第七章-芳香胺类药物分析VIP

第七章芳香胺类药物的分析 AnalysisofAromaticamines 学习要求 了解 苯丙胺类的鉴别试验 特殊杂质检查和含量测定 芳香胺类药物的体内分析方法 理解 苯乙胺类药物鉴别反应 非水溶液滴定法 比色法 紫外分光光度法和高效液相色谱法测定本类药物的原理及应用 掌握 本类药物的结构特征 理化性质与分析方法的关系 芳胺类药物鉴别反应 对乙酰氨基酚 盐酸普鲁卡因注射液中特殊杂质及其检查方法 含量测定的亚硝酸钠滴定法 重点难点 重点 各类药物的特征鉴别试验和共性鉴别试验 亚硝酸钠滴定法的原理 测定的主要条件 终点指示方法及注意事项 难点 亚硝酸钠滴定法测定的主要条件 芳香胺 芳胺类 芳烃胺类 benzocaine procainehydrochloride paracetamol lidocainehydrochloride 对氨基苯甲酸酯类 酰胺类 adrenaline dopaminehydrochloride oxprenolol carteololhydrochloride 苯乙胺类 苯丙胺类 Contents 第一节芳胺类药物的分析 一 对氨基苯甲酸酯类 一 基本结构与典型药物 第一节芳胺类药物的分析 一 对氨基苯甲酸酯类 苯佐卡因 benzocaine 第一节芳胺类药物的分析 一 对氨基苯甲酸酯类 盐酸普鲁卡因 procainehydrochloride 盐酸氯普鲁卡因 chloroprocainehydrochloride 第一节芳胺类药物的分析 一 对氨基苯甲酸酯类 盐酸丁卡因 tetracainehydrochloride 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 1 芳伯氨基 重氮化 偶合反应 与芳醛缩合成Schiff碱 易氧化变色等 可用重氮化 偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 2 水解 受光线 热 碱的影响 盐酸丁卡因 对丁氨基苯甲酸 BABA 其余药物 对氨基苯甲酸 PABA 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 3 弱碱性 叔胺氮原子 生物碱沉淀剂或重金属离子发生沉淀反应 除苯佐卡因外 可用于鉴别或非水减量法测定含量 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 4 溶解性 游离碱 油状液体或低熔点固体难溶于水 易溶于有机溶剂 盐酸盐白色结晶粉末 具一点的熔点 易溶于水和乙醇 难溶于有机溶剂 HCl 第一节芳胺类药物的分析 二 酰胺类 一 基本结构与典型药物 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 对乙酰氨基酚 paracetamol 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 醋氨苯砜 acedapsone 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 盐酸利多卡因 lidocainehydrochloride 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 盐酸布比卡因 bupivacainehydrochloride 1 水解 芳伯胺基 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 重氮化 偶合 水解速度 对乙酰氨基酚较快盐酸利多卡因 盐酸布比卡因 盐酸罗哌卡因 盐酸妥卡尼较难水解 paracetamolacedapsone 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 2 水解产物易酯化 水解产物 醋酸 乙醇 硫酸 醋酸乙酯 特殊香味 paracetamol 3 对乙酰氨基酚 三氯化铁反应 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 专属鉴别 lidocaine bupivacaine 4 弱碱性 叔胺氮原子 生物沉淀剂 沉淀 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature 5 酰胺氮原子与金属离子络合显色 二 酰胺类 第一节芳胺类药物的分析 二 主要性质 Feature lidocaine bupivacaine Cu2 Co2 三 鉴别试验 分子中存在芳伯胺基或存在潜在芳伯胺基的药物 均可与亚硝酸钠发生重氮化反应 生成的重氮盐可与碱性 萘酚偶合生成有色的偶氮染料 一 重氮化 偶合反应 第一节芳胺类药物的分析 橙黄 