小鼠缺氧实验实验报告

精品文档篇二：缺氧 缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响 【摘要】目的：本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法：通过复制缺氧动物模型，观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。通过测定耗氧量和小鼠的存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。结果：中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响与对照组相比，存活时间和总耗氧率有显著性差异；复制不同原因造成的不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。结论：给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率，延长其存活时间（p<0.01）。co中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间，降低呼吸频率。美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠的作用，已定程度延长小鼠存活时间，延缓呼吸频率的下降。 【关键词】缺氧 氯丙嗪 总耗氧率 co 亚硝酸盐 美兰 存活时间 当供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型，不同类型的缺氧，机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。 1.材料和方法 1.1实验动物：小白鼠（雌性）。 1.2 药品：氯丙嗪(chlorpromazine) 、钠石灰（soda lime)，亚硝酸钠（ sodium nitrite ) 、亚甲基蓝(美蓝）（methylene blue，mb）、 0.9nacl (physiological saline solution) 、co(carbon monoxide)。 1.3 器材：100、500ml广口瓶和测耗氧装置。 1.4 方法 1.4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响 取2只性别相同体重相近的小鼠，准确称取体重，并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组。氯丙嗪组按0.1ml/10g体重腹腔注射0.25氯丙嗪，随即安放在冰浴的纱布上 1015min，使呼吸频率降至7080次/min；生理盐水组按0.1ml/10g体重腹腔注射生理盐水，室温放置1015min，作为对照。之后将2只小鼠分别放入100ml的广口瓶内，连接好测耗氧装置。如右图。 1.4.2 不同原因造成的缺氧 取2只性别相同体重相近的小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有5g钠石灰的100ml密闭瓶中；一氧化碳中毒组小鼠放入500ml密闭瓶，注入10ml co气体。 另取2只性别相同体重相近的小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射50g/l亚硝酸纳0.2ml，并随即腹腔注射生理盐水0.2ml；亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射50g/l亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射10g/l亚甲基蓝0.2ml 。 2.观察项目 2.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响 记录下小鼠的体重w（g）。从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡，分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠的存活时间t（min）、总耗氧量a（ml）。按以下公式计算出总耗氧率rml/（gmin）： rml/（gmin）= a（ml）w（g）t（min） 2.2 不同原因造成的缺氧 乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组：处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率（次/min）。待塞紧瓶塞开始记时后，每隔5min测一次呼吸频率（次/min），并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。 亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组：处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率（次/min）。待注射药品后，每隔5min测一次呼吸频率（次/min），并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。 将4只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色的不同。 3.