第九章生物碱类药物分析.ppt

掌握 生物碱类典型药物的结构特征与性质 特征鉴别试验 了解 其他鉴别反应 其他杂质检查方法 学习目标 第一节典型药物的基本结构与性质 一 基本结构和分类 一 苯烃胺类本类药物的结构特征为N在侧链上 为脂肪胺 代表药物 盐酸麻黄碱 盐酸伪麻黄碱 盐酸麻黄碱 盐酸伪麻黄碱 性质 1 碱性较强 与酸易成盐 2 手性特征 3 氨基醇结构 4 紫外吸收 二 托烷类 莨菪醇和莨菪酸缩合而成的脂类化合物代表药物 硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱 硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱 性质 1 碱性较强 与酸易成盐 2 手性特征 阿托品为外消旋体 三 喹啉类 苯并吡啶的衍生物 N在 位 代表药物如硫酸奎宁 硫酸奎尼丁 硫酸奎宁 硫酸奎尼丁 性质 1 两份子药物与一份子二元酸成盐 2 手性特征 四 异喹啉类 苯并吡啶的衍生物 N在 位 代表性药物如盐酸吗啡 磷酸可待因 盐酸吗啡 磷酸可待因 性质 1 盐酸吗啡具有两性 碱性较强 五 吲哚类 本类药物的结构特征为苯并吡咯代表药物如硝酸士的宁 利血平等 硝酸士的宁 利血平 性质 1 N1碱性较强 2 利血平以游离状态存在 1 1 2 2 六 黄嘌呤类 咪唑和嘧啶并合的双杂环化合物 代表药物如咖啡因 茶碱 咖啡因 茶碱 性质 1 以游离碱存在 1 碱性 季铵碱 脂肪胺 脂环胺 芳胺 N 芳杂环 酰胺麻黄碱 阿托品 罂粟碱 咖啡因吗啡具酸碱两性 二 生物碱的通性 2 旋光性一般多为左旋体有效 3 溶解性游离生物碱不溶或难溶于水 能溶或易溶于有机溶剂 在稀酸中成盐而溶解生物碱盐类易溶于水 不溶于有机溶剂 生物碱碱性比较 第二节鉴别试验 一 性状检查 一 外观 形态 色泽 臭味 二 溶解度 三 物理常数 1 熔点例 磷酸可待因 05版药典 加入20 NaOH溶液至白色沉淀出现 用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全 滤过 沉淀用水洗净 在105 干燥1小时 依法测定 熔点为154 158 2 比旋度例 硫酸奎宁 硫酸奎尼丁3 吸收系数 一 显色反应 二 沉淀反应常用的生物碱沉淀试剂为 1 重金属盐类 如K2HgI4 KBiI4 I2 KI 二氯化汞等 2 大分子酸类 如磷钼酸 硅钨酸等 1 双缩脲反应芳环侧链氨基醇结构的特征反应盐酸麻黄碱 盐酸伪麻黄碱 蓝紫色 2 Vitali反应 莨菪酸结构的托烷类生物碱的特征反应硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱硫酸阿托品 加发烟硝酸5滴 水浴蒸干 放冷 加乙醇2 3滴润湿 加固体KOH一粒 显深紫色 3 绿奎宁反应 C6位含氧喹啉类生物碱在此生物碱的微酸水溶液中 加微过量溴水或者氯水 再加氨溶液 应呈翠绿色 硫酸奎宁 溴水或者氯水 氨试液 翠绿色 4 紫脲酸铵反应 黄嘌呤类生物碱 5 Marquis反应 含酚羟基的异喹啉生物碱的特征反应 盐酸吗啡 三 仪器分析鉴别法 一 UV 二 IR 三 色谱 第九章生物碱类药物的分析第一节典型药物的结构和性质一 苯烃胺类 1 碱性 2 手性 3 氨基醇结构 4 UV 二 托烷类 1 碱性 2 阿托品为消旋体 三 喹啉类 1 碱性 四 异喹啉类 1 盐酸吗啡酸碱两性 五 吲哚类 1 碱性 六 黄嘌呤类 1 游离 第二节鉴别试验一 性状检查 外观 溶解度 物理常数二 化学鉴别法1 显色反应 2 沉淀反应3 特征鉴别反应 1 双缩脲反应 2 vitaili反应 3 绿奎宁反应 4 紫脲酸铵反应 5 