湿疹及慢性荨麻疹患者血清食物过敏原特异性IgG检测的临床意义.doc

中南大学 硕士学位论文湿疹及慢性荨麻疹患者血清食物过敏原特异性IgG检测的临床意 义 姓名：卢蔚 申请学位级别：硕士 专业：皮肤科 指导教师：颜兰香 20070501硕士学位论文 中文摘要 摘 要 目的：探讨湿疹及慢性荨麻疹患者血清中种食物过敏原特异性抗体的水平及食物过敏原在过敏性皮肤病中的作用，为临床治疗和预防相关疾病提供可靠的科学依据。 方法：采用法检测例患者及例正常人的血清食物过敏原特异性，按年龄、病种分组比较检测结果，同时随访观察例患者天、天后病情改善情况。 结果： 研究组与对照组血清食物过敏原检测的阳性率分别为和。 例湿疹及慢性荨麻疹患者血清中种食物过敏原特异性的检测结果依次为：鸡蛋、小麦、牛奶、大豆、蟹、大米、玉米、西红柿、鸡肉、蘑菇、牛肉、猪肉、鳕鱼。 少几组（岁）食物过敏原检测的阳性率为，高于其他年龄组，组间比较差异无统计学意义（）。少几组以鸡蛋、小麦和牛奶为主要过敏原，随着年龄的增长，虾、蟹的致敏性逐渐增高。 湿疹及慢性荨麻疹患者食物过敏原检测的阳性率分别为、，两组比较差异无统计学意义（）。湿疹患者中虾、蘑菇和鳕鱼的阳性率明显高于慢性荨麻疹患者，两组比较差异有统计硕士学位论文 中文摘要学意义（）。 检测阳性的例患者中，种以上食物过敏原阳性的患者占，随访了其中例患者，避免接触不耐受食物天和天后，有效率分别为和 根据检测结果调整患者饮食并随访例患者，天、天后有效率分别为、，两组比较差异有统计学意义（）。 结论： 通过检测血清食物过敏原特异性抗体寻找不耐受食物，从而调整饮食，改善症状，其对预防和治疗过敏性皮肤病具有重要参考意义。 关键词：食物不耐受，湿疹，慢性荨麻疹，免疫球蛋白硕士学位论文 英文摘要： ： ，： 宅 ： ？， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， （） ， 皿 硕士学位论文 英文摘要 虻 口） ， ， 口） ， ， ， （）： 啪 ， ： 原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在在论文中作了明确的说明。 ， 作者签名： 士巨立 期：兰竺年月主一 关于学位论文使用授权说明 本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。 作者签名：圭齑硕士学位论文 第一章前言 第一章前言 多年来，食物过敏及其对健康的影响一直受到人们的关注，早在年，一位英国医师就发现许多疾病如痛风、湿疹和绞痛病等的发生和食物密切相关，在去除有问题的食物后，症状就会逐渐消失，这就是人们最早认识到的食物不耐受现象 食物不耐受的定义和确切机制一直是一个具有争议的问题，引起食物不耐受的原因有很多，包括：酶缺乏、食物化学成分引起的反应和介导的迟发型变态反应等目前研究认为脚食物不耐受的发生和机体免疫系统的关系较密切。由于机体不能充分地消化食物大分子并引发免疫反应，产生特异性抗体，出现一系列的症状。英国过敏协会统计得出：人群中有高达的人对某些食物产生不同程度的不耐受，婴儿与儿童的发生率比成人高，多数食物不耐受的患者表现为皮肤反应和胃肠道症状等瞻”，但不同的人对于同一种食物不耐受可能出现极不相同的症状。营养学实验室的调查研究表明“，食物不耐受可导致全身各系统产生慢性症状，其中消化道症状占，皮肤症状占，神经系统症状占，呼吸系统症状占，肌肉骨骼症状占穰 由于食物不耐受导致的症状比较隐蔽，多在进食不耐受的食物数小时乃至数天后发生，从进食到发生症状之间存在延迟现象，因此，单凭症状诊断是否存在食物不耐受及引起不耐受的食物是比较困难的，需要配合实验室检测才能确定我们以往多采用食物激发试验、皮肤点刺试验和测定血清特异性水平来作为过敏性疾病的检测方法。