猩红 1 游离芳伯胺基 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺 第一节芳胺类药物的分析 对氨基水杨酸钠PAS Na 第一节芳胺类药物的分析 盐酸普鲁卡因Ch P 2005 鉴别 4 本品显芳香第一胺类的鉴别反应 附录 取供试品约50mg 加稀盐酸1ml 必要时缓缓煮沸使溶解 放冷 加0 1mol L亚硝酸钠溶液数滴 滴加碱性 萘酚试液数滴 视供试品不同 生成由橙黄到猩红色沉淀 2 潜在芳伯胺基 盐酸或硫酸水解 第一节芳胺类药物的分析 对乙酰氨基酚 醋氨苯砜 贝诺酯benorilate 第一节芳胺类药物的分析 对乙酰氨基酚Ch P 2005 鉴别 2 取本品约0 1g 加稀盐酸5ml 置水浴中加热40分钟 放冷 取0 5ml 滴加亚硝酸钠试液5滴 摇匀 用水3ml稀释后 加碱性 萘酚试液2ml 振摇 即显红色 注意 区别盐酸丁卡因 乳白色沉淀 第一节芳胺类药物的分析 芳香仲胺 N 亚硝基 蓝紫色 第一节芳胺类药物的分析 二 三氯化铁反应 1 与铜和钴离子反应 具有芳酰胺结构 如 盐酸利多卡因 盐酸布比卡因 第一节芳胺类药物的分析 三 金属离子反应 硫酸铜 碳酸钠试液 蓝紫色配合物 氯仿层显黄色 氯化钴 酸性溶液 亮绿色细小钴盐沉淀 2 羟肟酸铁盐反应 具有芳酰胺结构 如 盐酸普鲁卡因胺 第一节芳胺类药物的分析 棕色至棕黑色 3 与汞离子反应 a 芳酰胺类 如盐酸利多卡因 b 对氨基苯甲酸酯类 如苯佐卡因 第一节芳胺类药物的分析 1 盐酸普鲁卡因的鉴别 Ch P2005 第一节芳胺类药物的分析 四 水解产物的反应 盐酸普鲁卡因 10 NaOH溶液 白色 普鲁卡因 使润湿的红色石蕊试纸变蓝 能溶于过量的盐酸 第一节芳胺类药物的分析 2 苯佐卡因的鉴别 Ch P2005 鉴别 1 取本品约0 1g 加氢氧化钠试液5ml 煮沸 即有乙醇生成 加碘试液 加热 即生成黄色沉淀 并发生碘仿的臭气 第一节芳胺类药物的分析 五 制备衍生物测定熔点 第一节芳胺类药物的分析 六 紫外分光光度法 盐酸布比卡因Ch P 2005 鉴别 2 取本品 精密称定 按干燥品计算 加0 01mol L盐酸溶液制成每1ml中含0 40mg的溶液 照紫外 可见分光光度法 附录 A 测定 在263nm与271nm的波长处有最大吸收 其吸光度分别为0 53 0 58与0 43 0 48 第一节芳胺类药物的分析 紫外特征吸收光谱 第一节芳胺类药物的分析 七 红外分光光度法 盐酸布比卡因Ch P 2005 鉴别 3 本品的红外光吸收图谱与对照的图谱 光谱集324图 一致 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因胺 第一节芳胺类药物的分析 二乙胺盐 高波数移动 酯基 第一节芳胺类药物的分析 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因胺 波数cm 1波数cm 1 酯羰基 C O1692 酯基 C O1271 1170 1115 二乙胺盐 N H25852645 略向高波数 1550 N H酰胺 带 1280 N H酰胺 带 第一节芳胺类药物的分析 四 特殊杂质检查 对乙酰氨基酚 第一节芳胺类药物的分析 一 对乙酰氨基酚的特殊杂质检查 合成工艺 1 酸度 1 来源 生产过程引进酸性杂质 贮存过程水解产物醋酸 2 适宜pH为5 5 6 5 本品1 的水溶液 偏酸或偏碱易发生水解 从而影响质量 2 氯化物3 硫酸盐4 水分 干燥失重 5 炽灼残渣6 重金属 第一节芳胺类药物的分析 一般杂质检查项目 1 乙醇溶液的澄清度与颜色 中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色 比浊 比色 第一节芳胺类药物的分析 特殊杂质检查项目 2 有关物质 杂质来源 中间体 副产物及分解产物 例 对氨基酚 对氯乙酰苯胺 O 乙酰基对乙酰氨基酚 偶氮苯 氧化偶氮苯 苯醌和醌亚胺等 检查方法 TLC以对氯乙酰苯胺为对照品 TLC限度检查 判断 置紫外灯 254nm 下检视 供试品如显杂质斑点 与对照溶液的主斑点比较 不得更大 更深 第一节芳胺类药物的分析 3 对氨基酚 杂质来源 乙酰化不完全或贮藏不当引起水解 毒性较大并有色泽 第一节芳胺类药物的分析 反应原理 检查方法 取本品1 0g 加甲醇溶液 1 2 20ml溶解后 加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml 摇匀 放置30min 如显色 与对乙酰氨基酚对照品1 0g加对氨基酚50 g用同一方法制成的对照液比较 不得更深 第一节芳胺类药物的分析 杂质限量 黄色 检查方法 TLC法 对氨基苯甲酸对照品对照 对二甲氨基苯甲醛溶液显色 第一节芳胺类药物的分析 