实验结果 3.1中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响 氯丙嗪组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重无显著性差异（p>0.05）；氯丙嗪组小鼠的耗氧量为12.75.02 ml，生理盐水组小鼠的耗氧量为16.03.01 ml，两者无明显差异（p>0.05）；氯丙嗪组小鼠耐缺氧存活时间为44.717.21 min，生理盐水组小鼠耐缺氧时间为21.03.61，两者相比有高度显著性差异 （p<0.01）；氯丙嗪组小鼠的耗氧率为0.0130.005 (ml/g/min)，生理盐水组小鼠的耗氧率0.030.002 (ml/g/min)，两者相比有高度显著性差异（p<0.01）。见表1。 表1. 氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响实验结果统计表 小鼠体重（g） 样本 1 2 3 4 5 6 7 8 9 对照 23 19 实验 22 25 22 25 24 22 23 22 22 23.01.32& 总耗氧量（ml） 对照 19.5 14.0 16.0 14.0 17.4 17.0 11.5 21.0 13.5 16.0 3.01 实验 存活时间（min） 总耗氧率（ml/g/min) 对照 实验 47 52 35 23 24 59 31 60 71 44.717.21* 对照 0.034 0.035 0.033 0.035 0.033 0.034 0.031 0.037 0.029 0.03 0.002 实验 0.01 0.011 0.013 0.014 0.016 0.015 0.024 0.005 0.012 0.0130.005# 10.5 25 14.3 21 10.0 8.0 9.5 19.9 17.0 6.0 19.0 12.75.02$ 22 16 21 22 15 26 21 21.0 3.61 22 25 25 23 25 22 22 22.9 x?s 1.96 注：*p<0.01 vs对照组 ；p<0.01 vs对照组；&p>0.05 vs对照组,$p>0.05 vs 对照组 3.2不同原因造成的缺氧 由表2可知，亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间最短，其次为co中毒组。存活时间最长的是亚硝酸钠美兰组，可见美兰具有抗亚硝酸钠中毒的作用。 表2. 乏氧、co中毒、亚硝酸钠中毒小鼠的呼吸频率(次/10秒） 缺氧类型 乏氧 co中毒 亚硝酸钠 亚硝酸钠 美兰 0min 29.74.90 29.75.90 29.73.54 29.7 5.68 5min 31.26.96 24.78.72 26.17.13 25.9 4.99 10min 30.47.52 26.89.31 28.7 8.38 15min 25.08.97 28.5 6.02 20min 30.16.83 25min 29.56.07 30min 28.96.24 3.3亚硝酸钠中毒与亚硝酸钠+美兰的两组小鼠的存活时间有显著性差异，美兰组存活时间显著延长(p<0.01)。见表3。 表3. 亚硝酸盐中毒及其美兰的治疗效果 缺氧类型 亚硝酸盐中毒性缺氧 亚硝酸盐中毒性+美兰 存活时间 9.561.59 48.6714.23* 注：p<0.01 3.4 分别观察乏氧性缺氧组、一氧化碳中毒组、亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组的小鼠肝脏组织颜色，如表3。 表4. 乏氧、co中毒、亚硝酸钠中毒的小鼠存活时间和肝血、耳尾唇颜色比较 类别 乏氧 体重(g) 19 存活时间(min) 18 肝血颜色 暗红色 耳尾唇颜色 青紫色（紫绀） co nano2 nano2+mb 22 18 18.5 7 12 30 樱桃红色 深咖啡色 浅咖啡色 樱桃红色 青石板色 青石板色，稍浅 4. 讨论 4.1 实验结果显示氯丙嗪组的存活时间显著长于生理盐水组，耗氧率也显著低于生理盐水组。氯丙嗪为吩噻嗪类抗精神病药物，主要阻断脑内多巴胺受体和肾上腺素受体和m胆碱受体，具有神经安定作用，它对中枢神经系统有较强的抑制作用。小鼠注射氯丙嗪后，置于低温使其进入假冬眠状态。小鼠外界活动停止，新陈代谢率降至最低，因此能量利用减少，单位时间的耗氧量减少，即耗氧率减小。在氧总量相等的情况下，存活时间就比生理盐水组长。 4.2 乏氧性缺氧，主要表现为动脉血氧分压降低，氧含量减少，组织供养不足。正常毛细血管的血液中氧离血红蛋白浓度约为26g/l。乏氧性缺氧时，动静脉血中的氧离血红蛋白浓度增高。当毛细血管血液中氧离血红蛋白浓度达到或超过50 g/l时，可使皮肤和粘膜呈青紫色。 co与hb的亲和力比o2大210倍，hb与co结合形成碳氢hb，从而失去运氧功能。co同时还能抑制红细胞内糖酵解，使其2,3-dpg生成减少，氧离曲线左移，妨碍hbo2中的氧解离，从而造成组织严重缺氧。此时外呼吸功能正常，故动脉血氧分压及血氧饱和度正常，但hb数量减少或性质改变，使血氧容量降低。组织中hbco增多，故皮肤、粘膜呈樱桃红色。 亚硝酸盐可使hb中二价铁氧化成三价铁，形成高铁hb（hbfe3+oh），三价铁因与羟基牢固结合而丧失携氧能力，加上hb四个二价铁中有一部分氧化为三价铁后使剩余的fe2+与氧亲和力增高，导致氧离曲线左移，使组织缺氧。高铁hb呈咖啡色或青石板色，因而使皮肤和粘膜呈现相同颜色2。低浓度美兰为还原剂，抑制了氧化剂（亚硝酸钠）的中毒反应，中毒后即刻肌注可有效使小鼠存活时间延长2倍以上。