试剂标准操作规程(SOP)-BUN.doc

文件号：AA 第1版试剂标准操作规程项 目尿素测定试剂（UN）方 法尿素酶法氨消去法编写人日期审核人日期批准人日期文件分发部门和/或个人本规程自200 年 月 日起实施，每1年复审一次医务科保管者院长办公室保管者院档案室保管者检验科主任临床化学检验室目 录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义1. 检测原理本方法原理反应方程式如下：第一反应 GLDHNH3+-酮戊二酸 谷氨酸+H2O NADPH2 NADP第二反应 尿素酶尿素+H2O 2NH3 + CO2 GLDHNH3+-酮戊二酸 谷氨酸+H2O NADPH2 NADP第一反应如上，除去血清中内原性氨。在第二反应中，在尿素酶的作用下，尿素分解为氨，然后，根据谷氨酸脱氢酶的辅酶的减少量测定氨的含量2标本采集与处理2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3 抗凝剂：肝素或EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。 2.4 标本处理：血标本室温放置30min45min后离心分离血清，置洁净试管加盖低温保存。3试剂3.1 试剂：本科使用上海蓝怡科技有限公司代理的日本协和UN试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂名成分名含量试剂R-1谷氨酸脱氢酶（GLDH）NADHP2-酮戊二酸缓冲剂稳定剂20IU/ml0.3IU/ml10mmol/l试剂R-2尿素酶-酮戊二酸缓冲剂稳定剂28IU/ml17mmol/l3.2 校准血清：使用日本协和提供的UN标准液。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3 试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22稳定28天，试剂应避免污染。4仪器AILEX CA400仪器。5操作样品为血清。本法为速率法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。A测定6计算A标准c CO式中：c 测定血清UN浓度，umol/L；A测定 标本管吸光度；A标准 标准管吸光度；CO 校准血清中UN浓度，umol/L；A A2A17操作性能7.1 精密度：批内CV1.78%，批间CV 3.89%。7.2 准确度：测量结果在控血清靶值2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。7.3 灵敏度：0.33mmol/L 7.4 可报告范围：血清与试剂用量之比为3.5：240：80时，测定上限为42.87mmol/L。7.5 特异性：测量值在给定值的90%-110范围内。7.6 干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。8参考值 血清：2.857.14 mmol/L9临床意义尿素是蛋白质代谢最终产物，在正常血清中，非蛋白氮（NPN）50%为尿素。尿素主要通过肾排泄。在临床，血中尿素的浓度被作为肾机能的指标。附录A:(CA400UN参数)NameUNNormal Range2.86-7.14Technical Range0.00-42.87Unitmmol/LAssay TypeRate Wave length-Prim/sec340/415Measuring Points 1 Start-End42-68 2 Start-EndNormal S.Vol3.5Reagent 1 R.Vol240Reagent 2 R.Vol80Decimal Points2Calib TypeLinearK因子-SamplingDuplicateS1 Conc