食物不耐受可以具有和过敏相似的症状，和饮食也有一定的关联，但是皮肤点刺试验和特异性的检测却得不到阳性结果食物激发试验是最直接有效的确定食物迟发?从募觳馐侄危氖焙牧揖哂幸欢奈招裕壳敖仙俨捎谩诓簧傺芯肯允荆澄锊荒褪艹橛刑匾煨允澄铮桑纾堑南嘤撸泄馕南妆李保恍舾鎏宓难逯兴湮醇觳猓桑纾趴固澹纯杉觳獬龈咚剑桑纾强固濉桑纾强固寮炔斡氡涮从质且恢直；钥固澹觳馐澄锾匾煨裕桑纾强固逅剑梢粤私馊颂迨欠褚蚴澄锊荒褪懿瞬”洌佣粜约膊恼锒咸峁恢中碌募觳夥椒獗却撤椒谩焖佟娲倍导魅绻裕桑纾羌觳饨峁粜缘氖澄锝屑墒常喙刂匆不崴嬷?湿疹及慢性荨麻疹是皮肤科最常觅的过敏性疾病，病程慢性，复发率高，病硕士学位论文 第一章前言因复杂难以明确。目前研究啪发现食物不耐受与湿疹及慢性荨麻疹的关系非常密切，有报道表明硼，在牛奶相关性湿疹患者体内，抗牛奶特异性抗体水平升高，而在无湿疹的人群中，则存在低水平的特异性抗体。在对牛奶不耐受的湿疹患者人群中，用方法检测出口一乳球蛋白、一乳清蛋白和酪蛋白的水平升高，大量的研究表明叫，针对一乳球蛋白、蛋白和蛋黄和酪蛋白的特异性食物抗体的存在，可能是引起牛奶敏感性湿疹的原因。研究表明“由介导的变态反应引起的慢性荨麻疹发病率较低，一些慢性荨麻疹息者主要考虑其与食物不耐受有关 日前国内关于食物不耐受的研究较少，因此本实验分析年月年月我院皮肤科例湿疹及慢性荨麻疹患者和例健康人种常见食物过敏原特异性的检测结果，以及随访观察例患者调整饮食天、天后的病情改善情况，为临床治疗和预防相关疾病提供可靠的科学依据 硕士学位论文 第二章材料与方法 第二章材料与方法研究对象研究组 选取年月年月我院皮肤科门诊的湿疹及慢性荨麻疹患者例。其中男例，女例；湿疹患者例，慢性荨麻疹患者例；年龄岁，平均岁；岁组例，岁组例，岁组例，岁及印岁以上组例入选标准 （）临床表现符合湿疹和慢性荨麻疹诊断标准“”； （）病情较重或经治疗病情反复不愈者； （）随访期间内未服用任何药物者； “）无输血史，均未接受过激素、阿司匹林、免疫抑制剂或脱敏治疗，近期无感染史，无免疫缺陷病和多发性骨髓瘤捧除标准 （）能够肯定病因的各种慢性荨麻疹患者或其他疾病（如、甲状腺炎）引起的荨麻疹患者； （）有严重心、肝、肾等器官疾病及系统性疾病； （）月经期、妊娠试验阳性或哺乳期妇女分组方法 （）根据生长发育过程将年龄分组：少儿组（岁）、青年组（岁）、中年组（岁）和老年组（岁及印岁以上）； （）根据疾病种类分为湿疹及慢性荨麻疹组； （）根据随访时间分为天和天。对照组 选取无过敏史的健康志愿者例，其中男例，女例实验方法实验仪器与试剂 主要实验仪器有进口的 离心机和意大利公司提硕士学位论文 第二章材料与方法供的全自动过敏原检测分析系统。美国公司提供的食物过敏原抗体检测试剂盒，采用法半定量检测人血清中的种食物过敏原特异性抗体，包括小麦、大米、大豆、蘑菇、玉米、西红柿、鸡蛋、牛奶、虾、牛肉、鸡肉、猪肉、鳕鱼和蟹。实验原理 ， 微孔板的反应孔内分别包被有特异性食物不耐受原，患者血清中的特异性抗体与不耐受食物分子反应，清洗微孔板后去除反应过剩的血清蛋白加入酶标记的抗体结合液，同食物抗原一抗体复合物反应。再加入偶联酶的生色底物，发生显色反应。测定反应产物的吸光度值，该值与食物不耐受原特异性抗体浓度成正比，根据吸光度值计算出标本抗体浓度。标本采集和贮存 抽取静脉血，置于的冰箱中密闭保存，小时内取血清待检试剂准备和贮存 （）清洗液：将整个小瓶内的浓缩清洗液加入到蒸馏水中，使终体积为标明此为工作清洗液，保存在。 （）底物液：使用前分钟将底物液和等比例混合。实验步骤 食物过敏原特异性抗体半定量测定（酶联免疫吸附实验） 使用前将所有试剂及标本平衡至室温。 （）取患者血清加到血清稀释液中，：稀释患者血清； （）设空白对照孔、标准曲线孔（、 各孔）和阳性质量控制孔（ ）。