PGE2与胎儿胎盘循环.doc

PGE2与胎儿胎盘循环中华围产医学杂志 1999年第4期第2卷 论著作者：邹丽徐可树易青黄瑛单位：430022武汉，同济医大附属协和医院妇产科(邹丽，易青，黄瑛)；消化内科（徐可树）关键词： 地诺前列酮；胎盘；钙；血液速度【摘要】目的探讨前列腺素E2(PGE2 )对正常妊娠及妊高征孕妇胎儿胎盘循环的调节作用。方法在50例足月正常孕妇(对照组)及37例妊高征合并IUGR孕妇(妊高征组)中，利用共焦点激光扫描显微镜测定了PGE2 对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内游离钙离子(Ca2+)i动态变化的影响，同时用放免法测定了其脐静脉血中PGE2 浓度。结果PGE2使两组HUVEC中(Ca2+)i上升, 脐血中PGE2 值在妊高征组为5.40.6pg/ml与对照组的15.31.2 pg/ml相比，显示有意义的低值(P?0.05)。结论PGE2可能为胎儿胎盘循环的血管扩张因子；妊高征组脐血中PGE2 浓度降低使胎儿胎盘血流阻力增加可能影响胎儿生长发育。 PGE2 and feto-Placental CirculationZOU Li, XU Keshu, YI Qing, et al.Department of Obstetrics and Gynecology, Xiehe Hospital of Tongji Medical University, Wuhan 430022【Abstract】ObjectiveTo clarify whether prostaglandin E2 (PGE2) acts as a criculating regulator of feto-placental unit in cases of normal pregnancy and preeclampsia with IUGR.MethodThe study population consisted of 50 normal pregnant women (control group) and 37 pregnant women with preeclampsia andIUGR (study group). We have examined the effect of PGE2 on Human umblical venous endothelial cells( HUVECs) cytosolic Ca(Ca2+)i by confocal laser scanning microscopy. We also measured the level of PGE2 in cord blood using PGE2 RIA kit.ResultsPGE2caused a sustained (Ca2+)i increase in subjects with preeclampsia group and control group. PGE2of blood group was 5.40.6 pg/ml and 15.31.2 pg/ml in study group and control group (P0.05).ConclusionPGE2 may serve as a vasodilator of the fetoplacental circulation. Fetal growth may be affected by lower PGE2 level in cord blood of patients with preeclam psla.【Key Words】DinoprostonePlacentaCalciumBlood flow velocity血管扩张性前列腺素之一的PGE2在妊娠中不仅调节母体血压，而且也调节子宫胎盘循环，但是在对胎儿胎盘循环方面PGE2 的作用还有待深入研究。有学者报道向胎儿侧投予PGE2 诱发母体血管扩张1，亦有学者报告PGE2 可能通过收缩胎儿胎盘血管，扩张子宫管发挥不同的调节机能作用2。那么PGE2 是胎儿胎盘循环的扩张因子还是收缩因子?为了探讨PGE2 在胎儿胎盘循环中的调节作用，我们从PGE2 对HUVEC内离子钙动态的影响及脐血中PGE2 浓度两方面进行了研究。资料和方法一、研究对象选取1995年1月至1998年5月收治妊娠3540周，无内科合并症的孕妇50例(对照组)和妊高征合并胎儿宫内生长迟缓（IUGR）孕妇37例(妊高征组)，妊高征诊断标准见参考文献3。