二 盐酸普鲁卡因注射液中的特殊杂质检查 杂质来源 限度 水解产物对氨基苯甲酸 不得超过1 2 容量分析方法 volumetricanalysis 分光光度法 spectrometry 色谱法 chrometography 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 非水溶液滴定法 non aqueoustitrimetry 第一节芳胺类药物的分析 五 含量测定 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 基本原理 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 基本原理 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定 具潜在芳伯氨基的药物 如具酰胺基药物 对乙酰氨基酚等 经水解 芳香族硝基化合物 如无味氯霉素 经还原 也可用本法测定 NaNO2 HCl HNO2 NaClHNO2 HCl NOCl H2O 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 测定的主要条件 1 加入适量KBr加速反应KBr为催化剂 在盐酸存在下 重氮化反应的机理为 慢 快 快 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 测定的主要条件 1 K1 2 K2 平衡常数K1 300K2加入KBr 可增大被测溶液中NO 的浓度 所以能加快重氮化反应速度 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 测定的主要条件 2 加入过量盐酸加速反应 重氮化反应速度加快 重氮盐在酸性溶液中稳定 防止生成偶氮氨基化合物 而影响测定结果 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 测定的主要条件 在不同酸中重氮化反应的速度为 HBr HCl H2SO4 HNO3盐酸1 2 5 6 注意 酸度过大 阻碍芳伯氨基的有力 影响重氮化反应速度 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 测定的主要条件 3 室温条件下滴定反应温度 10 30 4 滴定速度 先快后慢滴定管尖端插入液面下2 3 滴定液一次大部分放下近终点时改为慢速滴定 避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 指示终点的方法 1 永停滴定法 Ch P 2005 BP 2004 永停滴定法 附录 A 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 指示终点的方法 2 电位法 USP 28 3 外指示剂法 KI 淀粉糊剂或试纸2NaNO2 2KI 4HCl 2NO I2 2KCl 2NaCl 2H2O 4 内指示剂法 中性红不可逆指示剂 第一节芳胺类药物的分析 一 亚硝酸钠滴定法 sodiumnitritemethod 测定方法 盐酸普鲁卡因Ch P 2005 取本品约0 6g 精密称定 照永停滴定法 附录 A 在15 25 用亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 滴定 每1ml亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 相当于27 28mg的C13H20N2O2 HCl 小结 1 滴定温度 室温10 30 若温度过高 使HNO2逸失 并且重氮盐分解 Ar N N Cl H2O Ar OH N2 HCl2 加入KBr 加快反应3 酸度 加入盐酸有利于 重氮化反应速度加快 重氮盐在酸性液中稳定 防止偶氮氨基化合物的生成 4 滴定管尖端插入液面下2 3处 防止HNO2挥发分解 5 滴定速度 先快后慢 重氮化反应为分子反应 接近终点时应缓缓加入NaNO2 不断搅拌 6 指示终点方法 永停滴定法 电位法 外指示剂法 碘化钾 淀粉 内指示剂法 中性红 第一节芳胺类药物的分析 弱碱性 高氯酸非水滴定 注意 滴定前滴加醋酸汞溶液 以除去氢卤酸的干扰 指示剂 结晶紫 指示剂 萘酚苯甲醇 第一节芳胺类药物的分析 二 非水溶液滴定法 non aqueoustitrimetry 盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程 第一节芳胺类药物的分析 二 非水溶液滴定法 non aqueoustitrimetry 对乙酰氨基酚在0 4 氢氧化钠溶液中 于257nm波长处有最大吸收 其紫外吸收光谱特征 