不同浓度的中药合剂对双歧杆菌增殖的影响.doc

不同浓度的中药合剂对双歧杆菌增殖的影响摘要本实验测定了21种不同浓度的中药合剂对双歧杆菌增殖的影响,结果显示:其中11种中药对双歧杆菌具有不同程度的促增殖作用。某些药物对各个浓度虽均有一定的促双歧作用,但在其中某一个浓度下作用最强。有些药物在不同浓度,对双歧杆菌增殖的影响截然不同,分别表现出促进、无影响或抑制。从此提示:在测试中药对细菌的作用时,应尽可能多选择几个浓度。关键词中药浓度双歧杆菌双歧杆菌是人体重要的生理性细菌,寻找促进双歧杆菌增殖的物质,用以提高人体内双歧杆菌的水平,或促进体外培养液中双歧杆菌的增殖,是许多学者关注的课题之一。不同研究者报告的某些中药对双歧杆菌作用的结果不完全一致,其中一个重要原因是实验的药物浓度不同,也就是说,某一种药物对双歧杆菌生长繁殖的影响究竟是抑制、促进、还是无益,与药物浓度密切相关,不能一概而论。我们研究的21种中药,取不同浓度对双歧杆菌作用的效果就说明了这一点。1材料与方法1.1中药合剂及制备选用具有益气健脾的中药共21种、它们是:莱菔子、桠葫芦、党参、玄参、马勃、阿胶、猪苓、芦根、黄芪、败酱草、茯苓、甘草、五味子、栀子、竹茹、生地、枸杞、陈皮、当归、半夏、葛根。购自石家庄市乐仁堂药房。以上中药各称取5克,加水20-50ml,浸泡24小时、煎煮30分钟后过滤浓缩呈5ml,制备成含生药1g/ml的药液,将此液定为100%浓度。1.2菌株及培养双歧杆菌DM8504株。实验用培养基为BS液体,固体培养基,本室自行配制。1.3菌液准备将双歧杆菌划线接种在BS斜面培养基上,37培养48小时,加少量生理盐水吹刮菌苔成菌悬液,再用生理盐水将此菌悬液进行十倍连续稀释、配成含10个/ml浓度的菌液,为试验用液。1.4不同浓度中药培养液的制备用BS液体培养基将实验用药稀释至50%、25%、12.5%三个浓度,同时设BS培养基对照,中药原液(100%)对照。1.5试验方法用微量移液管在以上各管中加入菌液0.1ml,37培养24小时,取各管培养物0.1ml,经无菌生理盐水稀释,采用文献报道滴注法1接种至BS固体培养基上,37培养48小时后计数,以平均菌落数计算出每毫升培养液中的活菌数。每一种药物按以上方法重复2-3次,各次试验的均数为最后的结果数据。2结果2.1以“药物试验管菌落均数”与“BS对照管菌落均数”之比D/C值做为判定增菌作用的指标,D/C值在2以上的共有11种中药,包括:莱菔子、桠葫芦、猪苓、马勃、阿胶、黄芪、败酱草、芦根、党参、茯苓、玄参。2.2某些药物,虽然在各个浓度都有促双歧作用,但在其中一个浓度作用最强,如桠葫芦,促双歧最强浓度为25%,D/C值高达35.8,而浓度为50%及12.5%时,D/C值分别为2.4、3.5,具有类似情况的中药还有莱菔子、马勃、阿胶、猪苓(见表1)。2.3有的药物在不同浓度,对双歧杆菌29中国微生态学杂志1997年第9卷第5期表现为抑制,无影响或不同的促进影响,例如黄芪在50%、25%、12.5%浓度的D/C值分别为0.04、1.4和9.3,其他有类似情况的中药有芦根、败酱草、党参、玄参、茯苓(见表2)。表1刺激双歧杆菌生长的最佳药物浓度药物名称试验管菌落数/对照管菌落数(D/C值)50%管25%管12.5%管桠葫芦2.4 35.8*3.5莱菔子28 32.6 46.5*马勃0.58 23.3*6.7阿胶3.7 16.3*11.6猪苓28*11.6 2.3*:为最高D/C值。表2药物浓度对细菌生长的不同影响药物名称试验管菌落数/对照管菌落数(D/C值)50%管25%管12.5%管桠葫芦4.3 0.85 0.54黄芪0.04 1.45 9.3败酱草0.01 5.58 0.25党参0.37 0.95 3.75玄参0.016 0.2 2.5茯苓0.02 3.47 2.63讨论在实践中为避免试验误差,我们将D/C均值在2以上者确定为有明显增菌作用的药物及其浓度。传统的中草药与微生态以及某些正常细菌的关系,国内有多位学者曾在这方面做了大量的工作,如陈聪敏2曾用中药大黄,造成小鼠脾虚模型,通过肠菌群测定,双歧杆菌,乳杆菌等优势菌均减少,而给予扶正固本的中药治疗后,优势菌增加,恢复正常功能。杨景云3等研制的中药903口服液已证明可以调整肠菌群,增加优势厌氧菌的生长。也有一些学者利用单味药,如云芝、刺五加、枸杞等,在试管内或平皿上证明具有促进双歧杆菌增殖的作用。考虑到祖国医学与微生态学在原理上,观念上的某些吻合,我们选取的21种中药都是具有益气健脾、扶正固本作用的,采用水煎服的方法,解析出以多糖为主的成份,发现其中11种药在一定浓度下,具有程度不等的刺激双歧杆菌增长的作用,实验还显示:中药的浓度对双歧杆菌的增殖有着明显的影响,有的中药虽然各个浓度下均有刺激双歧杆菌增殖的作用,但在某一浓度其作用最强:而有的中药在不同浓度下,对双歧杆菌的影响分别表现出促进、抑制或无影响。以此提示:在测试中药对细菌的影响作用时,无论其目的是抑菌、还是增菌,应尽可能多进行几个浓度的测试,以获得完整的、全面的、正确的实验资料。参考文献1康白编著.正常菌群与健康人体微生态学。19892陈聪敏.中国微生态学杂志.1989.2(2)3杨景云.中国微生态学杂志.1991.4(2)4郭志明.中国微生态学杂志.1995.7(6)5田碧文.