病毒性肝炎标志物检测课件

病毒性肝炎标志物检测 1 病毒性肝炎标志物检测 病毒性肝炎标志物检测 2 A 病毒性肝炎HepatitisVirus 肠道传播 肠道外传播 F TTV 其它 E NANB B D C 病毒性肝炎 背景 病毒性肝炎标志物检测 3 传染源 粪便 血液 血源性物质 体液 血液 血源性物质 体液 血液 血源性物质 体液 粪便 传播途径 粪 口 经皮肤 经粘膜 经皮肤 经粘膜 经皮肤 经粘膜 粪 口 慢性感染 否 是 是 是 否 病毒性肝炎类型 A B C D E 基因组类型ssRNAdsDNAssRNAssRNAssRNA 病毒性肝炎标志物检测 4 HepatitisBVirus 乙型肝炎的病原体在全世界广泛流行 估计全球半数以上人口已被HBV感染过 5 的人口为HBV慢性感染中国 乙肝高发区 人群HBsAg的检出率达9 8 病毒性肝炎标志物检测 5 HepatitisBVirus 病毒性肝炎标志物检测 6 抗原组成 一 HBsAg 位于病毒表面 是一种糖蛋白4种亚型 adr adw ayr ayw 欧美国家 adw我国汉族 adr我国少数民族 ayw判断HBV感染的指标之一刺激机体产生保护性抗体即抗 HBs 病毒性肝炎标志物检测 7 抗原组成 二 HBcAg 位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内 在血清中不易检出游离的HBcAg主要成分是蛋白质刺激机体产生抗 HBc 非保护性抗体 在乙肝急性期 恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗 HBc抗 HBcIgM常提示病毒处于复制状态 病毒性肝炎标志物检测 8 抗原组成 三 HBeAg 位于HBV的核心 是一种可溶性蛋白抗原HBeAg和Dane颗粒出现相平行 且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标刺激机体产生抗 HBe抗 HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合 通过补体介导破坏受染的肝细胞 抗 HBe的出现是预后良好的征象 病毒性肝炎标志物检测 9 抗原组成 四 Pre S抗原 位于HBV的外衣壳上 有两种刺激机体产生抗Pre S1和抗Pre S2 能阻断HBV与肝细胞受体结合 从而起到抵抗病毒的作用抗Pre S1和抗Pre S2的出现 表示病情好转 趋向痊愈 病毒性肝炎标志物检测 10 传染源 患者潜伏期急性期慢性期无症状HBsAg携带者 病毒性肝炎标志物检测 11 高 中等 低 不能检出 血液 精液 尿 血清 阴道分泌物 粪便 伤口渗出物 唾液 汗液 泪液 乳汁 各种体液中HBV的浓度 病毒性肝炎标志物检测 12 血源性传播输血 注射 外科和牙科手术 针刺等剃刀 牙刷和蚊虫叮咬等母婴垂直传播宫内传播分娩时微小皮损处传播产后母婴密切接触性传播 HBV传播途径 病毒性肝炎标志物检测 13 病原学诊断 一 抗原抗体检测 项目 HBsAg 抗 HBs HBeAg 抗 HBe 抗 HBc以及抗 HBcIgM方法ELISA enzyme linkedimmunosorbentassay 最常用 定性 发光免疫分析 定量 反相间接血凝试验 少用 病毒性肝炎标志物检测 14 ELISA的基本原理 利用抗原和抗体特异性结合主要的试剂固相抗原或抗体酶标记的抗原或抗体酶的底物 病毒性肝炎标志物检测 15 病原学诊断 二 核酸检测 核酸杂交探针PCR引物 病毒性肝炎标志物检测 16 HBsAg 感染的标志Anti HBs 既往感染 接种疫苗Anti HBcIgM 急性感染标志Anti HBcIgG 既往或慢性感染HBeAg 急性病毒复制 有传染性Anti HBe 病毒不再复制HBV DNA 急性病毒复制 比HBeAg更准确 主要用于监测治疗反应 病毒性肝炎标志物检测 17 血清学检测的临床意义 HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc临床意义 急性或慢性感染 大三阳 乙肝后期或慢性感染 小三阳 潜伏期或急性乙肝早期 痊愈或恢复期 有免疫力 痊愈 有免疫力 疫苗接种或曾经感染过 有免疫力 病毒性肝炎标志物检测 18 蛋白质代谢功能的检查 肝合成白蛋白 脂蛋白 凝血因子 纤溶因子 各种转运蛋白等 肝脏受损时 这些蛋白下降 球蛋白 非肝脏合成 在肝实质细胞受损 间质细胞增生时 球蛋白生成增加 病毒性肝炎标志物检测 19 肝功能 1 代谢功能 1 蛋白质 脂肪的同化 储存 异化等2 核酸代谢 维生素的活化和储藏3 胆红素 胆酸的生成分泌 排泄功能如对胆红素的排泄2 分泌 排泄功能 如对胆红素的排泄3 生物转化功能 氧化 还原 水解 结合 病毒性肝炎标志物检测 20 实验室检查的目的 了解 肝脏有无损伤及损伤的程度监测肝功能状态协助病毒性肝炎和肝癌的诊断评价肝脏的储备功能其他 病毒性肝炎标志物检测 21 一 血清总蛋白 白蛋白 球蛋白A G比值测定 1 血清总蛋白 TP serumtotalprotein 是血清所含各种蛋白的总称 包括血清A和G 各占60 和40 2 白蛋白 A albulin 为血液中主要蛋白质 由肝脏合成 其半衰期为15 19天 病毒性肝炎标志物检测 22 3 球蛋白 G globulin 为血清总蛋白中除去白蛋白以外的蛋白质 是多种蛋白质的混合物 包括 免疫球蛋白和补体 各种糖蛋白 脂蛋白 金属结合蛋白和酶球蛋白主要是由单核 吞噬细胞系统合成 与机体免疫有关4 A G比值 1 如 1称A G比值倒置 病毒性肝炎标志物检测 23 参考值 TP60 80g LA40 50g LG20 30g LA G1 5 2 5 1 病毒性肝炎标志物检测 24 临床意义 1 总蛋白增高1 血液浓缩 见于重度腹泻 呕吐 高热 休克等2 蛋白质合成 主要是G 如多发性骨髓瘤 肝硬化 淋巴瘤总蛋白降低1 血液稀释 各种原因所致的水盐潴留2 各种原因的A降低 病毒性肝炎标志物检测 25 临床意义 2 白蛋白降低1 合成不足 常见肝脏损害 慢性肝病时 A下降比急性肝炎明显 失代偿期肝硬化低于代偿期肝硬化 2 原料不足 长期饥饿 腹泻 消化道肿瘤和消化不良等3 去路增加丢失过多 肾炎 肾病综合征 大量胸腹水严重烧伤和失血消耗过多 甲亢 糖尿病 恶性肿瘤等白蛋白增高 少见 脱水致血液浓缩 病毒性肝炎标志物检测 26 临床意义 3 球蛋白增高1 感染 免疫反应 如TB 疟疾和血吸虫等2 多发性骨髓瘤3 自身免疫性疾病 如SLE 风湿热 类风湿性关节炎等球蛋白降低 合成降低 如肾上腺皮质功能亢进 先天性免疫缺陷 病毒性肝炎标志物检测 27 临床意义 4 A G比值A G比值反映A G浓度变化的关系正常值1 5 2 5 1肝功损害严重时 A下降 G上升 使A G比值变化当A G 1时 称A G比值倒置 病毒性肝炎标志物检测 28 二 血清蛋白电泳 原理 在碱性环境中 血清蛋白均带阴电荷 在电场中向阳极泳动 因各蛋白等电点和分子量各异 分子量小 阴电荷多者泳动快 分子量大 阴电荷少者泳动慢 电泳后从阳极开始 依次为 1 G 2 G G及 G五个区带 此种检查法称血清蛋白电泳 病毒性肝炎标志物检测 29 正常血清蛋白电泳图 病毒性肝炎标志物检测 30 参考值 0 61 0 71 1 G0 03 0 04 2 G0 06 0 10 G0 07 0 11 G0 09 0 18 醋酸纤维膜电泳法 病毒性肝炎标志物检测 31 临床意义 肝受损时 1 G 2 G G均降低自身抗原刺激淋巴系统 G升高1 肝炎急性 轻症 无变化加重时 1 G 2 G G均降低 G升高 病毒性肝炎标志物检测 32 临床意义 2 肝硬化 1 G 2 G G均降低 G升高3 肝癌 降低 1 G 2 G G升高偶见甲胎蛋白带出现 病毒性肝炎标志物检测 33 血清前蛋白测定 定义 PAB prealbumin 是一种载体蛋白 在电泳图谱上位于白蛋白前方看到一条染色很浅的区带 