04食品学院生物工程黎劲桃--“挑战杯”报名表

p第十届“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛华南农业大学校内选拔赛报名表申报者情况姓 名黎劲桃性别女出生年月84年7月所在学院食品学院现学历高中专 业生物工程年级2004级学制四年入学时间2004年9月作品全称采用双水相萃取技术从Bacillus subtilis BS04-96发酵液中提取纤溶酶作品类别自然科学论文作品所属领域生命科学住 址华南农业大学华山宿舍区9栋208室宿舍电话87344940手机号子信箱合作者情况姓 名性别年龄最高学历所在单位肖秀雁女21高中食品学院蓝丽娟女21高中食品学院叶健俊男21高中农学院冯安女21高中经济管理学院作品的目的和基本思路目的：通过对PEG分子量、磷酸盐浓度、pH、温度、载样量、上下相体积比等因素进行研究，优化双水相体系萃取溶纤酶条件，探索出能有效分离纯化纤溶酶的两步策略，提高萃取率、缩短萃取时间并提高产品纯度，促进双水相萃取技术分离纯化纤溶酶在医药产业、食品工业、生物技术领域等的发展和应用。基本思路：1、PEG/磷酸盐双水相系统相图的制作，研究pH对相图的影响； 2、单因素试验：对PEG的分子质量、磷酸盐浓度、pH、温度、载样量、上下相体积比等因素对纤溶酶在上下相中的分配情况进行单因素试验；3、通过Box-Behnken试验设计筛选显著性因子，然后采用中心组合设计优化萃取方案，并对两因子互作效应进行分析；4、尝试利用双水相萃取技术扩大化生产分离纯化纤溶酶，探讨其在生产上的应用前景。作品的科学性、先进性及独特之处（设计、发明写出其技术关键和主要技术指标）目前，提取纤溶酶常采用传统的蛋白质分离纯化方法，如有机溶剂沉淀、盐析、离心、凝胶色谱柱脱盐脱色纯化等方法，但都存在步骤繁多、分离时间长、收率低等缺点，难以满足人们对新一代溶栓制剂的需求。双水相萃取技术，是指两种水溶性不同的聚合物或者聚合物和无机盐的混合溶液，在一定浓度下，体系就会自然分成互不相溶的两相。被分离物质进入双水相体系后由于表面性质、电荷间作用和各种作用力（如憎水键、氢键和离子键）等因素的影响，在两相间的分配系数K不同，导致其在上下相的浓度不同，达到分离目的。 双水相萃取技术是利用比较简单的设备，在温和的条件下进行简单操作就可获得较高收率和纯度的医药等产品的新型分离技术，相比传统的两相萃取技术更高效、便于连续操作以及适合于工业放大的特点，其技术特征满足了医药、食品工业和生物技术产业发展的必然要求和趋势：双水相体系含水量高，条件温和，操作简便，分相时间短，对生物活性物质无毒害，提取时不会引起蛋白质、酶、抗生素等生物活性物质失活或变性，有时还有保护作用；不存在有机溶剂残留问题，操作环境对人体无害，萃取体系中的两相成分可回收循环利用；易于进行连续操作，可直接与后续提纯工序相连接，无需进行特殊处理；体系能进行萃取性的生物转化。 结合双水相萃取技术进行分离纯化纤溶酶，具有科学性、先进性。目前，国内外对于利用双水相萃取方法分离纯化生物活性物质已有大量的研究报道，但对纤溶酶的研究相对较少，因此，深入研究该项目具有巨大的发展空间及市场前景。作品的实际应用价值和现实意义血栓疾病是危害人类健康的主要疾病之一，是现今仅次于癌症的第二大病症。如脑血栓、急性心肌梗死(AMZ)的死亡率已达40 以上，血栓病逐渐成为死亡率占首位的病症，因而近年来血栓栓塞症及其治疗方法受到了人们的广泛关注。溶栓疗法是使已形成的血栓直接溶解的唯一疗法，即利用溶栓剂直接溶解血栓或通过激活血液中的血纤维蛋白溶酶原转化成血纤维蛋白溶酶来催化血栓的主要基质血纤维蛋白水解。目前临床应用的溶血栓剂药物包括尿激酶（UK）、链激酶（SK）、组织性纤溶酶原激活剂（tPA）等，但由于这些药物成本高、有出血性副作用、半衰期短等缺点，而且都是静脉注射药物，使用很不方便，因此口服性溶血栓药物的开发就显得十分重要。纤溶酶（NK）,具有高纤溶活性，可用于治疗和预防血栓病，并且具有酶活稳定、半衰期长、无毒副作用、原料易得等优点。纤溶酶可经口服直接溶栓，同时激活体内的纤溶酶原，而增加内源性纤溶酶的活性，是一种非常有前途的溶血栓、抗血栓的新型药物。因此，国内外对纤溶酶的相关研究方兴未艾。双水相萃取分离纯化技术所需设备简单、操作方便，且两相成分可回收循环利用，因此，大大降低了生产成本，可提高产品的质量和生产效益，易于相关产业生产规模的扩大化。可回收两相成分循环利用，减少环境污染。目前由于生产溶纤酶的技术还不够成熟,使得用于治疗血栓疾病的药物费用比较高。因此，双水相萃取技术分离纯化纤溶酶对于纤溶酶产业化具有现实意义，并具有相当的理论价值。文章摘要（技术、发明写出作品的技术特点和优势，提供该作品的适用范围及推广前景的技术性说明）作品未完成（1月份到3月份作品进行完善）作品在何时、何地、何种机构举行的会议上或报刊上发表及所获奖励（技术、发明写出专利情况）暂无推荐教师意见 纤溶酶是一种食源性溶纤活性激酶，安全且口服有效，纤溶酶的提取与保活是一个主要的研究方向。双水相萃取技术应用于纤溶酶提取有可能建立一套绿色生产工艺体系，其对于简化提取工序、降低生产成本和保持纤溶酶生物活性具有重要意义。填