重金属检查法操作规程.doc

重金属检查法操作规程文件编号XPS02R.00010共6页第1页文件名称重金属检查法操作规程编 写 人王水霞审 核 人批 准 人编写日期201111 8审核日期20111118批准日期20111128颁发部门GMP认证办公室执行部门质检中心取代颁发日期20111128生效日期2011121分发部门：质量保证部、质检中心一、 目 的:建立一个重金属检查操作规程。二、 适用范围:适用于褪黑素原料药品及工艺用水重金属限度检查。三、 责 任 者:质检中心全体人员四、 正 文:1. 原理重金属杂质是指在药典规定的实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作 用显色的金属杂质，与一定量的标准铅溶液在同样操作条件下所显颜色比较，检查供试品中重金属限量。 H pb2s2- pbs2. 仪器与用具2.1比色管50ml应注意选择各管之间的平行性，玻璃色泽一致，内径、刻度线高度一致，比色管洗涤时避免划伤内壁。 2.2过滤器 2.3移液管1ml、2ml、5ml 2.4容量瓶1000ml、100ml 3.试液与试药 重金属检查法操作规程文件名称重金属检查法操作规程共6页颁发部门GMP认证办公室编号XPS02R.00010第2页3.1标准铅溶液的制备称取硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得每1ml相当于10ug的pb。3.2硫代乙酰胺试液取硫代乙酰胺4g,加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液由1molL氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml组成5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。3.3醋酸盐缓冲液PH3.5取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7molL,盐酸溶液38ml,用2 molL盐酸溶液或5molL氨溶液准确调节PH值至3.5电位法指示，用水稀释至100ml,即得。3.4盐酸或稀盐酸3.5氨试液取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml即得。3.6硝酸4.操作方法本公司主要使用下列两种方法。4.1第一法4.1.1除另有规定外，取50ml比色管两支，编号为甲、乙。4.1.2甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液PH3.52ml后，加水或各药品项下规定的溶剂稀释成25ml;4.1.3乙管中加入各药品项下规定的方法制成的供试液25ml；4.1.4若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管一致；4.1.5再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺溶液各2ml，摇匀，放置2分钟， 重金属检查法操作规程文件名称重金属检查法操作规程共6页颁发部门GMP认证办公室编号XPS02R.00010第3页同置白纸上，自上而下透视，乙管中显出得颜色与甲管比较，不得更深。4.1.6如在甲管中滴加稀焦糖溶液不能使颜色一致时，可取该药品项下规定的二倍量的供试品溶液，加水或加该药品项下规定的溶剂使成30ml，将溶液分成甲乙二等分，乙管中加水或该药品项下规定的溶剂稀释成25ml；甲管中加入硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，经滤膜孔径3um滤过，然后甲管中加入标准铅溶液一定量。加水或该药品项下规定的溶剂成25ml；再分别在乙管中加硫代乙酰胺溶液2ml，甲管中加水2ml，照上述方法比较，即得。4.1.7供试品如含高铁盐，影响重金属检查时，可取该药品项下规定方法制成的供试液，加抗坏血酸0.51.0g,并在对照液中加入相同量的抗坏血酸，再照上述方法比较，即得。4.1.8配成供试品溶液时，如使用的盐酸超过1.0ml或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸，氨试液超过2ml，或加入其他试剂进行处理者，除有规定外，对照液中应取同样同量的试剂置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液PH3.52ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再加水稀释成25ml.4.2第二法4.2.1除另有规定外，取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml,蒸干，至氧化氮蒸气除尽后或取供试品一定量；缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml，使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5 ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500600炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液PH3.52ml，微热透明后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml；4.2.2取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液PH3.52ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再加水稀释成25 ml； 重金属检查法操作规程文件名称重金属检查法操作规程共6页颁发部门GMP认证办公室编号XPS02R.00010第4页 4.2.3按4.1.5方法检查，即得。 5.计录与计算 5.1记录必须记录所采用的方法，样品称重量，标准铅溶液取用量，操作过程中使用的试剂、试液名称和用量或对检查结果有影响的试剂用量，实验过程中出现的现象及结果等。5.2计算5.2.1标准铅溶液浓度计算1mol的硝酸铅pbNO32的质量为331.2g，含铅pb207.2g;称取硝酸铅0.1598g配成1000ml储备液，含pb量为： 207.20.15981000 0.1mgml 331.21000贮备液依法稀释十倍后所得标准铅溶液的浓度为每1ml含10ub的pb。5.2.2重金属限量计算进行检查时，如取供试品1.0g,与标准铅溶液2.0ml制成的对照液比较，计算重金属限量。 标准铅溶液体积ml标准铅溶液浓度gml重金属限量 100 供试品量g 重金属检查法操作规程文件名称重金属检查法操作规程共6页颁发部门GMP认证办公室编号XPS02R.00010第5页 2.00.000010 100 1.0 0.0020 百万分之二十5.2.3标准铅溶液取样量计算根据取供试品量及限量计算，如取供试品2.0g,依法检查，规定含重金属不得过百万分之五，应取标准铅溶液10ugPbml多少毫升？ 重金属限量供试品重gV 标准铅溶液浓度 0.0000052.0V 0.000010V1.0ml6.结果判定第一、二法，甲管与乙管比较，乙管所呈颜色浅于甲管，判为符合规定；反之则判为不符合规定。7.注意事项7.1重金属硫代物生成的最佳PH值是3.03.5，选用醋酸盐缓冲溶液PH3.52ml调节PH效果较好。7.2由于在药品生产过程中遇到铅的机会较多，且铅易积蓄中毒，故以铅作为重金属的代表，用硝酸铅配制标准铅溶液。7.3配制标准铅贮备液时，加入硝酸可防止铅水解