/L tellm,匀浆lmin,以ltaol/LNaOHlm中和,离心后,取上 清波置一40冰箱保存,待测垂体TSI. 3结果(见表1) 于第21,22d9:0011:O0将动物处死,处死前2h问4讨论 表1长期激怒大鼠FT3FT,rTa,TSH,IRH的变化及滋补肝肾方对其影响(sn=8/9) 注:与空白组比较,P<O05,P(0O1;与模型组比较.尸<005 普遍认为在应激状态下,各种刺激通过传入神经通路进 入大脑皮层边缘系统再通过下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴使 肾上腺皮质激素分泌增加,儿茶酚胺,皮质酮水平升高并抑 制生长和生殖轴,以适应机体需要.最近资料表明,急性脑血 管疾病应激状态下,血清T3,FT,TSI均下降.T,FT无显 着变化,.有实验证明,束缚应激状态下,大鼠血浆中T, L明显下降,注入TRH后血浆中L,T浓度恢复正常本 实验结果显示长期激怒状态下血清FTFT,TSH均下降,rT 升高,与以上报道相似,本研究还显示肝细胞核T3RBmax增高 (另文发表),表明应激状态下存在着HPT轴的紊乱.提示各 种环境,心理应激不仅影响下丘脑肾上腺系统(tIPA),而且也 影响到了tIPT系统现代研究表明.肾上腺功能与中医学之 肾脏的某些功能十分相似,应用糖皮质激素塑造肾虚模型的 成功及临床应用糖皮质激素所出现阴虚内热的副反应也说明 了这一点另外,情绪心理应激从中医脏象理论分析,当主要 责之于肝,肝主疏泄最主要的生理作用之一是和情绪调节相 关_5;肝脏亦通过影响甲状腙激素的运转,储备,代谢而调 节着循环血中甲状腙激素水平,显示肝脏在影响甲状腺内分 泌中占重要地位,.应激状态下HPT,HPA两个系统同时 受累,这也许就是肝肾同源的本质所在. 奉实验中,在长期激怒应激状态下,低水平FT,FL与 低水平TSH同时存在.而下丘脑TRH含量却升高,在运用滋补 肝肾药后,大鼠皮毛光泽,活动能力增强.FT,FL,TSH恢复 正常或接近正常,说明滋补肝肾方对该轴的功能紊乱有调整 作用.亦说明此轴功能紊乱可能是肝肾阴虚证本质之一.然 TRH变化不明显,可能为激怒应激原长期存在,仍对TRH释放 起抑制作用有关.从中医学角度看情志以脏腑气血为物质 基础,激怒刺激则主要伤及”肝血”,一方面使肝脏有形之质 耗伤,进而影响甲状腺激素的代谢;另一方面疏泄失常,导致 精神情志的改变,通过神经内分泌系统.进一步影响HFT系统, 说明tIPT轴紊乱是肝肾阴虚证的关键所在实验中低水平 FT.,FT未刺激TSH升高,亦可能与下丘脑,垂体T受体(T,R) 数量增多,亲合力增高,而II型5脱碘酶活性下降有关 故激怒模型组大鼠呈现出HPT轴受抑翩的现象. 奉实验显示长期激怒状态下,血清FL,FT水平降低. 与推测的结果相反,可能是由于机体细胞核TR数目增加,亲 和力提高使L效应加强的结果,故表现出一种虚性亢奋状 态,其中机理有待进一步研究. 参考文献 1张新民.沈自尹,土立健.等补肾对神经内分泌者化调节作用研究 (I中医杂志.1991.37(11):43 2刘俊艳.赵淑蓉.王汝圭,等.急性脑血管病患者下丘脑一垂体一甲状腺 轴的功能改变中华神经精神科杂志,1993.26(1):31 3彭康乌龙丹治疗脑梗塞及对下丘脑一垂体一甲状腺轴的影响中国 中西医结台杂志.1998.18(3):135 2001年l0月第8卷第10期中国中医药信息杂志23 乙肝号对小鼠免疫性慢性肝损伤 的抗自由基损伤作用 钱涯邻孙沛毅孙云 (江苏省苏北人民医院扬州225001) 一目的:研究乙肝II号对免疫性肝损伤小鼠抗自由基的作用及其机理方法:取异种动物的肝提取物 作为抗原免疫纯系小鼠产生抗肝抗体,形成慢性实验性免疫性肝损伤,观察小鼠血清丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧 化酶(SOD)及谷胱甘肤过氧化物醇(GSHPX)活力的变化取及乙肝号对MDA,SOD和GSB-PX变化的影响结果: 乙肝II号组与模型纽相比,小鼠血清MDA含量下降,SOD活力上升,GSHPX活力上升,变化的程度与用药量呈量效关 系,且抗自由基作用优于阳性对照乙肝宁颗粒荆组.结论:乙肝II号对免疫性肝损伤d,鼠具有抗自由基损伤的作 用 一免疫性肝损伤乙肝号谷胱甘肤过氧化物醇丙二醛超氧化物歧化酶 AntioxidationofPrescription.forAnti-hepatitisB inExperimentalMicewithChronicInununo-HepaticInjury QiaaYalinSunPeiyiSunYun (JiangsuProvinceSubeiospftalYangzhou22500ij /tract0MedlTe:Prescription.I1foranti-hepatitisB(PIIAffB),wasstudiedforits antioxidationinimmonohepaticinjury.Method:Thechronichepaticinjurywasinduced byinjectionwithantigenfrom1iverextractionofheterogenousanima1.Thebloodsamples weretakenandmeasuredforthelevelofmalonyldialdgestedthatthe therapeuticalactionofPIIA船onhepatitisBbeasSOCiatedwithitsantioxidation Wor山hepaticinjuryPrescriptionWIforantihepatitisB;glutathioneperoxidase: malonyldiadehyde;superoxidedismuase 本实验采用zl肝II号防治由异种动物肝提取物作为抗原 免疫纯系小鼠产生抗肝抗体发生慢性实验性肝损伤,同时探 讨自由基和脂质过氧化反应在慢性敏感损害与肝疾病发生发 展过程中的变化,以及zl肝II号对慢性肝损害过程中脂质过 氧化改变的影响,并与国家保护中药zl肝宁颗粒剂(长沙九芝 江苏省科委指导性课题(B$96355) 扬州大学医药研究中心 堂制药厂生产)进行比较,以寻求针对性治疗zl肝病人的有效 药物 1实验材料 1.1药品与试荆 弗氏完全佐剂:液体石蜡55ml,无水羊毛脂1.5ml,100 ml/ml的卡舟苗0.375ml(卫生部上海生物制品研究所提供, 批号99111)研磨成乳剂:肝提取物:以sD大鼠(扬州大 学医学院动物中心)断头处死,用生理盐水从门静脉冲洗肝 4刘振秀.王秀荣.促甲状腺激素释放激素对抗大鼠束缚应