pRb蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及其临床病理意义.doc

pRb蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及其临床病理意义【关键词】 pRb蛋白【摘要】 目的 探讨pRb蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及其临床意义。 方法 应用免疫组化方法检测32例子宫内膜腺癌、15例非典型增生子宫内膜和10例正常子宫内膜中pRb蛋白的表达。 结果 pRb蛋白在正常子宫内膜、非典型增生子宫内膜和子宫内膜腺癌组织中的阳性表达率分别为100%、93.3%和84.4%，它们之间差异无显著性（P0.05）。pRb蛋白在子宫内膜腺癌中的阳性表达仅与肿瘤的临床分期密切相关（P0.05）。 结论 Rb基因在子宫内膜腺癌中的改变可能是不常见的，在子宫内膜腺癌的发生发展过程中可能是一个晚期事件。关键词 子宫内膜肿瘤 免疫组织化学Expression of pRb protein in endometrial adenocarcinoma and itsclinical pathological significance Tian Deming，Huang Wenbin，Zhang YiqingDepartment of Obstetrics and Gynecology，Wuhu Municipal First Peoples Hospital，Wuhu241000.【Abstract】 Objective To study the expression of pRb protein in endometrial adenocarcinoma and its clinical pathological significance.Methods Expression of pRb protein was detected by immunohistochemical technique in10cases of normal endometrium，15cases of atypical endometrium and32cases of endometrial adenocarcinoma.Results The positive expression rates of pRb protein in normal endometrium，atypical endometrium and endometrial adeno-carcinoma were100%，93.3%and84.4%respectively，there were no significant differences among them（P0.05）.The positive rate of pRb in endometrial adenocarcinoma was correlated with clinical stage（P0.05）.Conclusion Alteration of pRb protein expression may be uncommon in endometrial adenocarcinoma，it may represent a late event in carcinogen-esis.Key words endometrial neoplasm immunohistochemistry子宫内膜癌是女性生殖系统一种常见的恶性肿瘤，其发生机制目前尚不清楚。近年来研究表明，细胞周期调控基因中的Rb基因的改变在子宫内膜腺癌发生发展中起着重要作用。我们采用免疫组化S-P法检测子宫内膜腺癌和增生期子宫内膜中pRb蛋白的表达，旨在探讨其在子宫内膜腺癌发生发展中的作用。1 材料与方法1.1 材料 选取我院和弋矶山医院19992002年间手术切除的子宫内膜腺癌标本32例，组织学分级采用FIGO标准:G 1 级14例，G 2 级10例，G 3 级8例。临床分期采用1988年FIGO分期标准进行分期:期13例，期6例，期13例。按肌层浸润深度分为无浸润6例，侵及浅肌层（1/2）16例，深肌层浸润（1/2）10例。淋巴结转移阳性者13例，淋巴结转移阴性者19例。另取因其他妇科疾病而手术切除的子宫内膜标本，其中正常增殖期子宫内膜10例，非典型增生子宫内膜15例。1.2 免疫组织化学方法 采用免疫组化S-P法。所有手术切除的标本均经10%福尔马林溶液固定，石蜡包埋，切片厚4m。免疫组化操作按试剂盒说明书进行。鼠抗人单克隆抗体Rb为美国Dako公司产品，购于北京中山生物技术公司，工作浓度为120。