Marquis反应三 仪器分析法 UV IR 色谱 掌握 非水滴定法的原理 应用实例 提取酸碱滴定法的步骤以及常用试剂 了解 其他实验条件的选择 学习目标 第三节特殊杂质检查一 利用药物和杂质在物理性质上的差异 硫酸奎宁中 氯仿 乙醇中不溶物 的检查 硫酸阿托品中 莨菪碱 的检查 利血平中 氧化产物 的检查 利用旋光度的差异 利用溶解行为的差异 利用对光选择性吸收的差异 二 利用药物和杂质在化学性质上的差异1 盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查 本品 2 盐酸吗啡中罂粟酸的检查罂粟酸遇三氯化铁显红色 要求本品加入试剂 不得显红色 三 色谱法 硫酸奎宁中其它金鸡纳碱的检查检查方法 供试品溶液自身稀释对照法有关物质的检查方法 HPLC 旋光法 硫酸阿托品 05版药典 检查 莨菪碱取本品 按干燥品计算 加水制成每1ml中含50mg的溶液 依法测定 附录 E 旋光度不得过 0 40 已知莨菪碱的比旋度为 32 5 求杂质限量是多少 第四节含量测定 一 非水滴定法 非水碱量法 一 原理和方法游离生物碱 生成生物碱的高氯酸盐生物碱盐 置换滴定 即强酸滴定液置换出与游离碱结合的较弱的酸 二 测定条件的选择适用范围及溶剂的选择Kb 10 10时 宜选冰醋酸作为溶剂 Kb为10 10 10 12时 宜选冰醋酸与醋酐的混合液作为溶剂 Kb 10 12时 选用醋酐作为溶剂 2 酸根的影响 酸根在冰醋酸中的酸性 高氯酸 氢溴酸 盐酸 硫酸 硝酸 其它弱酸 磷酸 有机酸 若滴定过程中置换出的HA酸性较强 反应将不能进行到底 需进行一定处理 以排除HA的干扰 3 指示终点的方法电位法 玻璃 甘汞电极系统指示剂法 结晶紫 三 测定实例 1 游离弱碱性生物碱药物的含量测定 咖啡因 咖啡因的碱性很弱 pKb为14 1 所以选用酸酐 冰醋酸作为溶剂 可使突跃显著增大 4个N 但只有一个N碱性稍强 故滴定时 1mol的高氯酸相当于1mol的咖啡因 1 一般均预先在溶液中加入Hg Ac 2的冰醋酸溶液 以消除氢卤酸对滴定的干扰 理论量1 3倍 2 氢卤酸盐的测定 汞污染 2 筛选溶剂 达到终点易观察的目的 同时采用电位法指示终点 3 部分采用HPLC进行含量测定 取本品约0 15g 精密称定 加冰醋酸10ml 加热溶解后 加醋酸汞试液4ml与结晶紫指示液1滴 用高氯酸滴定液 0 1mo1 L 滴定至溶液显翠绿色 并将滴定的结果用空白试验校正 每1ml高氯酸滴定液 0 1mol L 相当于20 17mg的C10H15NO HCl 盐酸麻黄碱ChP 2005 生物碱的硫酸盐 在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫酸氢盐 3 硫酸盐的测定 1 硫酸阿托品HClO4直接滴定时 反应摩尔比为1 1 2 硫酸奎宁HClO4直接滴定时 反应摩尔比为1 3 C20H24N2O2 H 2 SO42 3HCLO4 C20H24N2O2 2H 2CLO4 C20H24N2O2 2H HSO4 CLO4 因HNO3具有氧化性 可使指示剂变色 一般电位法指示终点 如硝酸毛果芸香碱 4 硝酸盐的测定 无影响 直接测定 如磷酸可待因 5 磷酸盐及其有机酸盐的测定 一 原理与方法 二 提取酸碱滴定法 适用于碱性比较强的的药物分析 Pkb 6 9 碱化 分离提取 2 滴定 1 直接滴定法用于碱性较强的生物碱 2 剩余滴定法用于碱性较弱的生物碱 3 提取剩余滴定法用于对热不稳定的生物碱 碱化试剂最常用氨水 优点 使大部分生物碱游离 不会和生物碱发生反应 不易乳化 易挥发 易除去 无干扰 二 测定条件的选择 2 提取溶剂 1 提取溶剂选择的原则对生物碱溶解度大 