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文档简介

WB试剂配方SDS-上样缓冲液(2X) 100ml (100 mM Tris-Cl (pH 6.8);4% (w/v) SDS;0.2% (w/v) bromophenol blue;20% (v/v) glycerol;200mM DTT (dithiothreitol)Tris-base 1.2114gSDS 4g bromophenol blue 0.2gglycerol 20mlddH2O 定容至80ml 1M DTT 20ml Store the SDS gel-loading buffer without DTT at room temperature. Add DTT from a 1 M stock just before the buffer is used.配胶:30%丙烯酰胺(商品化29:1)Tris-HCl:(1)分离胶(PH8.8)1.5M 称取Tris-base(MW121.14)91.855 g,先ddH2O 400ml,用盐酸调pH=8.8后,定容至500ml(2)浓缩胶(PH6.8)1M称取Tris-base(MW121.14)60.57 g,先ddH2O400ml,用盐酸调pH=6.8后,定容至500ml10% SDS 称取10g SDS粉末,溶于入100ml ddH2O即可,可80水浴加热,易于溶解。10%APS(过硫酸铵): 称取1 g过硫酸铵;加入10 ml的ddH2O,将固体粉末彻底溶解;贮存于4。TEMED(商品化)SDS-PAGE电泳缓冲液(25mM Tris, 192mM Glycine, 0.1%SDS) 25,pH约为8.6 Tris-base(MW121.14) 3.03g Glycine(MW75.07) 14.41g SDS 1g加ddH2O定容至1000ml转移缓冲液称取14.3g Glycine,2.9g Tris.base,200ml 甲醇定容至1L,存于410x 丽春红染液丽春红S 2g三氯乙酸 30g磺基水杨酸 30g加ddH2O定容至100ml 用时稀释10倍10x TBS母液(1L)20mM Tris-base 24.228g 150mM NaCl 87.75g先溶于800ml ddH2O,用浓HCl调pH=7.2-7.4,后定容至1L用时先稀释成1xTBS,并补加入1 Tween-20后配成1xTBS-T封闭液5% milk:称取5g脱脂奶粉,溶于100ml 1xTBST; 3% BSA:称取3g BSA粉末,溶于100ml 1xTBST发色液ECL Plus western blottingdetection system 和Advance ECL western blotting detection system,以及SuperSig

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