以已知大肠癌阳性切片做阳性对照，以PBS代替一抗做阴性对照。1.3 结果判断 pRb蛋白阳性表达定位于细胞核，结果判断采用半定量法 1 。0分:切片中无阳性细胞或0.05）。随着肿瘤组织学分级的增高，pRb蛋白的阳性表达率呈降低趋势，但它们之间差异无显著性（P0.05）。在肌层浸润中，5例pRb蛋白表达阴性的肿瘤，浅、深肌层浸润各2例，无肌层浸润1例，三者之间的阳性表达率差异无显著性（P0.05）。pRb蛋白在临床分期、和期中的阳性表达率分别为92.3%、83.3%和61.5%，差异有显著性（P0.05）。子宫内膜腺癌组织中pRb蛋白的表达与临床病理指标的关系见表1。表1 子宫内膜腺癌中pRb蛋白的表达与临床病理指标的关系 （略）3 讨论 Rb基因位于人类13号染色体长臂（13q13.2），含有27个外显子，编码105kD的核磷蛋白。pRb在G1期处于低磷酸化状态，结合并抑制一组命名为E2Fs的转录因子，从而抑制S期相关基因的转录，使细胞停滞于G1期。作为第一个发现的肿瘤抑制基因，其基因突变和pRb蛋白的表达改变在人类多种肿瘤如膀胱癌、肺癌、乳腺癌和肝癌等肿瘤中均可检出。且有研究显示pRb蛋白的表达与某些肿瘤的预后密切相关。根据文献报道，pRb蛋白在癌组织中的阳性表达率一般在80.0%左右 2 。本文的研究结果显示，pRb蛋白在子宫内膜腺癌中的阳性表达率为84.4%，与文献报道相符，表明Rb基因的改变在子宫内膜腺癌中是不常见的。关于Rb基因在子宫内膜肿瘤中的研究国内外报道较少，Enomoto等 3 采用outhern blot杂交技术检测了9例子宫内膜癌和3例子宫内膜癌细胞系中Rb基因的改变，结果未发现Rb基因的重排，但应用dot blot技术却发现2例原发性子宫内膜癌中Rb mRNA缺失，笔者认为Rb基因的改变，与Ki-ras基因的激活和p53基因的失活一样在子宫内膜癌的发生中发挥着重要作用。Tsuda等采用免疫组化方法检测了10例正常子宫内膜、18例子宫内膜增生过长和35例子宫内膜癌组织中pRb蛋白的表达，结果发现pRb蛋白在子宫内膜癌中阳性表达率为88.6%，pRb蛋白的表达与肿瘤的临床分期和病理分级无关 1 。Niemann等 4 则研究发现子宫内膜癌中pRb蛋白的表达与肿瘤的病理分级有关，而与肿瘤的临床分期无关。我们从研究结果发现，pRb蛋白在正常子宫内膜、非典型增生子宫内膜和腺癌组织中的阳性表达率分别为100%、93.3%和84.4%，它们之间pRb蛋白阳性表达差异无显著性（P0.05），提示Rb基因的改变在子宫内膜腺癌的发生过程中可能不是主要事件。本文的研究结果还显示，pRb蛋白的表达与子宫内膜腺癌的病理分级、浸润深度、淋巴结转移无关（P0.05），仅与肿瘤的临床分期呈负相关（P0.05），表明Rb基因可能参与了子宫内膜腺癌的进展。本文的免疫组化结果显示，pRb蛋白在子宫内膜腺癌中的表达呈明显的异质性，即部分区域肿瘤细胞pRb蛋白表达阴性，推测pRb表达阴性的肿瘤细胞可能是Rb基因发生突变的肿瘤克隆，而发生这种改变的肿瘤均为临床期肿瘤，提示Rb基因的异常参与了子宫内膜腺癌发展，并且在肿瘤的后期发挥重要作用。参考文献1 Tsuda H，Yamamoto K，Inoue T，et al.The role of p16-cyclin D/CDK-pRb pathway in the tumorigenesis of endometrioid-type endometrial carcinoma.Br J Cancer，2000，82:675-682.2 Geradts J，Kratzke PA，Niehans GA，et al.Immunohistochemical detec-tion of the cyclin-dependent kinase inhibitor2/multiple tumor suppres-sor gene1（CDKN2/MTS1）product p16INK4A in archival human solid tumor:correlation with retinoblastoma protein expression.Cancer Res，995，55:6006-6011.3 Enomoto T，Fujita M，Inoue M，et al.Alterations of the Rb gene and its association with Ki-ras activation and p53inactivation in endometrial adenocarcinoma.Mol Carcinogen，1993，8:132-137.4 Niemann TH，Yilmaz AG，McGa