而对其他共存物溶解度尽可能小 与生物碱及碱化试剂不起任何反应 2 常用的提取溶剂最常用氯仿 3 选择合适的指示剂 要求 变色范围在酸性区域的指示剂 被滴定生物碱的化学计量点 应在选用的指示剂变色范围内 注 甲基红 4 2 6 3 溴酚蓝 3 0 4 6 4 避免乳化 措施 采用碱性弱的碱化试剂 选用不易产生乳化的其他有机溶剂 避免猛烈振摇 如果乳化已经出现 则采用以下方法 改变两相体积比 加入少量乙醇 加入无机盐 离心 热敷 加少量酸 磷酸可待因糖浆的含量测定用内容量移液管 精密量取本品10ml 以水洗出移液管内的附着液 置分液漏斗中 加氨试液使成碱性 用氯仿振摇提取至少4次 第一次25ml 以后每次各15ml 至可待因提尽为止 每次得到的氯仿液均用同一份水10ml洗涤 洗液用氯仿5ml振摇提取 合并氯仿液 置水浴上蒸干 精密加硫酸滴定液 0 01mol L 25ml 加热溶解 放冷 加甲基红指示液2滴 用氢氧化钠滴定液 0 02mol L 滴定 每1ml的硫酸滴定液 0 01mol L 相当于84 88mg的C18H21NO3 H3PO4 3 2H2O 第三节特殊杂质检查一 利用物理性质上的差异 旋光性 二 利用化学性质上的差异三 色谱法第四节含量测定一 非水溶液滴定法 一 原理和方法 游离碱 生物碱盐 二 测定条件的选择1 适用范围及溶剂的选择2 酸根的影响3 指示剂方法的选择 三 测定实例 1 游离碱的测定 2 氢卤酸盐的测定 3 硫酸盐的测定 4 硝酸盐的测定 5 磷酸及有机酸盐的测定 二 提取酸碱滴定法1 原理和方法 步骤 2 测定条件的选择 碱化试剂 提取溶剂 指示剂 三 酸性染料比色法 生物碱与某些酸性染料 在一定PH条件下可定量结合显色 然后用比色法测定含量 特点 灵敏度高 方便 并且具有一定专属性和准确性 适用于含量较低的样品测定 一 基本原理 在适当的介质中 BH In 水相 B H BH HInH In BH In 有机相 二 测定条件的选择 关键 酸性染料与有机碱能否定量的形成离子对 并完全被有机溶剂提取 1 水相最佳PH值的选择 使生物碱均形成阳离子 且酸性染料电离足够阴离子 2 酸性染料 种类的要求 与生物碱定量结合 生成的离子对在有机相中溶解度较大 而染料自身在有机相中不溶或很少溶解 生成的离子对有较高吸光度 常用 溴麝香草酚蓝 甲基橙 溴甲酚绿等 3 有机溶剂的选择 要求 对离子对的提取率高 不能或极少与水互溶 常用三氯甲烷 二氯甲烷等 4 水分的存在完全无水 5 有色杂质的存在 为了防止有色杂质的干扰 可对酸性染料进行处理 用有机溶剂提取 除去有色杂质 供试品溶液的制备 取本品20片 精密称定 研细 精密称取适量 约相当于硫酸阿托品2 5mg 置50ml量瓶中 加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释至刻度 滤过 取续滤液 作为供试品溶液 对照品溶液的制备 另取硫酸阿托品对照品约25mg 精密称定 置25ml量瓶中 加水溶解并稀释至刻度 摇匀 精密量取5ml 置100ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 作为对照品溶液 例 硫酸阿托品片 05版药典 测试方法 精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml 分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中 各加溴甲酚绿溶液2 0ml 振摇提取2分钟后 静置使分层 分取澄清的三氯甲烷液 照紫外 可见分光光度法 附录 A 在420nm的波长处分别测定吸光度 计算