这就是前白蛋白前白蛋白在肝脏合成 其半寿期短 约2天 比白蛋白更能早期反映肝脏损害情况 为肝细胞损害早期灵敏的指标 病毒性肝炎标志物检测 34 PAB的意义 急性肝炎 PAB无下降慢性肝炎 肝硬化 肝癌 重症肝炎 PAB平均下降 50 慢性肝炎PAB的监测PAB持续降低 肝硬化PAB升高 预后较好PAB持续降低 预后较差肝移植病人的监测 反映移植肝的合成功能 病毒性肝炎标志物检测 35 凝血功能检查 肝脏严重受损时 肝脏合成凝血因子功能下降 故凝血时间延长1 凝血时间 CT 延长VII IX XI明显减少2 血浆凝血酶原时间 PT 延长I II V VII X缺乏3 活化的部分凝血活酶时间 APTT 延长XII XI IX VIII X V II等缺乏 病毒性肝炎标志物检测 36 胆红素代谢功能检查 病毒性肝炎标志物检测 37 病毒性肝炎标志物检测 38 胆红素种类 1 未结合胆红素 间接胆红素 即UCB 指游离胆红素和胆红素 白蛋白统称未结合胆红素2 结合胆红素或直接胆红素 即CB 指胆红素葡萄糖醛酯或其硫酸酯称结合胆红素3 总胆红素 STB 为非结合胆红素和结合胆红素的总量 病毒性肝炎标志物检测 39 UCB和CB的特点和理化性质 UCBCB结构特点游离胆红素与葡萄糖醛酸结合或胆红素 白蛋白分子量585重氮反应间接反应直接反应透过生物膜易 有毒性不易水溶性 病毒性肝炎标志物检测 40 参考值 总胆红素1 7 17 1umol L结合胆红素0 6 8umol L非结合胆红素1 7 10 28umol L 病毒性肝炎标志物检测 41 临床意义 1 总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度隐性黄疸17 1 34 2umol L轻度黄疸34 2 171umol L中度黄疸171 342umol L重度黄疸 342umol L 病毒性肝炎标志物检测 42 临床意义 2 根据黄疸程度判断黄疸原因 总胆红素水平 完全阻塞性黄疸 342umol L不完全阻塞性黄疸171 342umol L肝性黄疸17 1 171umol L溶血性黄疸 85 5umol L 病毒性肝炎标志物检测 43 临床意义 3 根据STB CB及UCB判断黄疸类型STB UCB溶血性黄疸STB CB阻塞性黄疸STB CB UCB肝性黄疸 病毒性肝炎标志物检测 44 正常人及三种黄疸的胆红素代谢检查结果 血清胆红素 umol L 尿STBCBUCBCB STB尿胆原胆红素正常人1 7 17 10 6 81 7 10 220 弱阳性 溶血性明显20 60强阳性 病毒性肝炎标志物检测 45 血清酶学检查 病毒性肝炎标志物检测 46 1 血清转氨酶测定 1 转氨酶 是将 氨基酸的氨基转移到 酮酸的酮基上的一种酶用于肝功能检查的主要是谷氨基丙酮酸转移酶 GPT 和谷氨酸草酰乙酸转移酶 GOT 病毒性肝炎标志物检测 47 2 GPT经WHO命名为丙氨酸氨基转移酶 ALT 存在于肝细胞胞浆中 因肝内该酶活性较血清约高100倍 故只要有1 肝细胞坏死 即可使血清中的ALT增高1倍 因此 它是最敏感的肝功能检测指标之一 病毒性肝炎标志物检测 48 3 GOT现名天门冬氨酸氨基转移酶 AST 此酶在心肌含量最高 肝脏为第三 在肝损害时 其漏出量也较ALT低 病毒性肝炎标志物检测 49 临床意义 1 急性病毒性肝炎转氨酶阳性率80 100 A 在发病前 ALT与AST即有升高 最高值 500U 随病情好转逐渐下降至正常B 病情恶化 转氨酶反下降 是肝细胞广泛坏死的表现C 在急性肝炎的恢复期 如转氨酶在100U左右波动或再上升 提示急性转为慢性 病毒性肝炎标志物检测 50 临床意义 2 慢性肝炎和脂肪肝 轻度上升 100 200U 或正常 3 肝硬化 肝癌 轻度上升 100 200U 或正常 病毒性肝炎标志物检测 51 2 谷氨酰转移酶 GT 1 G活性肾 胰 肝2 在肝 GT广泛分布于肝细胞毛细胆管侧和整个胆管系统 在胆汁淤滞时 肝内 GT合成亢进 肝癌可合成 GT3 