可用于其原料及其制剂的含量测定 第一节芳胺类药物的分析 三 分光光度法 对乙酰氨基酚原料 片剂 咀嚼片 泡腾片 注射液 栓剂 胶囊 颗粒 对乙酰氨基酚Ch P 2005 含量测定 取本品约40mg 精密称定 置250ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液50ml溶解后 加水至刻度 摇匀 精密量取5ml 至100ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液10ml 加水至刻度 摇匀 照紫外 可见分光光度法 药典Chp2005版附录 A 在257nm的波长处测定吸光度 按C8H9NO2的吸收系数 为715计算 即得 第一节芳胺类药物的分析 三 分光光度法 第一节芳胺类药物的分析 三 分光光度法 W 42mg V 250ml5ml 100mlD 100 5A 0 594 对乙酰氨基酚泡腾片的含量测定 第一节芳胺类药物的分析 四 HPLC 五 体内药物分析 应用1 对乙酰氨基酚急性中毒的血药浓度检测析 1 预处理方法血浆 硫酸锌去蛋白 乙醚提取 氮气流挥干 水溶解2 测定方法加预柱 反相高效液相色谱法测定 应用2 高效毛细管电泳法测定人血浆中的普鲁卡因 利多卡因 丁卡因和布比卡因 第一节芳胺类药物的分析 芳胺类 对氨基苯甲酸酯类酰胺类一 结构与性质1 芳伯氨基特性 2 水解特性 酯键 或酰胺键 易水解 3 弱碱性 4 酚羟基的特性 5 与重金属离子发生沉淀反应 小结 第一节芳胺类药物的分析 小结 二 鉴别试验 重点 重氮化 偶合反应 三氯化铁反应 与金属离子的反应 水解产物的反应三 特殊杂质检查对乙酰氨基酚 对氨基酚盐酸普鲁卡因注射液 对氨基苯甲酸四 含量测定亚硝酸钠滴定法的原理 方法 条件 重点 难点 第一节芳胺类药物的分析 作业 1 取标示量为0 3g的对乙酰氨基酚片10片 总重为3 3660g 称出44 9mg 置250ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液50ml及水50ml 振摇15min 加水至刻度 摇匀 用干燥滤纸滤过 弃去初滤液 精密量取续滤液5ml 置100ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液10ml 加水至刻度 摇匀 在257nm的波长处测的吸光度为0 583 按C8H9NO2的吸收系数为715计算本片剂的标示量 2 设计 用化学方法区别普鲁卡因和丁卡因 第二节苯乙胺类药物 Phenethylamine 一 基本结构与性质 弱碱性 烃胺基侧链 仲胺氮 弱碱性 游离碱难溶于水 易溶于有机溶剂 其盐可溶于水 酚羟基特性 邻苯二酚 或苯酚 结构 与金属离子络合呈色 在空气中或遇光 热易氧化 色泽变深 在碱性溶液中更易变色 光学活性 手性碳原子 具有旋光性 苯环取代基特性 如盐酸克伦特罗芳伯氨基 紫外 红外吸收特性 二 Identification 一 与三氯化铁反应 与甲醛 硫酸反应 二 Identification 二 氧化反应 酚羟基 易被碘 过氧化氢 铁氰化钾氧化呈现不同颜色 二 Identification 三 UV和IR 四 亚硝基铁氰化钠反应 脂肪族伯胺的专属反应 二 Identification 五 双缩脲反应 盐酸麻黄碱 盐酸伪麻黄碱 芳环侧链具有氨基醇结构 可显双缩脲特征反应 例 Chp鉴别盐酸麻黄碱取本品10mg 1ml水溶解后 加硫酸铜试液2滴与20 氢氧化钠液1ml 即显蓝紫色 加乙醚1ml振摇 放置 乙醚层显紫红色 水层变为蓝色 三 Detectionofspecificimpurities 一 酮体检查 生产工艺 酮体氢化还原制得 若氢化不完全则引入酮体杂质 降解产物 肾上腺素红 多聚体 三 Detectionofspecificimpurities 三 Detectionofspecificimpurities 紫外分光光度法检查酮体的条件及要求 三 Detectionofspecificimpurities 二 有关物质 盐酸安溴索 HPLC盐酸苯乙双胍 纸色谱法盐酸特布他林 TLC 四 Assay 原料 非水溶液滴定法 溴量法制剂 比色法 提取容量法 紫外分光光度法 高效液相色谱法 四 Assay 一 非水溶液滴定法 弱碱性 冰醋酸为溶剂醋酸汞消除氢卤酸的干扰结晶紫为指示剂 盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲醇 也可电位法指示终点 若碱性较弱则加醋酐使突跃明显加入醋酐注意防止氨基被乙酰化 所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐 例 重酒石酸去甲肾上腺素 直接滴定盐酸克伦特罗 加醋酸汞消除氢卤酸干扰 由于碱