将稀释的患者血清加入到剩余反应孔内，置室温（）孵育小时。倒出； （）用工作清洗液清洗每个反应孔，洗板三次； （）在所有反应孔中加入抗人抗体一辣根过氧化物酶结合液，置室温孵育分钟，倒出； （）重复步骤（）洗板三次； （）在所有反应孔中加入工作底物混和液，封闭微孔板，置室温孵育分钟； （）在所有反应孔中加入终止液； （）用酶标仪测定每孔在处的吸光度值； （）根据标准孔结果绘制标准曲线； 硕士学位论文 第二章材料与方法 （）根据吸光度值求得标本抗体浓度，单位为结果判断 按说明书规定的浓度分为级：（ 为阴性），（为轻度敏感），（ 为中度敏感），（ 皿为高度敏感）治疗方法 食物过敏原检测阳性的患者根据结果调整饮食，如果不耐受食物少，可直接忌食：如果不耐受食物很多，可将、阳性的食物列为忌食，的食物列入轮替，同时建议改变烹饪习惯或环境条件。食物过敏原检测阴性的患者饮食结构不改变评分标准湿疹的评分标准 采用改进的评分法“耵，根据不同部位皮损症状严重程度，所占面积的大小再结合成人、儿童各部位面积占全身面积的比例的综合积分慢性荨麻疹的评分标准：采用文献九标准进行评分（见表） 表慢性荨麻疹症状评分标准疗效判定标准明 症状积分下降指数（ ，）（治疗前总积分硕士学位论文 第二章材料与方法一治疗后总积分）治疗前总积分。 疗效结果判断：显效为皮损完全消退，痒感消失，值；良效为皮损明显消退，痒感明显减轻，值；微效为皮损有所消退和减轻，值；无效为皮损消退很少或皮损无改变，值（或继续加重。有效率以显效率加良效率计。 、统计分析 运用 软件进行数据统计分析，采用检验或确切概率法，为有显著性差异具有统计学意义。 堡主兰垒丝奎 蔓三皇堕墨 第三章结果 研究组与对照组血清食物过敏原检测阳性率比较 研究组与对照组血清食物过敏原检测阳性率分别为和，研究 组的检测阳性率明显高于对照组（见表）， 表研究组与对照组血清食物过敏原检测阳性宰比较 组剐 总例数 阳性例数 阴性例数 总阳性率（） 研究组 对照组 例湿疹及慢性荨麻疹患者血清食物过敏原 检测结果 例湿疹及慢性荨麻疹患者血清种食物过敏原特异性的检测结果 依次为：鸡蛋、小麦、虾、牛奶、大豆、蟹 、大米、玉米、西红柿、鸡肉、蘑菇、牛肉 、猪肉、鳕鱼轻度敏感的例数以虾、小麦、大豆较高中高度敏 感的例数以鸡蛋、小麦、牛奶较高（见表、图） 表 例湿疹及慢性荨麻疹患者血清食物过敏原检测结果 ！：壅盔鲞查星璧茎至鲞塑塾塑苎里！塑 堑 生塑苎堕堕塑丝鱼 墼 例数 敏 感 程度 总阳性 率（） 硕士学位论文 第三章结果 图 种食物过敏原的阳性率比较 各年龄组问食物过敏原阳性率比较 不同年龄段过敏原的分布有差异见表，少几组（岁）食物过敏原检测 的阳性率为，高于其他年龄组，组问比较差异无统计学意义（）。 少儿组以鸡蛋、小麦、牛奶为主要过敏原，大豆的阳性率次之，随着年龄的增长， 虾、蟹的致敏性逐渐增高。除蘑菇、鸡肉、猪肉外，其余食物过敏原特异性 的阳性率在各年龄组间比较差异均有统计学意义（）。 表各年龄组间食物过敏原阳性率年龄段 过敏原阳性率（） 例数 （岁） 小麦大米大豆蘑菇玉米西红柿鸡蛋牛奶 虾 牛肉鸡肉猪肉 鳕鱼 蟹 合计 ， （ 注：表示用确切概率法 硕士学位论文 第三章结果 湿疹和慢性荨麻疹患者血清食物过敏原结果阳性率比较 湿疹和慢性荨麻疹患者食物过敏原检测的阳性率分别为、，两 组比较差异无统计学意义（）湿疹患者中虾、蘑菇和鳕鱼的阳性率明显 高于慢性荨麻疹患者，两组比较差异有统计学意义（），其余食物的阳性 率则差别不大，两组比较差异无统计学意义（）（见表） 表湿疹和慢性荨麻疹患者血清食物过敏原结果阳性率比较（，） 例 总阳 病种 小麦大米大豆蘑菇玉米西红柿鸡蛋牛奶 虾 牛内鸡肉猪肉鳕鱼 蟹 数 性率 湿疹 慢性 荨麻疹 】 仉 。 幺 多种食物不耐受患者随访分