参考值男11 50U L女7 30U L 病毒性肝炎标志物检测 52 意义 1 肝癌肝癌合成A 肝内阻塞胆汁淤滞 GT肝癌细胞产生B 阳性率 95 2 阻塞性黄疸 GT 上升幅度与黄疸程度平行 病毒性肝炎标志物检测 53 意义 3 急性肝炎 中度升高 1000U 病毒性肝炎标志物检测 54 肝癌标志物的检查 在肝细胞癌时 由于肝细胞功能异常 产生出一些与肝细胞癌密切相关的蛋白质 称为肝癌的肿瘤标志物 对肝癌的诊断有重要意义 病毒性肝炎标志物检测 55 1 AFP测定 1 AFP是胎儿性蛋白 为胎儿所特有 出生后不久转为阴性 或仅含微量在原发性肝癌时升高因而 测定AFP在血中的浓度 对此类疾病的诊断有重要意义 病毒性肝炎标志物检测 56 2 来源 胎肝和卵黄囊与肝再生时 分裂细胞数量呈正相关 3 参考值 成人 25ug L3周6个月的小儿 39 L 病毒性肝炎标志物检测 57 4 意义 1 原发性肝癌定性 定量 500ug L持续1个月以上 能排除妊娠 活动性肝炎 幼儿性睾丸或卵巢 畸胎瘤等可确诊肝癌 2 肝炎病毒性肝炎肝细胞重新具有了产生AFP的能力 急性 慢性肝炎均可升高 但 300ug L 随着肝细胞的修复 AFP下降 为一过性的升高 病毒性肝炎标志物检测 58 4 意义 3 妊娠3 4月以后AFP升高7 8月高峰 但 400ug L分娩后约3周降至正常 4 其他肝硬化 活动期 先天性胆管闭锁等AFP升高 病毒性肝炎标志物检测 59 2 癌胚抗原 CEA 测定 1 癌胚抗原是一种存在于成人癌组织中的胎儿性蛋白 可根据免疫学原理检测2 参考值0 5ug L 病毒性肝炎标志物检测 60 2 癌胚抗原 CEA 测定 1 消化道肿瘤A 无助癌的早期诊断B 观察术后过程 判断预后 预测再发的指标 2 原发性肝癌与转移性肝癌的鉴别价值 较大转移性肝癌CEA阳性率高达90 3 溃疡 肝硬化 阻塞性黄疸及吸烟者和老人CEA可轻度升高 病毒性肝炎标志物检测 61 肝病检查项目的选择 病毒性肝炎标志物检测 62 选择原则 1 肝功检查无特异性强的检查方法 而且检查项目繁多 选择项目应考虑的选择原则 1 病情需要2 敏感性 特异性高3 实验室条件允许 病毒性肝炎标志物检测 63 2 选择项目 1 健康查体 ALT 肝炎病毒标志物2 肝炎诊断 急性 ALT 肝炎病毒标志物慢性 ALT 肝炎病毒标志物加上AST ALP TP A G GT 血清蛋白电泳 病毒性肝炎标志物检测 64 2 选择项目 3 黄疸 一般总胆红素 ALT加上AFP4 原发性肝癌 除一般肝功 加测AFP GT CEA等 病毒性肝炎标志物检测 65 血气分析 病毒性肝炎标志物检测 66 1 酸碱度 pH 参考值7 35 7 45 7 35为酸血症 7 45属碱血症 但pH正常并不能完全排除无酸碱失衡 2 二氧化碳分压 PCO2 参考值4 65 5 98kPa 35 45mmHg 乘0 03即为H2CO3含量 超出或低于参考值称高 低碳酸血症 55mmHg有抑制呼吸中枢危险 是判断各型酸碱中毒主要指标 3 二氧化碳总量 TCO2 参考值24 32mmHg 代表血中CO2和HCO3之和 在体内受呼吸和代谢二方面影响 代谢性酸中毒时明显下降 碱中毒时明显上升 病毒性肝炎标志物检测 67 4 氧分压 PO2 参考值10 64 13 3kpa 80 100mmHg 低于55mmHg即有呼吸衰竭 30mmHg可有生命危险 5 氧饱和度 SatO2 参考值3 5kPa 26 6mmHg 6 实际碳酸氢根 AB 参考值21 4 27 3mmHg 标准碳酸氢根 SB 参考值21 3 24 8mmol L AB是体内代谢性酸碱失衡重要指标 在特定条件下计算出SB也反映代谢因素 二者正常为酸碱内稳正常 二者皆低为代谢性酸中毒 未代偿 二者皆高为代谢性碱中毒 未代偿 AB SB为呼吸性酸中毒 病毒性肝炎标志物检测 68 7 剩余碱 BE 参考值 3 3mmol L 正值指示增加 负值为降低 8 阴离子隙 AG 参考值8 16mmol L 是早期发