本实验结果也显示，亚硝酸钠+美兰组小鼠的存活时间明显长于亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间（表3），说明美兰具有较好的拮抗作用。 4.3 钠石灰的作用：钠石灰在两个实验中的用途也有很大区别：实验一中缺氧瓶内钠石灰吸收小鼠呼吸产生的co2造成负压，利于正确地测出耗氧量；实验二中加入钠石灰是为了排除高碳酸血症对缺氧实验的影响。 参考资料： 1. 陆源,夏强. 生理科学实验教程. 杭州：浙江大学出版社,2004：240. 2. 陈季强.基础医学各论（上册）.北京：科学出版社，2004：492，495496.篇三：小鼠缺氧模型及其分析 缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素 高伟飞 （浙江中医药大学滨江学院 10级 临床专业临滨1班4组 20102090114） 一、实验目的： 1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用 2.复制几种类型缺氧的模型，观察血液颜色的特点，分析其机制 根据大纲要求： 掌握概念：缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧，紫绀、肠源性紫绀。 熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。 熟悉反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度，动静脉血氧含量差)。 掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制，掌握各型缺氧的特征（血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化）。 二、实验原理： 当组织供应组织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。不同类型的缺氧，其机体的代偿适应性反应和症状也不同。根据缺氧原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。 影响机体对缺氧耐受性的因素很多，如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。本实验才缺氧的不同环节入手观察呼吸变化及皮肤黏膜的颜色改变。实验通过动物的不同代谢状况、中枢神经系统功能和动物所处环境温度，观察动物的缺氧耐受性。 三、实验对象：小鼠 四、实验材料：电子秤、注射器、钠石灰、广口瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸；生理盐水、美兰亚硝酸钠、氯丙嗪、冰块、量筒等 五、实验方法： 1、 取2只小鼠，注射及处理： 1号：亚硝酸钠及美兰0.2ml ，左下腹注射 2号：亚硝酸钠及生理盐水各0.2ml ，左下腹注射 注射完，观察，2号小鼠立即死亡，1号小鼠仍存活；然后处死解剖，剪下一片肝脏组 织放于滤纸上，观察肝的颜色。 2、 取2只小鼠称重，编号3、4 注射及处理： 3号：氯丙嗪 0.2ml，左下腹注射 4号：生理盐水 0.2ml 左下腹注射 将3、4号小鼠分别分别放入钠石灰的广口瓶，塞上塞子，记录下量筒的液面，连通耗氧装置，开始计时，直至小鼠死亡，记录下时间和量筒下降的液面刻度 计算两只小鼠的耗氧量 小鼠耗氧率r（ml/min/g) =a/（w*t.） 六、实验结果： 1、几种类型的缺氧 序号 1 注射及处理 nano2+美兰 0.2ml 2 nano2+生理盐 水0.2ml 2、不同条件下小鼠缺氧耐受性 序体重注射及处理 存活时 间 氯丙嗪0.2ml （冰浴） 4 20.6 生理盐水（常 温） 27分 18 0.032 27分 总耗氧量(ml) 8 耗氧率(ml/min/g) 0.016 血液性缺氧 青石板色 缺氧类型 血液性缺氧 肝脏颜色 暗红色 号 （g） 3 18.8 七、实验分析： 1、血液性缺氧：由于血红蛋白的质或量的改变引起的缺氧。 亚硝酸盐可使血红素中二价铁氧化成三价铁，形成高铁血红蛋白，导致高铁血红蛋白血症。美兰为还原剂，可抑制氧化剂的中毒反应。因此1号小鼠存活，2号小鼠死亡。 2、不同条件下小鼠缺氧耐受性 氯丙嗪是中枢多巴胺受体的阻断剂，具有镇静、抗精神病、镇吐、降低体温及基础代谢、-肾上腺素能受体及m-胆碱能受体阻断、抗组织胺、影响内分泌等作用，再加上冰浴，制造低温环境，使得3号小鼠的基础代谢率将为最低，可延长其死亡时间。 八、实验结论： 1、缺氧是这2小鼠死亡的共同原因，不同的药物是小鼠死亡的条件，氯丙嗪加上低温可延长小鼠的死亡时间。 2、高铁蛋白血症（亚硝酸盐中毒）属于血液性缺氧，原因：二价铁离子被氧化为三价铁离子，肝脏呈青石板色。篇四：抗缺氧实验 中药药理学 实验教学大纲 （供四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用） 前言 本大纲适用于四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用。编写本大纲的目的是要求学生在学习中药药理学基础课的过程中，通过实验课的学习使学生掌握必要的中药药理实验原理、方法和技能，能正确、合理地使用仪器，为学习中医学基础课、中药学专业课打下牢固的基础；培养学生严肃认真的工作作风、实事求是的科学态度和独立分析问题、解决问题的能力；培养学生观察和分析实验现象的能力，巩固和加深对中药药理现象和规律的理解。现将大纲使用中有关问题说明如下： 一 为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与