谈美洲大蠊提取物对实验性肝纤维化的影响

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/5谈美洲大蠊提取物对实验性肝纤维化的影响摘要目的探讨美洲大蠊提取物对四氯化碳（CCL4）所致实验性肝纤维化的影响。方法采用CCL4复制小鼠肝纤维化模型，同时用G/KG的美洲大蠊提取物灌胃治疗，测定血清丙氨酸氨基转移酶ALT、天门冬氨酸氨基转移酶AST、白蛋白ALB、透明质酸HA，型前胶原PC,IV型胶原IVC，层粘蛋白LN，并以光镜现察肝脏组织学改变，进行炎症活动度分级及肝纤维化分期。结果美洲大蠊提取物有降低ALT，AST的作用，并显能著降低HA，LN，PC和C。经治疗后的肝胜细胞变性、坏死及纤维组织增生明显减少。结论美洲大蠊提取物具有抗实验性肝纤维化的作用。关键词美洲大蠊提取物；肝纤维化；四氯化碳；小鼠昆虫作为一类新的医药资源宝库，越来越受到国内外学者的重视。近年研究表明，美洲大蠊提取物（ABSTRACTOFPERIPLANETAAMERICANA，APA）对实验性肝损伤有较好的保护作用，能抑制雏鸭体内鸭乙型肝炎病毒的复制1。但对肝纤维化是否有作用，目前未见报道。为探讨APA对肝纤维化的防治效果，本研究用CCL4复制小鼠肝纤维化模精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/5型，初步观察APA对肝纤维化影响。1材料与方法动物健康雄性昆明种小鼠40只，胎龄34周，体质量1822G，由昆明医学院动物科提供，实验过程中饲养条件相同，而且定期清洁,消毒。试剂CCL4，分析纯，由天津化学试剂三厂生产，批号080618。橄榄油，化学纯，由上海国药集团化学试剂有限公司提供，批号F20080219。透明质酸HA、层粘蛋白LN、型前胶原PC、IV型胶原C、肝纤维化放免试剂盒由北京北方生物技术研究所提供，批号081020。MASSON试剂盒由福州迈新生物有限公司提供，批号811048003。主要药物APA原药，为昆明赛诺制药有限公司提供，批号03122001。用蒸馏水配制成浓度为的混悬液。临用时用力摇匀。动物用量均按生药量计算。秋水仙碱（购自云南植物药业有限公司，批号20080401）1MG溶于100ML蒸馏水中，冰箱保存备用。2方法动物模型的制备20CCL4橄榄油溶液按ML/10G体质量给小鼠颈背部皮下注射，2次/周，连续6周。动物分组40只小鼠随机分成4组，10只/组，即正常对照组、模型组、APA治疗组、秋水仙碱对照组。正常对照精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/5组动物仅皮下注射橄榄油溶液；模型组和药物实验组动物皮下注射20CCL4橄榄油溶液（ML/10G体质量），2次/周,连续6周。造模当日即开始灌胃给予药物或蒸馏水，1次/D，连续6周，直至动物处死空白对照组及模型组动物按ML/10G体质量灌胃蒸馏水；秋水仙碱组按ML/10G体重灌胃，用量为MG/KG；APA治疗组给原药ML/10G体质量灌胃（G/KG，相当于临床60KG成人每日用量的25倍）。观测指标与标本采集实验过程中观察动物的体质量、食欲、神态等一般状况。分别于实验开始后的第6周末剖杀动物，采集血液和肝脏标本。剖杀前24H禁食不禁水，剖杀时先以乙醚吸入麻醉后摘眼球用毛细玻管眼眶取血供生化检测，再立即剖杀动物，取肝左叶中部、左叶及右上叶前部，进行组织病理检查。采用放免法（按试剂盒说明书进行）测定血清HA,LN，PC，C水平。采用全自动生化分析仪测定ALT，AST，TBIL和ALB。病理组织学检查肝组织行石蜡包埋，常规切片，HE及MASSON染色，光镜下观察肝组织学改变及胶原纤维增生情况，按照病毒性肝炎防治方案的标准2，进行炎症活动度分级及肝纤维化分期。有两期以上肝纤维化形成，即确定肝纤维化模型复制成功。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/5统计方法采用统计软件分析数据，实验所得数据用S表示，组间两两比较采用Q检验，等级资料用秩和检验。作为显著性检验标准。P2HEPATICFIBROSISSTUDYGROUPOFCHINESELIVERDISEASESCONSENSUSONEVALUATIONOFTHEDIAGNOSISANDEFFICACYOFHEPATICFIBROSISJCHINESEJHEPATOL,2002,1053273LAMIREAUT,DESMOULIEREA,BIOULACSAGEP,ETALMECHANISMSOFHEPATICFIBROGENESISJARCHPEDIATR,2002,93924LICH，PIAODM，XUWX，ETALMORPHOLOGICALANDSERUMHYALURONICACID，LAMININANDTYPECOLLAGENCHANGESINDIMETHYLNITROSAMINEINDUCEDHEPATICFIBROSISOFRATWORLDJGASTROENTEROL，2005，114876205雷力民，姜婷婷，林寿宁，等肝纤维化的中药治疗作用机制研究J医学综述，2008，14（8）12426MANNDA,SMARTDETRANSCRIPTIONALREGULATIONOFHEPATICSTELLATECELLACTIVATIONJGUT,2002,508917OKAZAKII,WATANABET,HOZAWAS,ETALREVERSIBILITYOFHEPATICFIBROSISFROMTHEFIRST精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/5REPORTOFCOLLAGENASEINTH