二、方法1HUVEC内(Ca2 )i的测定HUVEC的分离：经阴道分娩及剖宫产时，无菌采取中段脐带约20 cm，灭菌PBS灌洗净脐静脉后，用Jaffe4方法分离脐静脉血管内皮细胞，含0.1胶原酶的PBS液将脐静脉充满，37水浴10分钟,将所得的细胞浮游液以3000 rpm离心10分钟，获得内皮细胞。经台盼蓝确认生存细胞在90以上。将分离后的细胞放入培养皿，加入MEM培养液+10%FBS(fetal bovine serum)5%CO2 ,37培养2小时，使之稳定后用于测定。此外，通过SAB-PO试剂盒确认内皮细胞内因子关连抗原及CD31糖蛋白的局部所在判定了HUVEC。Flou-3AM负荷：Fluo-3为一种励起波长488500 nm的钙感受性荧光色素，在荧光波长530 nm的可视部领域内使用可能的一波长励起一波长荧光型的钙荧光指示药。以最后浓度为5M的?Fluo-3AM加入培养后的内皮细胞中37 45分钟孵化使Flou-3进入细胞内，此后用PBS溶液3次洗净，在新的MEM培养液中安定15分钟后放于倒置显微镜的测量台上，在室温下进行试验。以Fluo-3荧光强度的上升表示细胞内Ca2浓度的上升通过激光显微镜的处理系统进行测定。PGE2 的刺激：调整HUVEC的细胞密度使每一视野的细胞数为510个，PGE2 投予前记录静止状态下HUVEC的荧光画像，此后向HUVEC直接添加PGE2 再连续记录荧光画像，同时还在细胞外液含有Ca2 2 mM及无钙的状态下分别进行测定。(Ca2)i的测定：以共焦点激光显微镜(ACAS570)进行测定。本研究重点测定相对(Ca2 )i浓度的变化，即PGE2 添加时呈现最大反应的画面与添加前的画面比较，以(Ca2)i上升变化的百分率进行了计算。2脐静脉血中PGE2 值的测定分娩时用含EDTA的试管采脐静脉血7 ml经4,3 000 rpm离心10分钟后取血清用于测定。先用Amprep minicolumn抽出标本，然后用Amersham公司提供的PGE2 放免试剂盒进行测定。3统计学方法采用t检验。结果静止时HUVEC内(Ca2 )i浓度在对照组为?4.350.09 nM，妊高征组为5.860.11 nM，妊高征组显示有意义的高值(P0.05)，在分布上无显著差异。PGE2 在细胞外液无Ca2条件下，对两组均未惹起有意义的变化，但当外液被换上有2 mM Ca2的溶液后，所有的细胞均受PGE2 的作用，使细胞内(Ca 2)i上升70%，峰值在刺激后约1分钟，持续时间为10分钟左右，两组无明显差异。此外，脐血中PGE2 值在妊高征组为5.40.6 pg/ml与对照组的15.31.2 pg/ml相比，显示有意义的低值(P?0.05)。讨论在胎儿循环中，胎盘及胎儿的脑干均能合成PGE2 ，但主要来源于胎盘。Thorburn5报道胎盘通过分泌PGE2 调节胎儿主要器官的功能，使各器官成熟及代谢通路建立，但抑制其功能；分娩时，断脐和胎盘娩出后新的生命有完全的功能和成熟的器官适应新环境。在对胎儿血管作用方面，Clyman等6证明PGE2是胎羊动脉导管的强力扩张剂。由于妊娠时胎儿通过胎盘从母体获得营养，所以胎盘循环缺血状态易发生IUGR。另外，血管内皮细胞可产生分泌血管扩张或收缩物质与血管张力的调节密切相关7。Fox等8报道人脐血管不受任何神经支配。因此，胎儿胎盘血流量的调节可能由循环血中特殊的或血管内皮细胞分泌的血管活性物质调节。Cai等9报道脐血管内皮细胞内有多种血管活性物质存在。近年来认为细胞内Ca 是多种类型细胞受外来刺激后向细胞内传达信息的第二信使,其浓度变化与应答细胞机能变化相适应10,11。内皮细胞不存在Ca2通道，仅显示非选择性阳离子通道是Ca2的流入通道，故认为PGE2 所引起的细胞内Ca2的上升是通过胞膜受体或非选择性阳离子通路进行的。细胞内Ca2通过除极化使Ca2内流从而使内皮细胞依赖性弛缓因子(EDRF)释放。本研究中PGE2使两组HUVEC内(Ca2 )i上升，提示PGE2 可能是胎儿胎盘系的血管扩张因子，同时脐静脉血中PGE2 浓度在妊高征合并IUGR组显示有意义的低值，进一步证明了脐血中PGE2 浓度的降低使胎儿胎盘血流阻力增加,可能影响胎儿的生长发育，有临床指导意义。参考文献1Rankin JHG, Phernetton TM. 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