中国微生态学杂志.1996.8(2)(收稿日期:1996-12-24)EFFECT OF TRADITIONAL CHINESE DRUGS WITH VARLANTCONCENTRATION ON BIFIDOBACTERIUMWeilin,Zhang Yonghong,Hao Weishan.Department of Microbiology and Immunology,Hebei Medical University,Shijiazhuang,ChinaAbstractIn this study, the effect of 21 kind of traditional Chinese drugs that thereare functions of tonifying the spleen and replenishing qi on Bifidobacterium (DM30中国微生态学杂志1997年第9卷第5期8504) was tested in vitro. Drugs were extracted with pure water and diluted to50%, 25%, 12.5% with BS culture medium, which also used as fundamental con-trol. The results indicate: (1) Among 21 kind of drugs, 11 of them show obviousstimulative growing effect on Bifidobacterium (DM 8504). The number of colony ofdrug-tube/The number of control-tube (D/C) is used to judge the effect. Somedrugs including Radish Seed, Calabash Gourd, Pclyporus, Puff-ball and Donkey-hide Gelatin are high D/C (16.3-46.5). and others including Milkvetch Root,Patrinia, Asiabell Root, Finwort Root, Reed Rhizoma and Pona are low D/C (2.5-9.3). (2) These is colse relation between different concentration of drug andstimulative growing effect of Bifidobacterium. It is found that each drug has its ownbest concentration for stimulative growing, such as 50% for Polyporus, Reed, Rhi-zoma, 12. 5%-25% for lthers. (3) For some drugs, different concentration hasopposite effect on Bifidobacterium. For example, Milkvetch Root shows bacte-riostasis in 50% concentration, stimulative growing in 12.5%, and no effect in25%. The same phenomenon remains in other drugs of Reed Rhizoma, AsiabellRoot, Figwort Root, Poria. The above ersults show that the concentration of drugshould be paid close attention to when testing its effect no growing of bacteria, onmatter what purpose the test is:bacteriostasis or stimulative growing. Otherwise,it is impossible to obtain the complete and correct results.(上接23页)of streptococci to serum-coated HA. OralMicrobiol Immunol 1989;4:1996Hillman HD, Socransky SS, et al. The rela-tionships between streptococcal species andperiodontopathic bacteria in human dentalplaque. Arch Oral Biol 1985 b;7917Burton R, Benjamin A, Lindy K, et al.Chemostat studies of the effect of environmen-tal control on streptococcus sanguis adherenceto HA. Infect Immun 1982;35:648David LH, Itzak O, Harry SC, et al. Multipleadhesion of streptococci. Infect Immun 1992;60:21479岳松龄主编.口腔内科学第二版.人民卫生出版社1987;910Lamont RJ, Hersey SG, Rosan B, et al.Characterization of the adherence of Porphy-romonas gingivalis to oral streptococci. OralMicrobiol Immunol 1992;7:19311Coconnier MH, Klaenhammer TR, KerneisS, et al. Proteinmediated adhesion of lacto-bacillus acidophilus BG2F04 on h